刘浩
- 作品数：12 被引量：37H指数：4
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- miR-34c逆转乳腺癌耐药细胞株MCF-7/DOX耐药性的研究被引量：4
- 2015年
- miR-34在肿瘤发生发展中起着至关重要的作用,然而,mi R-34在肿瘤耐药中的作用研究不多。该研究将合成的mi R-34c成熟序列转染乳腺癌阿霉素(doxorubicin,DOX)耐药细胞MCF-7/DOX,探讨mi R-34c体外逆转MCF-7/DOX细胞耐药性作用及其可能的机制。采用Real-time RT-PCR检测mi R-34c在乳腺癌耐药细胞株MCF-7/DOX中的表达,MTS法检测miR-34c对MCF-7/DOX细胞阿霉素耐药性的影响,流式细胞术检测miR-34c对MCF-7/DOX细胞周期和凋亡的影响,Real-time RT-PCR和Western blot法检测多药耐药相关蛋白MDR、MRP以及细胞周期与凋亡相关蛋白Bcl-2、E2F3的表达。结果显示,mi R-34c在乳腺癌MCF-7/DOX耐药细胞中低表达,转染mi R-34c可明显增加耐药细胞对阿霉素的敏感性;流式分析发现,miR-34c可以促进耐药细胞G2期细胞周期阻滞和凋亡;与对照组相比较,miR-34c转染组细胞MDR、MRP蛋白表达无明显变化,而Bcl-2、E2F3 mRNA和蛋白表达均明显下调。研究表明,miR-34c直接靶向抑制Bcl-2和E2F3的表达,诱导细胞周期G2期阻滞和凋亡,进而增强MCF-7/DOX耐药细胞对阿霉素的敏感性。
- 刘浩贺智敏
- 关键词：乳腺癌耐药
- miRNA-34c对人前列腺癌PC3细胞增殖和侵袭能力的影响被引量：3
- 2014年
- 目的 探讨miR-34对人前列腺癌PC3细胞增殖、侵袭的影响及可能的分子机制.方法 利用化学合成的miR-34c mimics转染人前列腺癌PC3细胞,通过MTT、Transwell迁移实验检测过表达miR-34c后细胞增殖及侵袭能力的变化;采用荧光定量PCR检测酪氨酸激酶受体c-met mRNA的表达;利用Western blot检测c-met、细胞周期相关蛋白cyclin D1、上皮间质转化（EMT）相关标志物的表达情况.结果 miR-34c过表达后PC3细胞的增殖和侵袭能力均明显降低.生物信息学分析发现在酪氨酸激酶受体c-met 3 ＆#39;-UTR上有2个潜在的miR-34c结合位点,且过表达miR-34c明显抑制c-met mRNA和蛋白的表达.Western blot结果显示,过表达miR-34c的PC3细胞E-cadherin表达上调,N-Cadherin、cyclin D1表达下调.结论 miR-34c可能通过抑制c-met、cyclin D1、N-Cadherin的表达,上调E-cadherin的表达,对前列腺癌PC3细胞增殖、侵袭起到抑制作用.
