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克隆猪隐睾症雌雄激素及其受体基因表达的研究被引量：2: 2015年; 利用化学发光免疫技术测定了3头隐睾克隆猪和3头正常猪不同阶段(2—6月龄)的睾酮(T)和雌二醇(E_2)激素的水平;运用相对荧光定量PCR技术检测AR和ER基因在睾丸组织中的mRNA表达量。结果表明:正常猪血清T和E_2浓度从2月龄到6月龄呈上升趋势,隐睾克隆猪血清E_2浓度变化趋势与对照组相似,T变化趋势为先缓慢升高然后降低,5月龄达到最高[(1.98±1.06)ng/mL],且各阶段血清浓度均显著低于正常猪;ER基因在克隆猪睾丸中表达量高于对照组,但差异不显著,AR基因表达量则反之,且差异显著。血清T的低水平和睾丸AR基因mRNA低表达均可能是引起克隆猪发生隐睾的因素。; 李芳芳戴建军吴彩凤张树山王昕吴鋆龙; 关键词：克隆猪隐睾睾酮受体

猪冷冻精子的细胞凋亡及凋亡途径初步研究被引量：8: 2015年; 旨在研究低温冷冻解冻对精子细胞凋亡的影响,并探讨凋亡发生的可能相关途径。采用流式细胞仪检测解冻后精子内的ROS水平和TUNEL染色后的细胞凋亡情况,使用酶标仪检测精子内ATP含量,利用相对荧光定量PCR技术检测不同凋亡途径中相关基因的表达量变化。结果表明:冷冻后精子活力、顶体和质膜完整率显著下降(P<0.05);冷冻精子TUNEL染色后的凋亡率(80.4%)与新鲜组(9.7%)相比显著升高(P<0.05);冷冻组精子内ROS绿色荧光比率(58.2%)亦显著高于新鲜组(P<0.05);与新鲜组0.926μmol·L-1的ATP浓度相比,冷冻组精子的ATP浓度(0.247μmol·L-1)则显著下降(P<0.05);qRT-PCR检测结果显示,冷冻组中TNF-α、Fas、Caspase家族、P53和Bax基因相对表达量升高,其中Fas、P53、TNF-α、Caspase-8和Caspase-9等相对表达量显著升高(P<0.05);BCL-2、BIRC-5、MnSOD、CuZnSOD和SURVIVN基因相对表达量降低,其中BIRC-5、MnSOD、SURVIVN显著降低(P<0.05)。结果表明:低温冷冻解冻会使猪精子细胞发生严重的凋亡,死亡受体外源性凋亡途径和线粒体内源性凋亡途径均可能介导了冷冻后精子的凋亡。; 王昕戴建军吴彩凤张树山张树山张德福; 关键词：细胞凋亡凋亡途径

WT1和FGF9基因在克隆猪隐睾中mRNA表达和DNA甲基化状态分析被引量：3: 2014年; 为探究本课题组获得的2头体细胞克隆猪隐睾症形成的可能原因,本研究利用相对荧光定量PCR技术检测了WT1和FGF9基因在睾丸组织中mRNA表达量变化,同时利用亚硫酸氢盐测序法分析了其启动子区CpG岛甲基化状态。结果表明:WT1和FGF9基因在2头克隆猪睾丸中表达量均高于对照组,其中克隆猪C1中2个基因的表达量与对照组相比差异明显(3.49、9.83 vs 1.00)。亚硫酸氢盐测序结果显示,WT1基因启动子区在克隆猪C1和C2中的甲基化程度没有明显变化,而FGF9基因启动子区2个CpG岛在克隆猪C1中甲基化程度高于对照猪N(94.54%vs 18.18%,71.11%vs 26.67%),而在克隆猪C2中不明显。综上表明:WT1基因的异常表达可能是引起克隆猪发生隐睾的原因之一,但其甲基化水平不是影响该基因异常表达的因素;克隆猪C1睾丸组织FGF9基因启动子区发生超甲基化,这可能导致其mRNA表达异常,从而成为诱导克隆猪隐睾发生的可能原因。; 李芳芳戴建军吴彩凤张树山张德福顾晓龙吴鋆龙王昕; 关键词：隐睾克隆猪

上海梅山猪封闭群内源性逆转录病毒的检测及亚型分析被引量：1: 2015年; 为检测分析上海梅山猪携带猪内源性逆转录病毒(porcine endogenous retrovirus,PERV)的情况,为该猪种作为器官移植供体的生物安全性提供现实依据,笔者从上海嘉定区梅山猪育种中心的梅山猪封闭群内随机采集45头猪的耳组织,并构建耳成纤维细胞系,利用PCR检测PERV前病毒核心蛋白基因(gag)、多聚酶基因(pol)以及囊膜基因(env)的基因组DNA,利用RT-PCR的方法检测m RNA表达状况。结果发现被检测的45份样品均携带完整的3种亚型的PERV前病毒DNA;RT-PCR结果显示,45份样品中有40份同时有PERV-A和PERV-B两种亚型的表达,还有5份样品仅检测到PERV-B亚型的表达,未检测到PERV-C亚型的表达。鉴于生物安全性方面的考虑,该猪种能否作为人异种移植的供体仍有待进一步商榷。; 吴鋆龙张德福吴彩凤张树山王昕戴建军; 关键词：梅山猪猪内源性逆转录病毒病毒亚型

若干与冷冻猪精子细胞凋亡现象有关的线粒体基因的初步探讨: 引言/目的精子冷冻技术是现代比较常用辅助生殖技术,应用在动物中可以够有效的保存有价值的基因资源.探索影响猪冻精活力及受精潜能的决定因子是其能否成功应用于繁殖生产的关键环节.精子线粒体的主要作用是通过氧化磷酸化对精子产能...; 王昕戴建军吴彩凤张树山张德福吴鋆龙李芳芳

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王昕