朱敏
- 作品数：56 被引量：523H指数：12
- 供职机构：浙江省疾病预防控制中心更多>>
- 发文基金：浙江省医药卫生科学研究基金国家科技重大专项艾滋病和病毒性肝炎等重大传染病防治专项更多>>
- 相关领域：医药卫生农业科学轻工技术与工程更多>>
- 金黄色葡萄球菌肠毒素基因的分型和分布被引量：122
- 2005年
- 目的:建立金黄色葡萄球菌肠毒素基因的检测方法。初步研究生牛奶中金黄色葡萄球菌肠毒素基因的分布状况。方法:应用PCR扩增经分离鉴定的金黄色葡萄球菌肠毒素基因SEA-SEJ,电泳检测扩增结果。结果:建立了金黄色葡萄球菌肠毒素基因PCR检测方法。从生牛奶中分离的29株金黄色葡萄球菌检测到SEA-SED和SEG-SEJ基因,没有检测到SEE基因。毒素基因携带率为65.5%,同时携带2种及以上毒素基因的菌株占37.9%。有SEA基因的占51.7%,含其它传统的毒素基因类型SEB、SEC、SED和SEE基因的菌株只占17.2%,携带新发现的毒素基因SEG、SEH、SEI和SEJ的菌株占41.4%。结论:建立的PCR检测金黄色葡萄球菌的肠毒素基因的方法可用于金黄色葡萄球菌肠毒素基因分型和分布的研究。研究表明,生牛奶中分离的金黄色葡萄球菌带毒率高,而且携带新发现的肠毒素基因的较多。
- 张严峻张俊彦梅玲玲王志刚朱敏王赞信
- 关键词：肠毒素基因基因携带率SEA基因生牛奶基因类型带毒率
- 转基因食品DNA提取技术研究被引量：10
- 2005年
- 目的:建立从食品中提取DNA的方法。方法:采用CTAB法、酶裂解法、SDS沉淀法3种方法提取转基因相关食品中的DNA,用核酸蛋白分析仪测定核酸的纯度和浓度、PCR扩增真核生物的18SrDNA基因评价提取核酸的质量。用转基因植物通常含有的CaMV35S启动子作为转基因成分的指示标记。结果:3种方法得到的DNA提取物OD260/OD280比值均接近1.6～1.9,CTAB法获得的DNA量较少,酶提取法所得的DNA提取物的量多,但扩增条带荧光较暗。SDS法能收获较多的DNA,PCR扩增效果好。用SDS法提取的DNA进行35S启动子检测,3份转基因样品均出现强阳性结果,而10份非转基因食品均未产生阳性条带。结论:SDS沉淀法提取DNA,具有经济、简便的特点,所提的DNA量适用于PCR检测。
- 梅玲玲徐艺珍程苏云朱敏
- 关键词：转基因食品CTAB法RDNA基因转基因成分SDS法阳性结果
- 16SrDNA分型技术在单核细胞增生李斯特菌分型中的应用被引量：7
- 2007年
- 目的：建立浙江省食品中单核细胞增生李斯特菌系统树,为食物中毒事件追源提供依据。方法：采用PCR扩增16SrDNA的方法,对浙江省2000～2005年从食品中分离的36株单核细胞增生李斯特菌进行分子分型,并结合MEGA软件构建单核细胞增生李斯特菌带型关系系统树状图。结果：所采用PCR方法可使单核细胞增生李斯特菌扩增出1.5 kb大小的条带,应用MEGA软件构建的系统树可以将36株单核细胞增生李斯特菌划分为两大类,18个分支;单核细胞增生李斯特菌血清型与16SR rDNA系统树无关联。结论：16SrDNA分型方法可以对单核细胞增生李斯特菌进行有效分型,可为单核细胞增生李斯特菌食源性疾病的流行病学调查和溯源提供科学依据。
- 梅玲玲朱敏潘雪霞张俊彦
- 关键词：单核细胞增生李斯特菌分子分型
- 两种方法同步检测禽样品沙门菌结果分析被引量：2
- 2011年
