柯丽华
- 作品数：27 被引量：169H指数：9
- 供职机构：中国科学院武汉病毒研究所更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金中国科学院知识创新工程更多>>
- 相关领域：农业科学生物学医药卫生更多>>
- α—^(32)P HBV DNA探针的制备及其在血清检测中的应用被引量：2
- 1989年
- 采用缺口转移(Nick-translation)方法标记克隆化的乙型肝炎病毒(HBV)DNA制备探针,能特异地与HBV DNA杂交,在本实验条件下,其最低检测量为0.2pg,同位素参入率为23.5—67.0％,使用100μCi ^(32)P dCTP,比放射活性为10~8cpm//μg DNA左右。临床血清检测统计分析表明:HBV DNA与HBsAg、HBeAg、HBcAg、DNAP的阳性符合率分别为53.3％、69.7％、78.6％、81.7％,其灵敏性和特异性均比免疫学检测法高。
- 丁清泉陈少俊柯丽华
- 关键词：乙肝病毒DNA探针血清检测
- 三株草鱼出血病病毒免疫原性的比较被引量：3
- 1991年
- 从湖南邵阳、湖北仙桃、武汉南湖地区分离到的三株草鱼出血病病毒(GCHV873、GCHV875、GCHV876),分别对家兔进行免疫,并测定了它们在家兔体内形成抗体的水平以及这些抗体对相应抗原的中和能力。实验结果显示:GCHV873产生抗体滴度比GCHV875高一倍,较GCHV876高8倍;其抗体的中和效价分别是1:1778(10^(-3.25))、1:386(10^-(2.59))和1:181(10^-(2.25))。上述结果表明:GCHV873的免疫原性是三个分离株中最强的一个毒株。
- 柯丽华余兰芬方勤丁清泉蔡宜权
- 关键词：免疫原性
- 草鱼出血病病毒的血清学鉴定被引量：2
- 1991年
- 草鱼出血病病毒(GcHV)具有弱的凝集人“O”型红血球的能力。其抗体与呼肠孤病毒、轮状病毒不发生免疫反应,说明此病毒与上述病毒无共同的抗原关系。
- 柯丽华方勤余兰芬丁清泉蔡宜权
- 关键词：草鱼出血病病毒免疫反应血凝试验
- 草鱼出血病病毒多肽及其基因组的体外翻译被引量：11
- 1992年
- 纯化的草鱼出血病病毒经SDS-PAGE分析,有11条多肽,即Vp1～Vp11,分子量为27×10~8～130×10~3。完整病毒颗粒与缺失核酸的病毒空壳均由相同的多肽组成。其中Vp1、Vp2、Vp7、Vp10和Vp11是主要的5个多肽,Vp1、Vp2、Vp3、Vp4、Vp5和Vp10属病毒核心成分。用90％DMSO变性的病毒基因组在兔网织红细胞裂解物翻译系统中进行体外翻译,其翻译产物经SDS-PAGE和放射自显影检查,在X感光片上有11条与病毒多肽一致的片段。此结果为呼肠孤病毒核酸具有mRNA性质增加了又一个证据。人工释放的病毒核酸,其双链RNA的一端与核心相连,构成类似反应核心的形态。核心上的12个钉状物可能是病毒基因组溢出的通道。
- 柯丽华王炜方勤蔡宜权
- 关键词：草鱼出血病病毒多肽
- “三明治”杂交法对斜纹夜蛾核型多角体病毒DNA克隆株的鉴定被引量：1
- 1992年
- 用限制性内切酶HindⅢ将斜纹夜蛾核型多角体病毒DNA切割为A、B、C、D_1、D_2、E、F七个片段,与载体pUC18体外连接后转化大肠杆菌TG_1。通过“三明治“杂交法鉴定,分别获得七个片段的克隆株。但A片段克隆株中外源DNA片段发生了缺失。
- 吴云涛柯丽华蔡宜权
- 关键词：斜纹夜蛾核多角体病毒
- 酶标HBV DNA探针的研制与应用被引量：5
- 1991年
