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沈欢欢

作品数：14 被引量：32H指数：3
供职机构：黑龙江八一农垦大学动物科技学院更多>>
发文基金：国家自然科学基金国家教育部博士点基金黑龙江省海外学人科研资助项目更多>>
相关领域：生物学农业科学医药卫生更多>>

合作作者

文献类型

  • 12篇期刊文章
  • 1篇学位论文
  • 1篇会议论文

领域

  • 7篇生物学
  • 5篇农业科学
  • 2篇医药卫生

主题

  • 6篇细胞
  • 5篇慢病毒
  • 4篇比格犬
  • 4篇ERΒ
  • 3篇应激
  • 3篇腺苷酸
  • 3篇腺苷酸激酶
  • 2篇低氧
  • 2篇低氧应激
  • 2篇鼠肝
  • 2篇转录
  • 2篇转录活性
  • 2篇稳定细胞系
  • 2篇细胞系
  • 2篇冷应激
  • 2篇氯化
  • 2篇氯化钴
  • 2篇活性
  • 2篇基因
  • 2篇激素

机构

  • 11篇黑龙江八一农...
  • 5篇军事医学科学...
  • 2篇大庆市人民医...
  • 1篇贵州民族大学

作者

  • 14篇沈欢欢
  • 9篇杨焕民
  • 5篇曾林
  • 5篇孔凡志
  • 4篇连帅
  • 3篇胡仲明
  • 3篇马莉
  • 2篇赵彦斌
  • 2篇甄莉
  • 2篇王迪
  • 2篇郭文晋
  • 2篇游颖
  • 2篇姜楠
  • 1篇李悦
  • 1篇范君文
  • 1篇尹云厚
  • 1篇孙兆增
  • 1篇计红
  • 1篇刘艳芝
  • 1篇张宇辰

传媒

  • 4篇中国兽医学报
  • 3篇中国生物制品...
  • 2篇黑龙江八一农...
  • 2篇实验动物科学
  • 1篇中国实验动物...
  • 1篇全国动物生理...

