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家蚕茧壳干粉对小鼠的急性毒性和致突变试验被引量：1: 2014年; 为评价家蚕茧壳药食开发利用的安全性,以小鼠为实验动物进行急性毒性和致突变试验。将家蚕茧壳粉碎成细粉掺入饲料后,以12.0 g/(kg·d)的家蚕茧壳干粉添食剂量连续2周饲喂小鼠,观察测定家蚕茧壳干粉对雌、雄小鼠的LD50均>12.0 g/kg,属实际无毒级物质。致突变试验分别以12.0、3.0、1.5 g/(kg·d)3组家蚕茧壳干粉添食剂量连续4 d(小鼠骨髓细胞染色体畸变试验)或5 d(小鼠精子畸变试验)给小鼠喂食,调查检测3个剂量组小鼠骨髓细胞染色体的突变率,雌性均为0.17%,雄性均为0,与阴性对照组相比均不存在显著性差异(P>0.05),检验结果为阴性;小鼠精子突变率与阴性对照组之间也不存在显著性差异(P>0.05)。试验结果表明,家蚕茧壳干粉属于实际无毒级物质,可作为口服用品的原料开发利用。; 王智宁文艳吕群吴帆唐溱王春梅; 关键词：急性毒性精子畸变小鼠

家蚕茧壳水解粉的急性毒性和遗传毒性被引量：1: 2015年; 目的:研究家蚕茧壳水解粉的急性毒性和遗传毒性。方法:应用小鼠急性毒性实验、体外哺乳类细胞(V79/HGPRT)基因突变实验、小鼠骨髓细胞染色体畸变实验及小鼠精子畸变实验对家蚕茧壳水解粉毒性进行研究。结果:该家蚕茧壳水解粉对雌雄小鼠半数致死量(median lethal dose,LD50)均大于11.50 g/kg,属实际无毒物质;基因突变实验中各受试物剂量组的突变率均没有达到自发突变率的3倍,亦无剂量-反应关系,结果为阴性;染色体畸变实验中家蚕茧壳水解粉各剂量组与阴性对照组无显著差异(P>0.05);精子畸变实验中,样品低、中剂量组与阴性对照组无显著差异(P>0.05),而高剂量组畸变率显著低于阴性对照组(P<0.05),证明实验结果均为阴性。结论:本次实验条件下,该家蚕茧壳水解粉属实际无毒级,未显示有急性毒性和遗传毒性作用。; 吕群宁文艳王智王玉霞顾响响武鹏凯林峰王春梅; 关键词：小鼠急性毒性遗传毒性

迟缓爱德华氏菌Eta1-L-Gapdh融合蛋白在蓝藻中的表达被引量：1: 2016年; 在蓝藻中表达迟缓爱德华氏菌Eta1-L-Gapdh融合蛋白。提取迟缓爱德华氏菌基因组DNA为模板,用PCR技术分别扩增两个已知具有较强免疫原性的基因eta1和gapdh,再采用重叠延伸PCR将这两个基因融合,获得目的融合基因eta1-L-gapdh。将目的基因连接到表达载体pRL489的两个Bam H I酶切位点之间构建表达载体,用质粒提取、PCR、酶切、测序等手段对表达载体进行验证。验证正确的表达载体通过三亲接合转化野生鱼腥藻PCC7120,用新霉素抗性筛选出转基因藻落,通过质粒提取和PCR验证转基因藻。用RT-PCR和Western-blot分别从转录水平和翻译水平对转基因藻中融合基因的表达进行了检测。结果表明,含目的基因的表达载体构建成功,目的基因在蓝藻中转录并表达蛋白,该蛋白在蓝藻中的表达量为2.46%。; 王智张泽峰王晶晶王春梅; 关键词：迟缓爱德华氏菌 GAPDH 鱼腥藻PCC7120 融合蛋白

迟缓爱德华氏菌ETA1-L-GAPDH融合蛋白在大肠杆菌中的表达: 2016年; 迟缓爱德华氏菌是水产养殖中危害性极大的一种致病菌,该菌的两种外膜蛋白GAPDH和ETA1被证明可以独立产生免疫原性,具有开发成疫苗的潜力。文章将这两个蛋白融合表达以期增强疫苗的保护作用。采用PCR方法扩增出融合有gapdh基因和eta1基因的融合基因rh,将该目的基因与表达载体p ET-30a(+)连接,转入大肠杆菌BL21(DE3)菌株中表达融合蛋白,采用SDS-PAGE检测融合蛋白的表达,并用镍柱和葡聚糖凝胶Sephadex G-100对融合蛋白进行了纯化,最后通过Western-blot对纯化的融合蛋白进行了验证。结果表明融合蛋白主要以包涵体形式表达,在破碎后的菌体沉淀中该蛋白含量高达73.6%,经过纯化后的融合蛋白纯度高达90%,并通过Western-blot得到了验证。上述结果表明表达载体构建成功,目的蛋白在大肠杆菌中大量表达。; 王智王晶晶张泽峰王春梅; 关键词：迟缓爱德华氏菌融合蛋白鱼用疫苗 GAPDH 外膜蛋白

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王智