- 刘浩尹江贺智敏
- 关键词：微RNAS肿瘤浸润聚合酶链反应
- FOX03a通过下调VEGF—A抑制乳腺癌增殖和侵袭转移被引量：2
- 2017年
- 目的探讨叉头转录因子O3a（FOXO3a）通过下调血管内皮生长因子（VEGF）-A抑制乳腺癌细胞增殖和转移的作用。方法使用SiRNA干扰乳腺癌MCF-7和MDA—MB-231细胞中FOXO3a的表达，采用细胞增殖曲线和细胞克隆法检测干扰后细胞增殖改变；采用细胞划痕实验和transwell实验检测干扰后细胞迁移能力的改变，通过realtime RT—PCR和Western blot技术检测干扰后细胞中VEGF-A的mRNA和蛋白表达的改变，检测20例乳腺癌患者的乳腺癌组织及其配对癌旁正常乳腺组织中FOX03a和VEGF—AmRNA表达情况。结果干扰FOXO3a后MCF-7和MDA—MB-231细胞的增殖能力及侵袭转移能力增强（P〈0．05），且VEGF—A的mRNA和蛋白表达均上调；20例乳腺癌组织中有15例（75％）FOXO3a表达低于对应癌旁组织，VEGF—A表达高于对应癌旁组织，FOXO3a和VEGF—A表达呈高度负相关（r=-0．458，P〈0．01）。结论FOXO3a对乳腺癌细胞增殖和侵袭转移具有抑制作用，该作用可能与其抑制VEGF—A表达有关。
- 宋莹邱惠思刘浩贺智敏
- 关键词：叉头转录因子类血管内皮生长因子A肿瘤侵润肿瘤转移
- 组蛋白去乙酰化酶抑制剂对Her2阳性乳腺癌细胞侵袭转移的抑制作用和机制被引量：2
- 2017年
- 目的探讨组蛋白去乙酰化酶抑制剂MS-275和线性肟酸（SAHA）对HER2阳性乳腺癌细胞系BT474和SKBR3侵袭转移能力的影响和可能的作用机制。方法采用4μmol／LMS-275、50μmol／LSAHA分别处理BT474及SKBR3细胞，对照组加入适当体积的PBS，四唑氮化合物（MTS）法检测细胞存活率，流式计数检测细胞凋亡率，Transwell实验检测细胞侵袭转移能力，Western blotting检测相关蛋白表达水平。结果SAHA、MS-275处理的BT474细胞存活率分别为（39±11）％、（54±8）％，SKBR3细胞存活率分别为（62±6）％、（71±9）％；SAHA、MS-275处理BT474细胞的凋亡比例分别为对照组的（8．46±0．29）倍和（4．15±0．71）倍，SKBR3细胞的凋亡比例分别为对照组的（5．51±1．24）倍和（4．04±0．69）倍；BT474细胞对照组、SAHA处理组、MS-275处理组迁移至下室细胞数分别为184．7±18．8、104．3±7．1、131．3±9．1，SKBR3细胞对照组、SAHA处理组、MS-275处理组迁移至下室的细胞数分别为60．0±16．7、14．3±6．5、34．3±8．7；Western结果显示SAHA、MS-275能够抑制BT474、SKBR3细胞中Vimentin、Her2、β-eatenin、HDAC1的表达，上调H3的乙酰化水平及E-eaherin的蛋白表达水平。结论SAHA和MS-275抑制HER2阳性乳腺癌细胞系BT474和SKBR3侵袭转移作用，可能与其抑制Vimentin、Her2、β—catenin，上调E—eaherin表达有关。
- 尹江刘浩郑国沛谷依学贺智敏
- 关键词：肿瘤侵润肿瘤转移
- 肝细胞生长因子诱导人肝癌细胞上皮间质转化被引量：6
- 2015年
- 上皮间质转化(epithelial-mesenchymal transition,EMT)与肿瘤侵袭转移密切相关.虽然肝细胞生长因子(hepatocyte growth factor,HGF)已被证实为肿瘤EMT的主要诱导剂,但是HGF诱导肿瘤EMT发生的分子机制尚不完全清楚.本研究旨在探讨Snail在HGF诱导肝癌细胞上皮间质转化中的作用.用HGF处理肝癌Hep G2和Hep3B细胞,显微镜观察细胞形态变化,划痕试验及Transwell试验检测细胞迁移能力,Western印迹检测Met,AKT的磷酸化及蛋白质表达的变化,Western印迹与real-time RT-PCR检测上皮细胞表面标志E-Cadherin和间质细胞表面标志NCadherin、Fibronectin的表达变化,以及EMT相关转录因子的表达变化.经HGF处理的Hep G2、Hep3B细胞,Met和AKT的磷酸化水平显著增强;相差倒置显微镜下观察细胞形态向间质型细胞形态转化;细胞划痕和Transwell试验检测细胞的迁移能力较对照组显著增强;Real-time RT-PCR和Western印迹实验显示HGF的诱导能上调间质标记蛋白的表达及下调上皮型标志蛋白的表达.进一步发现,HGF能上调转录因子Snail的表达,干扰Snail能逆转HGF对Hep G2和Hep 3B细胞EMT发生的诱导作用.由此可见,HGF可能通过诱导Snail的表达促进肝癌细胞EMT的发生.这为阐明肝癌细胞侵袭转移机制,以及肝癌的防治提供新线索.
