曹贝贝 作品数:29 被引量:84 H指数:6 供职机构: 河南农业大学 更多>> 发文基金: 国家自然科学基金 国家质检总局科技计划项目 河南省基础与前沿技术研究计划项目 更多>> 相关领域: 农业科学 医药卫生 轻工技术与工程 更多>>
猪德尔塔冠状病毒和猪传染性胃肠炎病毒多重RT-PCR检测引物及检测方法 本发明涉及一种病毒的检测方法,具体涉及一种猪德尔塔冠状病毒和猪传染性胃肠炎病毒多重RT‑PCR检测引物及检测方法。本发明利用引物检测猪德尔塔冠状病毒和猪传染性胃肠炎病毒多重RT‑PCR的方法,该方法不用于疾病的诊断和治疗... 胡慧 梁秀丽 曹贝贝 王亚宾 魏战勇 张君涛 刘芳 刘玲玲文献传递 猪流行性腹泻病毒SYBR Green Ⅰ荧光定量RT-PCR检测方法的建立 被引量:7 2015年 为建立一种快捷、特异、敏感检测猪流行性腹泻病毒(PEDV)的方法,本研究根据Gen Bank中登录的PEDV ZKHFQ株的N基因序列的保守区设计一对特异性引物,经过对反应条件进行优化,建立了检测PEDV的SYBR Green I荧光定量RT-PCR方法。该方法对常见的病毒均未检测到荧光信号,而仅对PEDV检测为阳性,其灵敏度为57拷贝/μL;组内和组间变异系数均小于1%。利用该方法对26份疑似PEDV感染的病料样品进行检测,结果显示本研究所建立的方法对PED的检出率比常规PCR高23.07%。本实验建立的荧光定量RT-PCR方法具有特异、敏感、快速、定量、重复性好等优点,可以用于临床PEDV的检测。 曹贝贝 韩丽 于朋飞 兰培英 程慧芳 宋月 胡慧关键词:猪流行性腹泻病毒 SYBR I 荧光定量RT-PCR 猪传染性胃肠炎病毒HN-2012分离株M基因遗传变异分析及其真核表达研究 被引量:1 2015年 以猪传染性胃肠炎病毒(TGEV)HN-2012株的M基因为模板,设计了1对特异性引物,扩增了M基因,经克隆测序后,将该基因序列与NCBI中TGEV毒株的相应序列进行同源性分析,构建系统进化树并进行遗传变异分析。将M基因亚克隆至真核表达载体p CAGGS-M-flag中,转染293T细胞,利用flag标签抗体进行Western blot检测分析。结果表明,TGEV HN-2012株的M基因与其他毒株间核苷酸的同源性分别为94.8%~99.0%,与中国其他毒株关系较远。Western blot结果可见大小约为29.5 k D的目的条带,表明M基因成功的在293T细胞中表达。 陈雅君 曹贝贝 徐卫松 程慧芳 胡慧关键词:M基因 293T细胞 PCV2与PPV共感染猪PBMCs对其白细胞介素转录时相影响 2015年 为分析PCV2与PPV体外共感染对猪外周血单个核细胞(PBMC)对其白细胞介素mRNA转录水平的影响,探讨PCV2与PPV体外混合感染的致病机制。运用荧光定量PCR技术,测定和分析了PCV2和PPV感染PBMC后PCV2,PPV的病毒核酸含量及IL-1β,IL-6,IL-8,IL-12p35,IL-12p40,IL-13,IL-17,IL-18等的转录时相变化。结果表明,PCV2,PPV能够感染PBMC细胞,PCV2/PPV共感染中PCV2,PPV的含量分别在24 h显著最高(P<0.01);PCV2,PPV单独感染和PCV2与PPV共感染PBMC后引起IL-1β,IL-6,IL-8,IL-17转录水平上升,IL12p35,IL-12p40,IL-18转录水平明显受到抑制。由PCV2,PPV共感染而引起的免疫反应和免疫抑制比单独感染更明显。 景亚星 张睿智 何潇湘 兰培英 曹贝贝 靳晓慧 徐卫松 魏战勇关键词:猪细小病毒 共感染 白细胞介素 猪IL-18增强猪细小病毒灭活疫苗猪体细胞免疫效果的研究 被引量:2 2016年 为了研究猪白细胞介素18是否增强猪细小病毒(PPV)灭活疫苗在猪体免疫效果,分别将猪白细胞介素18与自制猪细小病毒灭活疫苗和猪细小病毒灭活疫苗联合免疫仔猪,并设猪白介素18和生理盐水对照组。