刘喆
- 作品数：9 被引量：7H指数：2
- 供职机构：中国医学科学院北京协和医学院基础医学院基础医学研究所更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金更多>>
- 相关领域：医药卫生更多>>
- 抗阿尔茨海默病Aβ人源单链抗体基因的筛选和表达被引量：3
- 2008年
- 目的从人源噬菌体单链抗体库中筛选与阿尔茨海默病发病中起关键作用的B淀粉样多肽（Aβ）142特异性结合的单链可变区抗体（scFv）基因，利用原核生物大肠杆菌进行可溶性表达，以获得抗Aβ142人源抗体。方法利用噬菌体展示技术对人源噬菌体单链抗体库进行多轮富集，以AB1-42啦为抗原经酶联免疫吸附（ELISA）检测，筛选与Aβ1-42特异性结合的阳性噬菌体克隆，再用阳性噬菌体感染E．coli HB2151进行可溶性表达，经SDS-PAGE、Western blot及ELISA法检测scFv单抗的可溶性表达水平及抗原结合活性。并对阳性scFv抗体基因进行基因测序鉴定。结果获得了7个特异性的抗Aβ1-42scFv阳性噬菌体克隆，其中4个克隆ELISA检测吸光度值（A值）高于阴性对照5倍以上；其中1株（A10）获得可溶性单链抗体的成功表达，表达产物主要位于菌体中，ELISA效价显示在全菌蛋白中A值高于对照5倍以上。其相对分子质量约为33000。DNA测序表明所获抗体的可变区基因属于scFv抗体基因，推导得到的氨基酸序列具有典型的抗体可变区结构。结论用人源噬菌体单链抗体库筛选出抗Aβ1-42越的人源抗体单链可变区基因，并成功表达了具有抗原结合活性的可溶性单链抗体，为进一步研究阿尔茨海默病的发病机制和治疗奠定了基础。
- 贾静刘喆赵雪梅梁平
- 关键词：阿尔茨海默病大肠杆菌噬菌体淀粉样Β蛋白抗体生成
- 体外筛选K562肿瘤细胞特异性的核酸适配子
- 胡燕刘喆杨先达
- 胶质瘤细胞特异aptamer的体外筛选及初步鉴定
- 目的:采用基于细胞表面展示的SELEX技术(Cell-based Systematic Evolution of Ligandsby Exponential Enrichment,cell-selex)筛选出能与胶质瘤A...
- 刘喆胡燕
- 文献传递
- HER2蛋白核酸适配子、复合体、组合物及其用途
- 本发明涉及HER2蛋白核酸适配子、复合体、组合物及其用途。具体而言，本发明涉及一种HER2蛋白特异性结合核酸适配子，其序列如SEQ ID NO：5所示。本发明还涉及由所述的HER2蛋白特异性结合核酸适配子和化疗药物结合而...
- 杨先达刘喆
- 文献传递
- 胶质瘤细胞特异aptamer的体外筛选及初步鉴定
- 刘喆胡燕
- 阿尔茨海默病发病中血管因素的作用被引量：4
- 2006年
- 刘喆梁平
- 关键词：阿尔茨海默病血管
- 体外筛选K562肿瘤细胞特异性的核酸适配子
- 核酸适配子(aptamer)是短的单链DNA或RNA,它们可通过自身形成的发夹结构和许多靶物质如蛋白、细胞、多肽等形成具有很强结合力的复合物,在疾病的诊断和治疗方面具有广泛的应用前景。目的:是体外获得和慢性粒细胞白血病细
- 胡燕刘喆杨先达
- 文献传递
- HER2蛋白核酸适配子、复合体、组合物及其用途
- 本发明涉及HER2蛋白核酸适配子、复合体、组合物及其用途。具体而言，本发明涉及一种HER2蛋白特异性结合核酸适配子，其序列如SEQ？ID？NO：5所示。本发明还涉及由所述的HER2蛋白特异性结合核酸适配子和化疗药物结合而...
- 杨先达刘喆
- 文献传递
- 新型HER2适配体的筛选及鉴定
- 2012年
- 目的研发能特异性结合人表皮生长因子受体2(HER2)的DNA适配体,为开发针对HER2的新型肿瘤靶向诊疗技术提供依据。方法体外合成全长86个碱基并含有40个随机寡核苷酸的单链DNA文库,以HER2表位肽为靶标,利用指数富集的配体系统进化技术(SELEX),从单链DNA文库中筛选能够选择性结合HER2多肽的核酸适配体;流式细胞术检测富集进度、适配体与HER2蛋白及HER2阳性细胞的结合特性;MFold软件预测二级结构。结果经多轮筛选获得了能够识别HER2多肽的DNA适配体HA5,其能够选择性地结合HER2蛋白及HER2阳性的乳腺癌细胞,而不结合胰蛋白酶和HER2阴性细胞。结论 DNA适配体HA5能选择性地识别HER2阳性的乳腺癌细胞,在研发针对HER2的新型肿瘤靶向诊疗技术方面具有应用潜能。
- 刘喆杨先达
- 关键词：适配体SELEX乳腺癌
