李军
- 作品数:7 被引量:5H指数:1
- 供职机构:北京科兴生物制品有限公司更多>>
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- 残余卵清蛋白ELISA定量检测方法建立及初步验证
- 2009年
- 卵清蛋白(ovalbumin,OVA)作为异源物质,接种人体后易引起过敏副反应。因此残余OVA含量检测是生物制品尤其是以鸡胚为培养基质的流感疫苗生产过程中必须监控的指标之一。本研究在建立定量检测OVA双抗体夹心ELISA两步法后,对此方法进行优化,建立双抗体夹心ELISA一步法。通过与德国Seramun试剂盒对比,考察此检测方法的适用性。
- 李军宋莉莉于丹蔡芳张立志韩素芳高强
- 关键词:夹心ELISA卵清蛋白ELISA一步法双抗体夹心流感疫苗
- 流感病毒裂解疫苗的纯化方法
- 本发明提供一种流感病毒裂解疫苗的纯化方法,将流感病毒株接种鸡胚,经培养收获病毒液,病毒液经灭活后进行超滤浓缩,所得超滤液用KII连续流离心机进行蔗糖密度梯度离心,得到超离液,对超离液进行超滤透析去除蔗糖后进行分子筛凝胶层...
- 王金辉郝中华陈栋胡伟李军尹卫东
- 文献传递
- ELISA定量检测乙型脑炎病毒抗原被引量:3
- 2009年
- 目的建立双抗体夹心ELISA定量检测乙型脑炎(乙脑)病毒(JEV)抗原方法,用于乙脑疫苗工序产品抗原含量检测。方法以抗JEV多克隆抗体作为包被物,辣根过氧化物酶(HRP)标记的单克隆抗体作为酶标记物,四甲基联苯胺(TMB)-H_2O_2显色,建立双抗体夹心ELISA法。根据已知浓度抗原,确定定量标准曲线,检测样品中JEV抗原含量;并对该方法各项指标进行验证。结果该方法最佳线性范围为12.5~200 U/ml;r=0.9989;定量限度为12.5 U/ml;回收率为85.0%~103.3%;变异系数为4.3%~5.5%;与甲肝疫苗原液、流感疫苗原液、Vero细胞裂解液蛋白、小牛血清、人血清清蛋白均无交叉反应。结论该方法线性好,特异性强,灵敏度高,准确性、重复性和稳定性好,可用于乙脑疫苗各工序产品的抗原定量检测。
- 于丹李静李军蔡芳高强宋莉莉
- 关键词:双抗体夹心ELISA抗原检测
- 一种处理流感病毒收获液的方法
- 本发明提供了一种处理流感病毒收获液的方法,该方法将感染了流感病毒的鸡胚尿囊液收集后,分别使用碟片离心机、预过滤器、减菌滤器对其进行处理,使处理后的流感病毒收获液流感病毒抗原的损失率低于10%,显著降低流感病毒收获液中微生...
- 庞鉴勇陈秋兰惠增弟张景敏李军胡伟尹卫东
- 文献传递
- 流感病毒裂解疫苗的纯化方法
- 本发明提供一种流感病毒裂解疫苗的纯化方法,将流感病毒株接种鸡胚,经培养收获病毒液,病毒液经灭活后进行超滤浓缩,所得超滤液用KII连续流离心机进行蔗糖密度梯度离心,得到超离液,对超离液进行超滤透析去除蔗糖后进行分子筛凝胶层...
- 王金辉郝中华陈栋胡伟李军尹卫东
- 文献传递
- 甲型肝炎病毒单克隆抗体的筛选与初步应用被引量:1
- 2011年
- 目的筛选甲型肝炎病毒(Hepatitis A virus,HAV)单克隆抗体(MAb),并初步建立HAV双抗体夹心ELISA定量检测方法。方法用抗体亚型鉴定试剂盒鉴定MAb亚型;通过Western blot法鉴定MAb的特异性;SPA亲和层析法纯化MAb腹水,检测MAb的抗原识别表位;细胞培养法检测MAb的中和效价。确定双抗体夹心法包被物与酶标MAb的浓度,初步建立HAV双抗体夹心ELISA定量检测方法,并考察方法的线性范围。结果 12株HAV单抗中,1株为IgM型,3株为IgG3型,3株为IgG2a型,5株为IgG2b型;10株MAb可特异性结合HAV的VP2蛋白;7株MAb识别相同的抗原表位;7号MAb中和效价最高,可达1∶4 096。建立的HAV双抗体夹心ELISA定量检测方法的线性范围为15.625~250 u/ml,R2﹥0.97。结论 筛选出1株特异性好、中和效价较高的IgG2b型MAb,可用于制备酶标抗体和ELISA检测试剂盒,应用于甲肝疫苗中抗原的检测。
- 高加梅宋俐霏李军张立志于丹国泰
- 关键词:酶联免疫吸附测定
- 狂犬病毒核蛋白抗原ELISA定量法的建立及初步验证被引量:1
- 2008年
- 目的建立检测狂犬病疫苗各工序产品中核蛋白抗原含量的双抗体夹心ELISA法。方法以兔抗狂犬病毒多抗为包被抗体,辣根过氧化物酶标记的抗狂犬病毒核蛋白单抗作为酶标记抗体,对狂犬病毒核蛋白抗原含量进行定量测定,并对该方法进行初步验证。结果此方法线性相关系数大于0.97;最佳线性范围为0.000625~0.01IU/ml,定量限度为0.000625IU/ml;准确性为102%~109%;变异系数(CV)为7.2%~9.4%;与小牛血清、牛血清清蛋白(BSA)、卵清蛋白(OVA)、流感疫苗纯化液、乙脑疫苗纯化液、甲肝疫苗纯化液等均无交叉反应。结论该方法特异性强,灵敏度高,准确性、重复性和稳定性好,可用于狂犬病疫苗各工序产品中核蛋白抗原的定量检测。
- 韩素芳李军高强宋莉莉于丹桑建利
- 关键词:双抗体夹心ELISA核蛋白