免疫后分别用间接ELISA方法和流式细胞技术检测仔猪抗体水平变化和仔猪外周血T淋巴细胞亚群动态变化。结果显示,免疫后猪白细胞介素18联合灭活疫苗组抗体水平与无猪白介素18灭活疫苗组相似,但免疫后猪白介素18联合PPV灭活疫苗组的CD3^+、CD3^+CD4^+、CD3^+CD8^+T淋巴细胞所占比值均高于相应的PPV灭活疫苗组,但差异不显著,且CD4^+/CD8^+在正常范围内。研究证实猪白介素18主要增强PPV油乳剂灭活疫苗的细胞免疫应答。 韩丽 何潇湘 王瑞宁 曹贝贝 耿静微 陈红英 魏战勇关键词:猪细小病毒 灭活疫苗 猪德尔塔冠状病毒、猪流行性腹泻病毒、猪传染性胃肠炎病毒多重RT-PCR检测引物 本发明公开了一种猪德尔塔冠状病毒、猪流行性腹泻病毒、猪传染性胃肠炎病毒多重RT-PCR检测引物。本发明多重RT-PCR对这3种病毒的最低检测量分别是4.05×10<Sup>1</Sup>拷贝/μL、4.52×10<Sup... 胡慧 曹贝贝 张君涛 郑兰兰 魏战勇 梁秀丽 周雍文献传递 纳米二氧化硅佐剂增强猪传染性胃肠炎病毒灭活疫苗小鼠免疫效果的研究 为探明纳米二氧化硅佐剂对猪传染性胃肠炎(Transmissible Gastroenteritis Of Swine,TGE)灭活疫苗的免疫增强效果.将60只5周龄SPF级昆明小鼠随机分为6组,分别将制备的粒径为70、1... 徐卫松 寇亚楠 于朋飞 曹贝贝 何潇湘 魏战勇关键词:猪传染性胃肠炎 纳米二氧化硅 佐剂 疫苗 牛源大肠杆菌O157∶H7河南分离株的主要毒力基因分析 被引量:1 2015年 为了解河南地区牛源大肠杆菌(E.coli)O157∶H7分离株携带毒力因子的情况,针对大肠杆菌O157∶H7的hly A、eae A、stx1和stx2毒力基因设计合成了4对特异性引物,通过PCR方法对前期分离的15株牛源E.coli O157∶H7的毒力基因进行分析。结果显示,有6株牛源E.coli O157∶H7的基因型为hly A+/eae A+/stx1-/stx2+,1株分离株的基因型为hly A+/eae A-/stx1-/stx2+,8株分离株的基因型为hly A-/eae A-/stx1-/stx2-。表明河南地区牛源E.coli O157∶H7至少有3种毒力基因型。 魏法山 曹贝贝 陶健 韩丽 程慧芳 胡慧关键词:毒力基因 猪德尔塔冠状病毒、猪流行性腹泻病毒、猪传染性胃肠炎病毒多重RT-PCR检测引物 本发明公开了一种猪德尔塔冠状病毒、猪流行性腹泻病毒、猪传染性胃肠炎病毒多重RT‑PCR检测引物。本发明多重RT‑PCR对这3种病毒的最低检测量分别是4.05×10<Sup>1</Sup>拷贝/μL、4.52×10<Sup... 胡慧 曹贝贝 张君涛 郑兰兰 魏战勇 梁秀丽 周雍文献传递 致病性大肠杆菌O157:H7生物被膜形成的影响因素研究 被引量:4 2015年 为了解不同因素对大肠杆菌(E.coli)O157∶H7生物被膜形成的影响,本研究采用生物被膜体外定量粘附性检测方法对E.coli O157∶H7在不同环境(培养时间,培养基类型,营养条件)下产生生物被膜的差异进行研究。实验结果显示,在载体为96孔聚乙烯微孔板中,E.coli O157∶H7体外生物被膜的形成最适的形成时间是培养48 h,最适合的培养基为5%的TSB,而且效果显著优于LB和M63培养基。另外,在M63培养基中当葡萄糖浓度为3%时可以促进生物被膜的形成。本研究结果表明,不同培养基和不同的葡萄糖浓度均可以影响生物被膜的形成。本研究为E.coli相关菌膜疾病防治提供了实验数据。 陶健 曹贝贝 魏法山 周琼琼 韩丽 程慧芳 王亚宾 胡慧关键词:生物被膜 影响因素