李松 作品数:36 被引量:100 H指数:5 供职机构: 湖南工业大学 更多>> 发文基金: 国家自然科学基金 国家重点基础研究发展计划 湖南省教育厅科研基金 更多>> 相关领域: 生物学 理学 医药卫生 化学工程 更多>>
一种基于磁性纳米粒子PCR的高通量SNP分型方法 被引量:9 2007年 利用磁性纳米粒子PCR扩增(MNPs-PCR)和等位基因特异性双色荧光探针(Cy3,Cy5)杂交,建立了一种单核苷酸多态性(SNP)分型的新方法.应用该方法对9个样本MTHFR基因的C677T多态进行检测,野生和突变型样本正错配信号比大于9·0,杂合型正错配信号比接近1·0,分型结果经测序验证.此方法无须产物纯化、浓缩,扫描分型结果快速、直观,是一种操作简单、快速、高通量、高灵敏度的分型方法. 刘洪娜 李松 王志飞 何农跃 贺全国关键词:磁性纳米粒子 PCR SNP分型 基于磁性颗粒微阵列与双色荧光杂交的单核苷酸多态性分型方法研究 被引量:3 2010年 基于磁性颗粒微阵列与双色荧光杂交,建立了单核苷酸多态性(Single nucleoitide polymorphism,SNP)分型方法。将利用不对称扩增得到的含有待检测位点生物素标记的单链PCR产物固定在链亲和素修饰的金磁纳米颗粒(Gold magnetic nanoparticles,GMNPs)表面;将ssDNA-GMNPs混合物点样在底部固定有磁铁的载玻片上构建磁性颗粒微阵列,然后在基因框中与双色荧光探针杂交;杂交完全后,充分洗涤,通过扫描获得分型结果。通过优化不对称PCR的扩增条件,直接扩增出产量较高的单链DNA作为靶序列用于分型。利用本方法对24个样本MTHFR基因的C677T位点多态性进行了检测。实验证明,本方法步骤简单,易实现自动化操作、非常适用于分子诊断与法医鉴定。 刘洪娜 李松 刘丽赏 田岚 贾英英 李智洋 邓燕 何农跃关键词:单核苷酸多态性 一种旋转式核酸检测卡盒 本申请公开了一种卡盒,用于样本前处理与核酸检测。所述卡盒包括:移液器、垂直导杆、外壳、密封盖、底座、至少2个密封圈、至少2个弹簧;内置精确的定量、定速、定位的可旋转的吸液/分液器;底座至少一个试剂室。 陈柱 何农跃 李松 聂立波 邓燕文献传递 一种柱塞式核酸检测一体化卡盒及其检测方法 本发明公开了一种柱塞式核酸检测一体化卡盒及其检测方法。所述一体化卡盒包括反应室组、试剂室组、均液室组、检测室组和活动柱塞,反应室组与试剂室组、废液室和均液室组通过管道连接,均液室组与检测室组通过管道对应连接,所述反应室组... 陈柱 何农跃 李松 周枫林 邓燕 赵泽湘 牟贤波文献传递 有机硅3D打印的研究进展 被引量:1 2019年 有机硅材料具有良好的生物相容性、化学稳定性和力学性能等,在生物医用、包装与交通运输等方面应用广泛。传统工艺生产有机硅制品时间长、成本高,而且无法做到个性化生产。有机硅的3D打印是用3D打印技术加工成型有机硅材料制品,它能够实现有机硅产品的快速、个性化生产。介绍了直接有机硅3D打印中光固化3D打印与基于挤出的3D打印2种技术在材料、打印工艺方面的研究进展。 李松 卢依婷 黄宇刚关键词:有机硅 亚甲基四氢叶酸还原酶基因C677T和A1298C多态与胃癌的遗传易感性 被引量:7 2006年 目的:探讨代谢叶酸的亚甲基四氢叶酸还原酶(MTHFR)基因单核苷酸多态与胃癌风险的关系。方法:以聚合酶链反应和限制性片段长度多态方法分析170例胃癌病人和性别、年龄配对的140例正常对照者的MTHFR基因C677T和A1298C基因型及其与胃癌风险的相关性。