年份

  • 2篇2017
  • 10篇2016
  • 1篇2015
  • 1篇2014
共 14 条 记 录，以下是 1-10
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排序方式：
低氧应激在细胞和分子水平的研究进展
2015年
应激是机体受到体内外非特异性有害因子的刺激表现出的机能障碍和防御反应。应激反应是生命体为了生存和发展所必需的机体防护机制的重要组成部分,当机体处于低氧状态下时,细胞作为机体的基本结构单元,会首先产生应激反应,而这种反应会因为细胞类型以及应激原刺激强度和时间的不同而不同。本文主要从细胞和分子水平阐述了低氧对细胞活力、增殖、凋亡以及某些基因表达调控的影响。
孔凡志沈欢欢彭梦玲杨焕民
关键词：低氧应激反应细胞水平分子水平
腺苷酸激酶4慢病毒过表达质粒的构建及鉴定被引量：2
2016年
目的构建腺苷酸激酶4(adenylate kinase 4,AK4)慢病毒过表达质粒,并进行鉴定。方法从Hep G2细胞中扩增AK4基因,将其克隆至载体LV5,构建重组质粒LV5-AK4,经测序鉴定后,将鉴定正确的LV5-AK4和包装质粒p Gag/Pol、p Rev、p VSV-G共转染HEK293T细胞,包装慢病毒;将慢病毒原液进行10倍系列稀释(10^(-1)~10^(-4)),感染HEK293T细胞,检测病毒滴度;慢病毒感染Hep G2细胞,Western blot法检测AK4蛋白的表达水平。结果重组质粒LV5-AK4经测序鉴定证明构建正确,并成功包装成慢病毒,病毒滴度为5×10~8 TU/ml。试验组Hep G2细胞中AK4蛋白的表达水平显著高于空白对照组及阴性对照组(P<0.01)。结论成功构建了携带AK4基因的重组慢病毒过表达质粒,为进一步研究低氧应激细胞中AK4的功能及其分子作用机制奠定了基础。
沈欢欢连帅计红杨焕民孔凡志
关键词：慢病毒过表达
大鼠急性冷应激模型的建立被引量：8
2016年
通过分析冷刺激对大鼠血清中细胞因子、皮质酮(CORT)、促肾上腺皮质激素(ACTH)的含量以及外周血淋巴细胞中热休克蛋白70(Hsp70)表达量的影响,构建大鼠急性冷应激模型,旨在为其相关研究提供研究基础。本试验急性冷刺激时间为12h。利用ELISA方法检测各组大鼠血清中IL-2、IL-4、IL-6、IL-10、TNF-α、CORT、ACTH的含量;采用Western blot和qRT-PCR方法检测各组大鼠外周血淋巴细胞中HSP70及mRNA表达量。结果表明,与对照组相比,急性冷刺激组大鼠血清中IL-2和ACTH的含量显著升高(P<0.05),IL-4、IL-6、TNF-α和CORT的含量极显著升高(P<0.01),IL-10无显著变化(P>0.05);外周血淋巴细胞内HSP70及其mRNA表达量呈显著升高水平(P<0.05)。成功构建大鼠急性冷应激模型。
彭梦玲刘艳芝何晶尹云厚马莉沈欢欢连帅杨焕民
关键词：细胞因子ACTHCORTHSP70
比格犬ERβ及其剪切异构体ERβ419、ERβ431作用机理的初步研究
雌激素通过细胞内特定雌激素受体(ERS)介导的信号通路来调节机体生殖生理活动。被介导的信号通路分为两种不同类型,通常被称为基因组和非基因组通路。基于此,本研究以比格犬ERβ以及课题组前期成功得到的2个剪切异构体ERβ41...
沈欢欢
关键词：比格犬雌激素ERΒ慢病毒转录活性
文献传递
Noggin基因沉默对BMP和Wnt信号通路表达的影响被引量：6
2016年
目的检测分析Noggin基因沉默对毛囊发育中BMP和Wnt信号通路的影响。方法采用实时荧光定量PCR和western blot技术对Noggin基因沉默的MC3T3-E1稳转细胞系中BMP-2、BMP-4、BMPR-IA、BMP-6、BMP-7、LEF-1、β-catenin的表达情况进行检测分析。结果实时荧光定量PCR结果显示,BMP信号通路中的五个基因的表达都受到Noggin基因沉默的显著的影响,其中BMP-2(P<0.001)、BMP-4(P<0.01)、BMP-6(P<0.001)、BMP-7(P<0.001)表达量均升高;BMPR-IA(P<0.01)表达量降低。同时Wnt信号通路中的两个基因LEF-1(P<0.001)、β-catenin(P<0.001)的表达也都显著降低。Western blot结果显示,两条信号通路中这几种蛋白的表达也都受到影响,其中显著升高的有BMP-2(P<0.05)、BMP-4(P<0.05)、BMP-6(P<0.05)和BMP-7(P<0.05);显著降低的是β-catenin(P<0.05)、BMPR-IA(P<0.01)和LEF-1(P<0.001)。结论在体外Noggin基因对BMP信号通路可能存在反馈性抑制机制,而对Wnt信号通路存在反馈性激活机制,为下一步探究在体内Noggin基因对BMP和Wnt信号通路表达的作用提供一定的依据。
