朱新术
- 作品数:20 被引量:40H指数:5
- 供职机构:新乡医学院更多>>
- 发文基金:河南省教育厅科学技术研究重点项目河南省高等学校青年骨干教师资助计划项目河南省科技攻关计划更多>>
- 相关领域:生物学轻工技术与工程农业科学化学工程更多>>
- 黑曲霉菌株产纤维素酶的固态发酵条件优化被引量:5
- 2015年
- 为提高纤维素的利用率,以麸皮、玉米芯为主要原料,采用单因素试验和L9(34)正交试验方法,分别研究碳源、氮源、表面活性剂、培养基初始pH、料水比、培养温度及时间对黑曲霉XZ-3S产纤维素酶的影响,并在此基础上研究黑曲霉XZ-3S产纤维素酶的最优固态发酵条件。结果表明:最优发酵条件为麸皮与玉米芯的比例6∶2,硫酸铵浓度4.0%,吐温-40 0.4%,发酵培养基初始pH 4.0,培养温度28℃,培养时间96h,培养基料水比1∶1.5。在该工艺条件下,CMC酶活性及FPA酶活性分别达273.56IU/g和135.61IU/g。
- 周晨妍朱新术王燕郭阳阳陈兆会
- 关键词:固态发酵纤维素酶黑曲霉
- 一种木聚糖酶杂合酶工程菌株的构建方法
- 本发明公开了一种木聚糖酶杂合酶工程菌株的构建方法,首先利用生物信息学比对木聚糖酶XynZF-2基因序列与耐热木聚糖酶EvXyn11基因序列的同源性,通过N-端替换将XynZF-2的N-端48个氨基酸替换成木聚糖酶EvXy...
- 周晨妍刘振华王燕王拥涛李同彪朱新术
- 文献传递
- V1C定点突变木聚糖酶XynZF-2对酶热稳定性的影响被引量:9
- 2015年
- 对来源于黑曲霉(Aspergillus niger)XZ-3S的中温木聚糖酶Xyn ZF-2进行热稳定性改造,定点突变v1c,构建重组突变酶Xyn ZF-2V1C。重组原酶Xyn ZF-2与突变酶Xyn ZF-2V1C基因分别在大肠杆菌BL21(DE3)中表达并进行酶学性质分析。结果发现,突变酶Xyn ZF-2V1C最适温度为50℃,相比原酶Xyn ZF-2最适温度提高了10℃;在45℃条件下的半衰期t45℃1/2,突变酶Xyn ZF-2V1C相对于原酶Xyn ZF-2提高了10 min;原酶Xyn ZF-2与突变酶Xyn ZF-2V1C最适p H均为5.0,p H稳定范围均为5.0~9.0,基本没有变化;原酶Xyn ZF-2和突变酶Xyn ZF-2V1C的Km分别9.96 mg/m L和12.4 mg/m L,Vmax分别为74.63 U/mg和90.91 U/mg。
- 李同彪周晨妍朱新术王丹丹陈亚文谢晶晶
- 关键词:木聚糖酶定点突变热稳定性
- 一种β‑琼胶酶及其编码基因和应用
- 本发明涉及一种β‑琼胶酶及其编码基因和应用,所述β‑琼胶酶的氨基酸序列如序列表中SEQ ID NO:1所示,所述β‑琼胶酶的编码基因的核苷酸序列如序列表中SEQ ID NO:2所示。本发明所述的β‑琼胶酶,具有良好的热稳...
- 王燕张文博周晨妍朱新术解丽芹朱武凌郭帅张鹏陈超群
- 文献传递
- N-端二硫键及芳香族氨基酸对木聚糖酶XynZF-2热稳定性的影响被引量:7
- 2016年
- 为提高GH11家族中温木聚糖酶Xyn ZF-2的热稳定性,将其N-端替换成GH11家族的耐热性木聚糖酶Ev Xyn11的相应序列,并在该段序列引入芳香族氨基酸残基(P9Y、H14F),构建杂合木聚糖酶基因xyn EV-34,将木聚糖酶基因xyn ZF-2和xyn EV-34分别在E.coli BL21中表达,并分析温度和p H对酶活性的影响。结果表明,杂合木聚糖酶Xyn EV-34的最适温度为48℃,相比原酶Xyn ZF-2提高了8℃。在40℃保温1 h,原酶Xyn ZF-2残余酶活性下降到44.36%,而突变酶Xyn34残余酶活性为77.96%。在45℃,突变酶Xyn EV-34的半衰期t1/245℃为23 min,较重组酶Xyn ZF-2(t1/245℃=7 min)提高了16 min。同时,两种酶的最适p H均为5.0,但p H稳定性由原来的4.4~9.0扩增到了3.0~9.0。由此表明,二硫键以及芳香族氨基酸的引入,对该酶的热稳定性以及p H稳定性都有明显改善。
- 李同彪周晨妍朱新术王燕
- 关键词:木聚糖酶二硫键热稳定性
- 一种利用微生物生产酸性蛋白酶的方法
- 本发明属于酸性蛋白酶生产技术领域,具体涉及一种利用微生物生产酸性蛋白酶的方法,包括以下步骤:制备灭菌的固体培养基,其中盛放固体培养基所用曲盘的结构如下:包括一个底部设有若干透气孔的盘体,并且盘体的底部可拆卸的安装在盘体侧...