- 宋莹刘浩尹江张志杰贺智敏
- 关键词：肝癌肝细胞生长因子SNAIL
- 过表达NDRG1对TGF-β诱导肺癌A549细胞上皮-间质转化的逆转作用被引量：4
- 2015年
- 目的 探讨NDRG1对转化生长因子β（TGF-β）诱导的人肺癌A549细胞上皮-间质转化（EMT）的逆转作用及可能机制.方法 转染NDRG1过表达质粒至A549细胞,采用5 μg/L TGF-β1处理细胞,相差显微镜观察细胞形态学变化;Transwell侵袭实验检测A549细胞侵袭能力;Real-time RT-PCR、Western blot分别检测NDRGl mRNA、蛋白的表达,Western blot检测EMT相关标志物钙黏蛋白（E-cadherin）和波形蛋白（Vimentin）,以及EMT相关信号分子Snail、AKT、Smad的表达.结果 TGF-131可诱导A549细胞向间质样细胞表型转化,上调间质样标志物Vimentin表达和下调上皮样标志物E-cadherin表达,并增强细胞侵袭能力;过表达NDRG1可逆转TGF-131的上述作用;且过表达NDRG1能够抑制AKT的磷酸化,下调EMT转录因子Snail的表达.结论 NDRG1能够逆转TGF-B1对人肺癌A549细胞上皮一间质转化的诱导作用,并降低细胞的侵袭能力,其机制可能与NDRG1抑制AKT/Snail信号有关.
- 刘浩宋莹贺智敏
- 新型智能咽拭子机器人在新型冠状病毒疫情中的应用介绍
- 2020年
- 根据《新型冠状病毒肺炎诊疗方案(试行第七版)》发布,经呼吸道飞沫和密切接触传播是新型冠状病毒感染的主要传播途径[1]。在新型冠状病毒的医疗诊疗操作过程中,医务人员与患者近距离接触,可通过上述途径感染。根据中国疾病预防控制中心2月17日在《中华流行病学杂志》发表的《新型冠状病毒肺炎流行病学特征分析》报告中指出,截至2月11日的全国报告数据显示,在为新冠肺炎患者提供诊治服务的422家医疗机构中,共有3019名医务人员感染了新型冠状病毒,确诊病例1716名,5人牺牲[2]。
- 李少强郭文亮刘浩周圆圆李时悦
- 关键词：智能机器人
- Salinomycin对乳腺癌阿霉素耐药细胞株MCF-7/DOX的增殖抑制作用及机制
- 2015年
- 目的本研究旨在探讨Salinomycin对乳腺癌阿霉素耐药细胞株MCF-7/DOX增殖和凋亡的影响及可能作用机制。方法 MTS实验检测Salinomycin对MCF-7/DOX细胞增殖的影响;Annexin V-FITC/PI染色检测Salinomycin对MCF-7/DOX耐药细胞凋亡的影响;DCFH-DA染色检测Salinomycin对MCF-7/DOX耐药细胞活性氧(reactive oxygen species,ROS)产生的影响;JC-1法测定细胞线粒体膜电位;Western blot法检测细胞凋亡相关蛋白BAX、BCL-2、caspase-3和caspase-9的表达变化。结果 Salinomycin能明显抑制MCF-7/DOX耐药细胞增殖,且具有浓度依赖性;流式分析发现Salinomycin能够诱导MCF-7/DOX细胞凋亡,增加细胞内ROS水平,降低细胞线粒体膜电位;与对照组相比较,Salinomycin处理明显抑制BCL-2的表达,上调BAX、cleaved caspase-3和cleaved caspase-9的蛋白表达;抗氧化剂N-acetylcysteine(NAC)则逆转上述作用。结论 Salinomycin能够诱导MCF-7/DOX细胞凋亡,其机制可能与Salinomycin诱导ROS的产生,激活线粒体凋亡途径有关。
- 刘浩卢敏莹贺智敏
