王金惠
- 作品数：17 被引量：39H指数：3
- 供职机构：军事医学科学院放射与辐射医学研究所更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金更多>>
- 相关领域：医药卫生生物学更多>>
- 神经营养因子的系列研究
- 范明邵宁生王嘉玺柳川刘淑红吴燕王金惠王会信汪家政赵强房涛葛学铭
- 在国内首先分离纯化了高纯度、高比活的神经生长因子（NGF）；建立了多种神经营养因子活性测定技术；有关技术已用于国家相关新药审批的常规检测项目。在国际上首先证明了2.5S和7S NGF的生物活性不同。在国内首先克隆了人脑源...
- 关键词：
- 关键词：神经营养因子基因表达
- 人体肝癌细胞急性低氧及低氧习服差异表达基因分析被引量：12
- 2003年
- 本文分析了人体肝癌细胞 (HepG2 )急性低氧处理以及低氧习服处理后基因表达谱的改变。急性低氧处理为细胞在 1%氧气中培养 48h ,低氧习服处理为细胞在 1%氧气中培养 2 4h ,常氧培养 2 4h ,以此作为一个周期 ,重复 6个周期。联合应用抑制消减杂交技术和cDNA芯片技术 ,筛选HepG2细胞经急性低氧处理与正常培养细胞相比差异表达的基因 ,以及经低氧习服处理细胞与正常培养细胞相比差异表达的基因。结果显示 ,HepG2细胞经急性低氧处理与在常氧条件下培养相比 ,差异表达的基因有 3 7个 ,表达水平全部表现为下调 ,其中包括参与细胞周期、细胞应激、细胞信号转导、细胞骨架形成、转录相关蛋白及细胞代谢相关蛋白的基因 ,1个未知基因序列、4个EST序列、5个线粒体蛋白基因 ,另外有功能不明的蛋白质基因 12个。低氧习服处理的细胞与常氧条件下培养的细胞相比 ,差异表达的基因有 6个 ,其中包括两个线粒体蛋白基因、金属蛋白酶 1基因、转铁蛋白基因、Thymosin .beta 4和TPT1基因。其中线粒体蛋白ND4、转铁蛋白、Thymosin .beta 4和TPT1基因的表达呈上调 ,线粒体ND1及金属蛋白酶1基因的表达水平呈下调。经低氧习服处理后 ,细胞低氧耐受力提高 。
- 王金惠善亚君从玉文吴岚军苑晓玲赵振虎王升启陈家佩
- 关键词：细胞低氧抑制消减杂交CDNA微阵列
- 胶原性神经营养因子
- 1999年
- 胶原性神经营养因子(GDNF)是一种新近发现的细胞因子,归属于TGF-β家族。由于其对多巴胺能神经元相对专一的营养作用而备受关注,有广泛的应用前景。本文就其基因定位、蛋白质结构、组织分布、生物学活性以及受体作一简要综述。
- 王金惠
- 关键词：GDNF基因表达基因调控
- 辐射后NFS-60细胞G-CSF受体特性的研究
- 2002年
- 为深化造血细胞辐射损伤分子机制的认识 ,应用受体放射分析法观察不同剂量照射的NFS - 6 0细胞照射后不同时间粒细胞集落刺激因子 (G -CSF)受体特性的变化。结果表明 ,NFS - 6 0细胞照射后 30minG -CSF受体的Kd值和Bmax值随着照射剂量的增大而增加 ,其中Kd值增加更为显著 ;照射后 2 4h ,1Gy照射细胞的Kd值及Bmax值已有恢复 ,3、5Gy照射细胞的Kd值未见下降 ,其Bmax值反而较照射后 30min增加更为显著。提示照射后G -CSF受体Kd值的增加可能是造血细胞辐射损伤的原因之一。
- 从玉文陈家佩邵源王金惠苑晓玲赵振虎柳晓兰
- 关键词：受体造血细胞粒细胞集落刺激因子
- 白细胞介素-13嵌合假单胞菌外毒素对胰腺癌细胞的靶向毒杀作用被引量：2
- 2003年