- 本实验采用一种非放射性物质——碱性磷酸酶标记乙肝病毒HBV DNA制备分子探针。碱性磷酸酶在苯醌作用下与单链DNA联结,形成DNA和酶的共价复合物,即酶标探针。此探针通过分子杂交与待测DNA结合,与酶的底物作用显色,几小时内可观察结果,其最低检测量约为10pg。用此探针检测乙肝病人血清中的HBV DNA,与^(32)P标记的探针比较,酶标探针可检测出^(32)P标记探针检出率的95.7％。结果表明,所合成的酶标探针具有准确、简便、快速、安全而经济的优点,具有应用前景。
- 涂知明柯丽华
- 关键词：乙型肝炎病毒HBVDNA
- 草鱼出血病病毒抗原亚单位的研制被引量：2
- 1997年
- 通过比较溶液的离子浓度对病毒形态结构的影响，发现GCHV在低盐溶液低温（-20℃）保存条件下，外壳蛋白会自动降解，但不十分完全。采用含1％NP40（Nonidetp40）的稀盐溶液处理感染病毒的细胞，经冻融及差异离心，电镜下观察到纯度较高的病毒双层衣壳、核心衣壳及散在的子粒。纯化的病毒亚单位用核酸酶消化后，与等量的福氏佐剂混合，免疫家兔制备抗体。该抗血清经中和试验测定，显示了较强的中和病毒的能力。纯化的病毒亚单位在7％聚丙烯酰胺凝胶电泳条件下，未见病毒电泳条带。同时采用地高辛标记的GCHVcDNA克隆探针，与病毒RNA及亚单位样品进行斑点杂交，检测病毒RNA灵敏度达到10pg．病毒亚单位样品均为阴性结果。该亚单位制剂具有纯度高、体积小的特点，将是一种安全性能好、使用方法简便、又便于保存和运输的亚单位疫苗。
- 方勤江红柯丽华
- 关键词：草鱼出血病病毒病毒疫苗
- 一株锯缘青蟹呼肠孤病毒的分离纯化及鉴定被引量：7
- 2007年
- 在研究锯缘青蟹病害的过程中,从广东某养殖场分离到一株呼肠孤病毒(命名为SsRV)。病毒粒子为球状,直径约45 nm。病毒粒子基因组为12个节段的双链RNA;在1%琼脂糖电泳中SsRV基因组呈1/5/6带型,其分子量分别为3.8,2.5,2.4,2.0,1.9,1.8,1.3,1.2,1.1,1.1,1.0,1.0 kbp。根据病毒的宿主范围、基因组节段数及电泳型,此病毒很可能与地中海滨蟹呼肠孤病毒P和W 2共同构成呼肠孤病毒科一个新的属。
- 张叔勇郑大胜白志强牛桂兰汤显春柯丽华
- 关键词：锯缘青蟹呼肠孤病毒
- PCR检测HPV－18DNA被引量：1
- 1994年
- 采用聚合酶链式反应（ＰＣＲ）技术，对ＨＰＶ－１８序列中引物ＨＰ＿１、ＨＰ＿２之间的片段（Ｆ）进行扩增，通过两组阴、阳性对照实验证明扩增片段的特异性。用不同Ｍｇ浓度的缓冲系统进行ＰＣＲ反应发现，缓冲系统中Ｍｇ浓度高低是影响ＨＰＶ－１８／ＨＰ＿１、ＨＰ＿２特异扩增的重要因素，高浓度Ｍｇ导致扩增特异性降低。对１７例宫颈癌组织ＤＮＡ进行ＰＣＲ检测，有９例检出Ｆ片段，其检出率是５３％，为ＨＰＶ－１８与宫颈癌的相关性提供证据。
- 江红柯丽华
- 关键词：人乳头瘤病毒宫颈癌聚合酶链反应
- 草鱼出血病病毒的生长特性及高滴价培养被引量：33
- 1989年
- 草鱼出血病病毒感染鱼肾(Clk)单层细胞后,产生明显的细胞病变,其繁殖周期为2—3天。病毒增殖的上升期在感染后的12—48小时。28℃下,当感染复数(Multiplicityof Infection简称MOI)为0.05PFU/cell时,病毒滴价可达1.78×10^(11)PFU/ml,不同温度(25℃、28℃、30℃)下通气培养,测定病毒滴价略有差异。感染病毒的细胞培养液经ELISA检测和电子显微镜观察均为阳性结果,并且能感染健康草鱼。
- 方勤柯丽华蔡宜权
- 关键词：草鱼出血病病毒