- 目的:应用LAMP(Loop-Mediated Isothermal Amplification)快诊技术及国标(GB)传统分离方法对杭州市不同来源75份新鲜禽(鸡)样品进行沙门菌检测,并对结果进行分析。方法:在应用GB法对禽样品进行传统分离、生化及血清学鉴定的同时,利用LAMP快诊技术同步检测沙门菌属invA基因及O9群抗原因子基因,并对两种方法检出率及效率进行比较。结果:GB法检出3份阳性,阳性率4.00%;LAMP快诊检测阳性结果因不同增菌液其检测结果不同,检测阳性率最高达17.33%。结论:禽样品可能受沙门菌污染量较低,以致GB法检出率相对较低,但LAMP技术的检测敏感性明显偏高,两种方法同步应用能全面、合理、科学地反映食品中目标菌的污染程度,建议基层实验人员尝试使用。
- 朱水荣潘军航朱敏张俊彦龚璞梅玲玲
- 关键词：环介导等温扩增技术沙门菌
- 使用计分法对干燥培养基质量的评价被引量：21
- 1996年
- 以计分法对干燥培养基及其原料质量进行评价。经检测，用不同工厂产蛋白胨配制的普通营养琼脂与ＳＳ琼脂，总分值相近，但鼠伤寒沙门氏菌与痢疾杆菌的生长分值却有明显差别。
- 杨更发朱敏
- 关键词：干燥培养基蛋白胨消毒
- 金黄色葡萄球食品分离株肠毒素基因型分析被引量：5
- 2010年
- 目的:检测金黄色葡萄球菌食品分离株肠毒素基因的阳性率和型别,比较生牛奶分离株和其它食品分离株肠毒素基因阳性率和分布状况。方法:采集生牛奶和其它食品标本,用国标方法分离鉴定金黄色葡萄球菌,VITEK32生化验证。应用PCR检测肠毒素,比较生牛奶分离株和其它食品分离株肠毒素基因阳性率,分析不同型别肠毒素基因分布特征。结果:金黄色葡萄球菌食品分离株肠毒素基因阳性率为67.5%,生牛奶分离株和其它食物分离株肠毒素基因阳性率没有显著差异,生牛奶分离株的新型肠毒素基因(SEG-SE J)阳性率显著高于其它食品分离株的。结论:金黄色葡萄球菌食品分离株肠毒素基因阳性率较高,生牛奶分离株肠毒素基因型与其它食品分离株肠毒素基因型的分布不同。
- 张俊彦张严峻朱敏梅玲玲潘军航龚璞
- 关键词：金黄色葡萄球菌肠毒素基因型
- 志贺菌TaqMan-MGB探针实时荧光聚合酶链反应快速检测方法的应用研究被引量：4
- 2009年
- 目的建立志贺菌TaqMan-MGB探针实时荧光PCR快速检测技术,为从患者、食品和环境中快速分离和鉴定志贺菌提供技术支撑。方法根据志贺菌ipaH基因序列设计一对特异性引物和TaqMan-MGB探针;通过对PCR扩增体系和反应条件的优化,建立志贺菌TaqMan-MGB探针实时荧光PCR快速检测方法;用添加已知志贺菌浓度的样本验证方法敏感性;用志贺菌标准菌株、分离株以及大肠埃希菌、沙门菌、副溶血性弧菌、金黄色葡萄球菌等致病菌验证方法特异性。结果用本研究建立的志贺菌TaqMan-MGB探针实时荧光PCR检测方法检测志贺菌,其Ct值与模板浓度的对数值具有很好的对应关系(Y=-3.93×log(X)+37.34,R=0.999),最低检测浓度为30cfu/ml,3株志贺菌标准株,30株志贺菌分离株检测结果均为阳性;而沙门菌、副溶血性弧菌、大肠埃希菌、金黄色葡萄球菌等91株其他细菌的Ct值均>35或扩增曲线成一平滑直线。与常规分离鉴定方法比较差异无统计学意义(P>0.05,χ2=0.27)。对于纯菌和食品样品整个检测过程仅需2h和10h。结论志贺菌TaqMan-MGB探针实时荧光PCR检测技术具有特异性强,敏感性高,易操作等优点,有很好的应用前景和研究价值。
- 梅玲玲朱敏张俊彦占利
- 关键词：志贺菌实时荧光PCRTAQMAN-MGB探针
- 浙江省209株沙门菌PFGE指纹图谱研究
- 目的建立浙江省沙门菌PFGE指纹图谱资料库,为查明沙门菌食源性疾病污染源,确定各病例之间的病原学关系,及时处理大范围内呈散发特征的沙门菌事件提供科学依据。方法收集、提取全省历年来在各类食品和腹泻病人中分离的209株沙门菌...