- 关键词：乳腺癌SALINOMYCIN阿霉素耐药
- 组蛋白去乙酰化酶抑制剂SNDX-275对乳腺癌BT474细胞增殖抑制作用被引量：4
- 2015年
- 目的明确组蛋白去乙酰化酶抑制剂SNDX-275对ErbB2阳性乳腺癌BT474细胞的增殖抑制作用及其机制。方法以磷酸盐缓冲液（PBS）处理的BT474细胞作为对照组、SNDX-275处理的BT474细胞作为实验组，使用终浓度为0、0.5、1.0、2.0、3.0、4.0 μmol/L的SNDX-275处理细胞，利用MTS实验、克隆形成实验检测细胞增殖能力。采用Western blotting实验检测ErbB2、ErbB3、p-Akt的蛋白表达，实时荧光定量PCR检测miR-125a、miR-125b的表达。MTS实验检测SNDX-275对转染miR-125抑制剂的乳腺癌BT474细胞的增殖抑制作用。结果MTS实验检测结果发现SNDX-275能明显抑制细胞的增殖且具有浓度依赖性，4.0 μmol/L的SNDX-275对细胞的抑制率约（68.00±4.45）%。平板克隆实验结果表明，SNDX-275能明显抑制乳腺癌BT474细胞克隆的形成。Western blotting结果显示SNDX-275明显抑制ErbB2、ErbB3、p-AkT的表达。实时荧光定量PCR分析发现，与PBS处理的BT474细胞对比，2 μmol/LSNDX-275 BT474细胞分别上调miR-125a、miR-125b约3.22±1.17倍、5.42±0.38倍，差异均具有统计学意义（t=4.338,P=0.049；t=21.805,P=0.002）。MTS实验结果显示，与PBS对照组相比，SNDX-275组和转染miR-125抑制剂组对乳腺癌细胞BT474的抑制率分别为（56.97±3.56）%、（10.67±2.21）%，两组之间差异具有统计学意义（t=-10.993，P=0.008）。结论SNDX-275通过上调miR-125a、miR-125b抑制ErbB2-ErbB3-Akt信号通路，进而抑制ErbB2阳性乳腺癌BT474细胞的增殖。
- 尹江刘浩邓敏贺智敏
- 关键词：乳腺肿瘤细胞增殖微RNAS
- 舒更葡糖钠与新斯的明拮抗胰肾联合移植术后残余肌松效果的比较被引量：8
- 2022年
- 目的比较舒更葡糖钠与新斯的明拮抗胰肾联合移植术后残余肌松的效果。方法收集2017年1月至2021年5月我院胰肾联合移植术患者152例,根据肌松拮抗剂使用情况分为:舒更葡糖钠组(S组)82例和新斯的明组(N组)70例。比较两组患者肌松拮抗剂效能、术前及术后1、3、7、14 d的血清肌酐清除率、血淀粉酶值及空腹血糖值、两组术后并发症情况,组间比较计量资料采用两样本t检验或非参数检验,计数资料采用χ^(2)检验。结果与N组比较,S组肌松拮抗剂起效[3(2,7)min vs.15(10,32)min]、自主呼吸恢复[4(3,7)min vs.25(13,45)min]、气管拔管[17(10,25)min vs.47(30,86)min]和PACU停留时间[30(15,46)min vs.61(21,95)min]明显缩短(P<0.05),术后低氧血症[2(2.4%)vs.9(12.9%)]及肺部感染发生率[4(4.9%)vs.12(17.1%)]明显降低(P<0.05);两组各时点肌酐清除率、血淀粉酶、空腹血糖比较差异无统计学意义(P>0.05);两组其余并发症发生率比较差异无统计学意义(P>0.05)。结论与新斯的明相比,舒更葡糖钠有利于加快胰肾联合移植患者术后肌松恢复,降低术后早期肺部并发症发生率。
- 周洪彬黄焕森许阳英刘浩吴钿生
- 关键词：胰肾联合移植呼吸功能恢复肺部并发症