马雨楠游颖沈欢欢孙兆增曾林法云智
关键词：WNT信号通路毛囊
急性冷应激对大鼠肝脏miRNA的影响被引量：13
2016年
将SPF级雄性Wistar大鼠随机分成冷应激组(4±0.05)℃和常温对照组(24±0.05)℃,再对2组大鼠肝脏中的6个miRNA进行qRT-PCR分析。结果显示:大鼠肝脏中6个miRNA的表达量均出现极显著差异(P<0.01),说明急性冷刺激对大鼠肝脏中的miRNA表达量有极显著(P<0.01)的影响,为今后的分子冷应激相关研究提供理论基础。
郭文晋甄莉张婧馨王迪连帅马莉沈欢欢杨焕民
关键词：冷应激MIRNA肝脏
氯化钴模拟低氧对HepG2细胞AK4和ATF4表达的影响
<正>最近十年来,越来越多与低氧应激反应相关的基因逐渐被发现,腺苷酸激酶4(AK4)基因就是其中之一,而活性转录因子4(ATF4)是低氧应激发生时的重要的转录因子,ATF4既可作为转录活化子,也可作为转录抑制子来调节基因...
沈欢欢孔凡志杨焕民
文献传递
氯化钴诱导HepG2细胞低氧应激模型的建立
2017年
探索氯化钴(CoCl_2)诱导人肝癌细胞系HepG2建立低氧应激模型的条件,并评价该模型。不同浓度氯化钴处理HepG2细胞后,PCR法检测低氧诱导因子1α(HIF-1α)、激活转录因子4(ATF4)、腺苷酸激酶4(AK4)基因的表达;细胞计数法绘制对照组细胞和氯化钴处理组细胞的增殖曲线。随着CoCl_2浓度升高和处理时间的延长,HIF-1αm RNA和ATF4 m RNA表达显著升高、AK4 m RNA表达显著下降、HepG2细胞增殖速度显著下降(P<0.05)、细胞膜不完整边界不清。氯化钴化学模拟低氧过程中影响了缺氧主要调节因子HIF-1α的水平,因此以氯化钴用于构建模拟HepG2细胞缺氧诱导模型是可行的,ATF4和AK4可能在参与HepG2细胞抗低氧应激反应中起关键作用。此模型的建立为进一步研究AK4基因的生理学功能奠定了基础。
常晓翠范威锋沈欢欢黄向月王升王媛冉伟孙可新姜楠孔凡志
关键词：氯化钴低氧应激腺苷酸激酶低氧诱导因子
比格犬ERβ_(1293)稳定细胞系的建立
2016年
为了建立ERβ1293的稳定表达细胞系,为ERβ1293的功能研究奠定基础。以重组质粒pEGFG-N1-ERβ1293为模板,扩增出全长ERβ1293,经胶回收纯化后连接到pMD18-T Vector,经测序鉴定后双酶切连接至Lenti-OE-Flag载体,重组质粒经PCR、双酶切、测序鉴定;使用HEK-293T包装细胞系,包装产生慢病毒。将所得病毒悬液感染HEK293细胞,利用Puromycin加以筛选,获得稳定表达细胞系,并采用Western blot方法验证基因表达情况。结果获得了Lenti-OE-Flag-ERβ1293重组质粒,并成功包装成慢病毒。利用病毒感染HEK293细胞后获得了稳定表达细胞系,Western blot方法证实,稳定表达细胞系可以成功表达ERβ1293蛋白,为研究ERβ1293的功能奠定了基础。
沈欢欢赵彦斌曾林孙兆増胡仲明杨焕民
关键词：慢病毒WESTERNBLOT
比格犬雌激素受体ERβ以及剪切异构体ERβ_(419)、ERβ_(431)的转录活性分析
2017年
目的分析比格犬雌激素受体ERβ以及剪切异构体ERβ_(419)、ERβ_(431)的转录活性。方法将细胞分为6组,空白对照组(正常含有培养液的293T细胞),LV5-ERβ组(稳定表达ERβ的293T细胞),LV5-NC组(感染慢病毒LV5空载体的293T细胞),Lenti-OE-Flag-ERβ_(431)组(稳定表达ERβ_(431)的293T细胞),Lenti-OE-Flag-ERβ_(419)组(稳定表达ERβ_(419)的293T细胞),Lenti-OE-Flag-ERβ_(419)-NC组(感染慢病毒Lenti-OE-Flag空载体的293T细胞)。其中每组组内又分为2组,每组细胞瞬时转染构建的重组质粒ERE-LUC和RLUC,每组中的其中一组加入终浓度为10μmol/L的E_2,而另一组内加入等量无水乙醇。分别检测每组加入刺激(E_2和无水乙醇)前后的荧光素酶活性。结果成功地将雌激素反应元件ERE克隆到荧光素酶报告载体pGL3-Vector启动子上;设计引物扩增出的hRluc-neo基因成功克隆到pGL3-Basic载体;加入雌激素后,比格犬ERβ转录活性明显升高(P<0.01),而ERβ_(419)和ERβ_(431)转录活性在雌激素加入前后变化不大(P>0.05)。结论成功建立了比格犬ERβ的转录激活系统,而ERβ_(419)和ERβ_(431)的LBD区域都有部分的缺失,使得其不能与雌激素结合,继而转录活性无法被激活。
沈欢欢沈欢欢范君文范君文曾林曾林
关键词：ERΒ雌激素转录活性
全选 清除 导出
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