- 梅玲玲罗芸叶菊莲朱敏张俊彦潘军航龚璞杨婷婷
- 文献传递
- 浙江省369份淡、海水鱼香港海鸥型菌污染状况研究被引量：9
- 2007年
- 目的掌握浙江省淡、海水鱼中香港海鸥型菌污染状况,为防止食源性香港海鸥型菌病的发生和流行提供科学依据。方法用改良头孢哌酮麦康凯琼脂分离,API20NE鉴定香港海鸥型菌。K-B纸片扩散法作耐药性测定。通用引物扩增16SrDNA并与香港海鸥型菌HKU1株开展同源性比较。结果369份样品检出香港海鸥型菌18株,阳性率为4.88%,其中,鲤鱼检出率为25.00%,草鱼的阳性率为10.26%,海水鱼以及鲫鱼、鲢鱼、扁鱼等淡水鱼中未分离出。分离的香港海鸥型菌16SrDNA序列与HKU1株仅相差1～2个碱基,同源性在99.6%～100.0%之间;18株菌对头孢拉定、万古霉素、甲硝唑、克林霉素、头孢哌酮完全耐药,对红霉素、亚胺培南、克拉霉素、氨曲南、庆大霉素、丁胺卡那霉素、三甲氧苄氨嘧啶、四环素、氯霉素、多粘菌素B、环丙沙星完全敏感,对头孢噻吩、胺苄西林、头孢曲松的耐药性分别为83.33%、61.11%和5.56%。结论浙江省存在香港海鸥型菌污染源,建议相关监督部门应加大这类产品的管理力度,防止香港海鸥型菌病在我省的发生和传播。
- 梅玲玲高雯洁朱敏潘军航张俊彦汪炜姜德霞张严峻
- 关键词：鱼类食品污染抗药性DNA核糖体
- 不同来源的副溶血性弧菌生物学特性研究被引量：12
- 2006年
- 为掌握浙江省不同来源的副溶血性弧菌的血清型分布及毒力基因携带情况,采用血清凝集试验对333株副溶血性弧菌进行血清型分型,采用PCR技术检测副溶血性弧菌的毒力基因TDH。临床副溶血性弧菌菌株血清型分布于7个O抗原群,以O3为主,占临床菌株数的71.81%;O4血清型与往年相比有所上升,占到了16.60%。海产品菌株的血清型分布于8个O抗原群,以O5为主,占所有海产品菌株的47.30%。临床菌株的TDH检出率为95.65%,海产品菌株的TDH检出率为6.06%。血清型相同但来源不同的菌株的TDH检出率不同。浙江省从海产品中分离出的副溶血性弧菌菌株与分离自食源性疾病患者的副溶血性弧菌菌株的主要血清型、毒力基因TDH都存在差别。该工作为预防副溶血性弧菌引起的食品中毒提供了科学依据。
- 程苏云李恩民张俊彦朱敏梅玲玲
- 关键词：弧菌副溶血性生物学食品微生物学
