孟丽红
- 作品数：1 被引量：0H指数：0
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- 抗Ⅳ型胶原荧光抗体的制备及性质研究
- 2015年
- 目的采用异硫氰酸荧光素标识Ⅳ型胶原单克隆抗体,为直接或间接荧光方法检测人体肝脏或血液中Ⅳ型胶原含量奠定基础。方法采用直接透析方法进行荧光素标识,标识后通过Sephadex G25凝胶过滤,除去多余的荧光素和其他杂质,获得标识荧光抗体纯品。经SDS-PAGE和双向免疫扩散凝胶电泳,对标识抗体进行纯度,荧光特性,抗体特异性进行检测鉴定。结果经全自动化学发光荧光图像分析仪检测SDSPAGE电泳结果,激发波490nm,发射波510nm,在150KD处有一条黄绿荧光带,其他处未见条带出现,凝胶图像分析仪检测纯度达96%;免疫琼脂双向扩散电泳结果显示,标识抗体与未标识抗体与抗原之间均有乳白色沉淀线,且沉淀物含量一致,荧光分析仪检测标识抗体与中心孔之间有黄绿色荧光条带。结论采用本研究方法制备的荧光抗体具有纯度高、荧光性好、特异性强等特点,为临床检测人体Ⅳ型胶原含量提供便利。
- 吴鹏王英皎孟丽红高诗博徐军
- 关键词：荧光抗体荧光素FITC