结果:在正常对照中,MTHFR基因677CC、CT、TT基因型频率分别为47.9%、40%和12.1%,而在胃癌病人中分别为35.9%、45.9%和18.2%。在病例组中677(CT+TT)变异型基因者占64.1%,显著高于对照组中的52.1%,差异具有显著意义(X^2=4.54,P〈0.05)。与677CC基因型者相比,变异型基因者和下r型基因者发生胃癌的危险性分别高1,67倍(OR为1.67,95%CI为1.06—2.64)和2.67倍(OR为2.67,95%CI为1.382—5.341)。A1298C基因型在病例和对照中的分布差异无显著性意义。但进一步分析发现,1298变异基因型与677变异基因型之间有协同作用。携带MTHFR677TT/1298AC基因型个体发生胃癌的风险是携带MTHFR677CC/1298AA基因型个体的3.684倍(95%CI为0.829~25.776)。结论:MTHFR单核苷酸多态是胃癌的遗传易感性因素。 李松 祭美菊 侯鹏 何农跃关键词:胃癌 亚甲基四氢叶酸还原酶基因 疾病易感性 基于磁性纳米颗粒技术的高通量单核苷酸多态性分型方法研究 李松 何农跃 刘洪娜 王志飞 邓燕 单核苷酸多态性(Single Nucleotide Polymorphisms,SNPs)是人类基因序列中最常见的变异,对其研究有助于解释个体的表型差异、不同群体和个体对复杂疾病的易感性、以及对各种药物的耐受性和对环境因...关键词:关键词:单核苷酸 纳米材料 自动检测系统 一种基于磁富集靶序列PCR的扩增方法及其灵敏度检测 2012年 以亲和素修饰的磁性纳米颗粒γ-Fe2O3为载体,提出了基于磁富集靶序列PCR扩增方法。首先将结合有生物素标记特异性引物的靶序列富集到亲和素修饰的γ-Fe2O3纳米颗粒表面,然后通过变性获取单链的靶序列,再进行PCR扩增。同时,优化了靶序列和特异性引物杂交的最适温度和磁性纳米颗粒γ-Fe2O3的最佳用量,并对该方法的灵敏度进行了检测。通过实验得出:该方法中,最适的杂交温度为53℃,磁性纳米颗粒的最佳用量为90μg,靶序列的最低检出浓度为5×10-10ng/mL。 牟贤波 刘洪娜 李松 刘丽赏关键词:Γ-FE2O3 杂交 PCR 一种基于磁性颗粒和通用连接子扩增技术的单核苷酸多态性分型方法 2009年 提出了一种应用磁性颗粒和通用连接子扩增技术(Linker-PCR)的多位点单核苷酸多态性(SNP)分型方法.该方法首先通过酶切将样本基因组DNA打断,然后将通用连接子通过T4DNA连接酶与各个酶切片段连接,利用生物素标记的通用引物将样本进行全基因组扩增.扩增后,将生物素标记的Linker-PCR扩增产物固定到亲合素修饰的磁性颗粒表面,通过与双色荧光标记的等位基因特异性探针杂交,对待测位点进行分型.利用该方法,我们对10个样本MTHFR基因上的2个SNP位点进行了分型,分型结果准确、正错配信号比大于3.由于利用Linker-PCR技术来实现对靶序列的全基因组扩增,该方法非常适用于大量样本的多基因多位点的SNP分型研究. 刘洪娜 李松 刘丽赏 田岚 邓燕 李智洋 戴亚斌 何农跃关键词:磁性颗粒 SNP分型 温州市苍南县基层网格化治理体系优化研究 随着城镇化进程的不断推进,诸多基层社会治理问题日渐显现,网格化治理是对政府公共管理效能提升和公共服务水平改进的探索,也是一种基层治理模式创新。苍南县是浙江省的“南大门”,毗邻福建省,地貌多海洋、多山地,人情、社情较为复杂... 李松关键词:多元共治 文献传递