- 目的 探讨白细胞介素 (IL) 13嵌合假单胞菌外毒素 (PE)对多种胰腺癌细胞系的靶向治疗作用。方法 用噻唑蓝 (MTT)法分析IL 13嵌合假单胞菌外毒素 (IL 13 PE38QQR)对胰腺癌细胞ASPC 1、CAPAN 1、COLO 35 7、MIAPaCa 2、PANC 1、T3M 4的靶向毒杀作用 ,并分析IL 13对胰腺癌细胞系的增殖作用和与IL 13 PE38QQR的竞争结合作用。结果 IL 13对ASPC 1、CA PAN 1、COLO 35 7有明显促增殖作用 ;对PANC 1作用次之 ;对MIAPaCa 2、T3M 4不明显 ;IL 13 PE38QQR对 6个胰腺癌细胞都有明显抑制作用 ;IL 13与IL 13 PE38QQR有竞争抑制作用。结论IL 13 PE38QQR嵌合蛋白对胰腺癌有靶向治疗作用。
- 张文智石文杰王金惠彭善云王嘉玺
- 关键词：胰腺癌白细胞介素-13PE噻唑蓝MTT
- 宫血宁对小鼠骨髓细胞因子表达的影响被引量：15
- 2006年
- 目的:探索宫血宁口服给药对小鼠骨髓造血细胞细胞因子表达的影响。方法:基因芯片法分析小鼠骨髓中细胞因子及其受体的表达。结果:通过比较给药组与对照组小鼠骨髓cDNA与80条基因片段的杂交信号强弱,发现有17条基因在给药组的小鼠骨髓细胞中表达升高,这17条表达差异的基因涉及到造血、炎症、免疫与应激四个方面。结论:重楼皂甙在体内不仅具有激活成熟造血细胞的作用(如诱导血小板聚集),还能增加骨髓细胞造血因子的表达,促进外周血白细胞和血小板的生成;参与局部炎症组织的修复;增强小鼠的体液免疫和细胞免疫作用。
- 李素燕善亚君赵振虎佟丽王金惠陈国志陈家佩王升启毛秉智从玉文
- 关键词：基因芯片造血因子宫血宁
- 白介素-15突变体在大肠杆菌中的克隆表达及鉴定
- 2000年
- 目的 :构建两株IL 15末端缺失突变体以研究其N、C端对其功能的影响。方法 :以pBV2 2 0为载体 ,在大肠杆菌中进行表达。表达产物以包涵体形式存在 ,经过SDS PAGE纯化 ,复性 ,以CTLL 2增殖实验检测野生型及突变体的生物活性。结果 :N端缺失突变体失去了增殖活性 ,而C端缺失突变体保持了对CTLL
- 苏琴王嘉玺冯健男王金惠宋晓国张明伟
- 关键词：白细胞介素15缺失突变体
- 蚓激酶及其在血栓性疾病治疗中的应用
- 本发明提供了一种利用同源结构域克隆到的，能编码一种蚓激酶的全长cDNA序列、其所编码的氨基酸序列和可能的功能。其氨基酸序列全长为852bp，能编码283个氨基酸组成蛋白的开放阅读框架，理论推算此蛋白分子量为31KD，由原...
- 从玉文董国清王金惠苑晓玲善亚军陈家佩
- 文献传递
- 新型人白细胞介素-13在大肠杆菌中的表达及生物活性分析被引量：3
- 2003年
- 目的 :在大肠杆菌中表达人白细胞介素 13的新型拼接体蛋白。方法 :用植物凝集素 (PHA)和刀豆凝集素 (ConA)共刺激人Jurkat细胞 ,通过半巢式RT PCR扩增在 98位缺失Gln、不含信号肽的人IL 13新拼接体基因 ,并克隆入 pBV2 2 0 ,构建 pBVIL 13表达载体 ,经温度诱导后在大肠杆菌DH5α中表达新型人IL 13蛋白。表达产物经S 2 0 0纯化、复性后 ,用TF 1细胞进行MTT比色测定其活性。结果 :成功地分离了人IL 13新拼接体基因 ,并在大肠杆菌中表达。分离纯化的新型IL 13蛋白 ,其比活性为 1.6× 10 6U/mg。结论 :获得具有生物学活性的新型人IL 13细胞因子 。
- 王大东李基业王金惠徐东刚焦华波李涛邓群王嘉玺黎沾良
- 关键词：克隆原核表达
- 胶质细胞源性神经营养因子基因的克隆及其在大肠杆菌中的高效表达
- 1999年
- 目的：分离胶质细胞源性神经营养因子（ｇｌｉａｌ ｃｅｌｌ ｌｉｎｅ－ｄｅｒｉｖｅｄ ｎｅｕｒｏｔｒｏｐｈｉｃ ｆａｃｔｏｒ，ＧＤＮＦ）基因，并在Ｅ．ｃｏｌｉ中获得表达。方法：从人多形性成胶质细胞瘤细胞株ＢＴ３２５ 中提取总ＲＮＡ ，利用ＲＴ－ＰＣＲ技术分离ＧＤＮＦ基因，构建表达载体ｐＢＶ－ＧＤＮＦ，转化大肠杆菌，温控诱导ＧＤＮＦ的表达。结果与结论：分离得到的人ＧＤＮＦ基因，在大肠杆菌中得到高效表达，表达产物占全菌总蛋白的２４．７％ ，初步纯化后纯度达９０％ 以上。
- 王金惠王嘉玺彭善云段聚宝邹民吉
- 关键词：基因表达GDNF克隆大肠杆菌