- 王燕徐志浩朱新术刘婷威郭帅
- 文献传递
- 一种蜂窝状有序多孔石墨烯涂层的制备方法
- 本发明公开了一种蜂窝状有序多孔石墨烯涂层的制备方法,采用改进的Hummers法,以膨胀石墨为原料,制备GO。BreathFigure自组装有序多孔结构要求材料溶于有机溶剂,GO亲水性强但在有机溶剂中分散性低,利用阳离子表...
- 赵长虹朱新术宋雪斌张其清
- 培养基优化方法
- 本发明公开了一种培养基优化方法,首先确定培养基关键成分,并用单因素确定其含量的取值范围;对多因素多水平的微生物培养基系统组成进行均匀设计优化;建立关键成分均匀设计配比与对应生物量的第一回归模型,求取预测模型关于培养基关键...
- 朱新术王璐王燕刘振华徐红彦赵文慧
- 黑曲霉木聚糖酶Xyn43A基因的克隆和生物信息学分析被引量:4
- 2015年
- [目的]克隆黑曲霉木聚糖酶(Xyn43A)基因,进一步对其进行生物信息学分析。[方法]利用3'RACE与5'RACE技术,克隆Xyn43A全长cDNA序列,扩增Xyn43A的DNA序列,并进行序列分析。[结果]cDNA全长1152bp(不含Poly(A)),包含一个957bp开放阅读框,编码信号肽19个氨基酸,成熟肽299个氨基酸,5'与3'非编码区分别为113bp、82bp。预测该蛋白相对分子量为33.47kDa,等电点为4.55。该序列含一个长度为86bp的内含子。Xyn43A为亲水性稳定蛋白,有4个N-糖基化位点,26个磷酸化位点。与GH43族木聚糖酶亲缘性较近,具有GH43族糖基水解酶典型的5叶片螺旋桨结构。[结论]克隆了一个新的木聚糖酶基因,属于GH43族糖基水解酶。
- 周晨妍王燕朱新术刘振华李同彪
- 关键词:黑曲霉木聚糖酶基因克隆生物信息学分析
- 引入疏水性氨基酸对GH11家族木聚糖酶热稳定性的影响被引量:8
- 2016年
- 生物信息学预测黑曲霉(Aspergillus niger)XZ-3S木聚糖酶Xyn ZF-2的催化活性中心位点,并在α-螺旋处引入疏水性氨基酸以提高木聚糖酶Xyn ZF-2的热稳定性。通过定点突变活性位点E103D、E194D,构建突变基因xyn ED。同时,将α-螺旋处氨基酸Val125、Lys178和Gly180分别突变为疏水性氨基酸Ala、Met和Ala,构建突变基因xyn MA。突变基因xyn ED和xyn MA在大肠杆菌BL21中表达发现,突变酶Xyn ED酶活性为原酶Xyn ZF-2的0.17%;突变酶Xyn MA最适温度由原来的40℃提高到了48℃;在40℃条件下保温1 h,突变酶Xyn MA酶活性仍高达74.71%(原酶Xyn ZF-2为44.36%);突变酶Xyn MA的半衰期t45℃1/2从原来的7 min提高到了19 min。因此,Glu103和Glu194为木聚糖酶Xyn ZF-2的催化活性中心位点,且在木聚糖酶Xyn ZF-2α-螺旋处引入疏水性氨基酸能大大提高其热稳定性。
- 李同彪周晨妍朱新术王丹丹
- 关键词:木聚糖酶热稳定性Α-螺旋疏水性定点突变