李志超
- 作品数：6 被引量：14H指数：2
- 供职机构：新乡医学院更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金更多>>
- 相关领域：医药卫生生物学更多>>
- 分枝状聚乙烯亚胺对不同细胞系的转染效率和细胞毒性作用被引量：1
- 2015年
- 目的探讨分支状聚乙烯亚胺(PEI)作为载体对不同细胞株的转染效率和细胞毒性。方法培养人类胚胎肾细胞293T、人上皮癌细胞Hela、小鼠骨髓间充质干细胞(BMSC)和大鼠肾上腺嗜铬细胞瘤细胞PC12。悬浮转染p EGFP质粒与PEI的复合物,利用荧光细胞计数法分析转染效率;悬浮转染p Luc(luciferase基因来自Renilla)质粒与PEI的复合物,利用分光光度计分析各细胞的荧光素酶活性;采用3-(4,5-二甲基噻唑-2)-2,5-二苯基四氮唑溴盐(MTT)比色法分析PEI对293T、Hela、BMSC和PC12细胞的毒性,分析转染效率和细胞毒性之间的相关性。结果293T、Hela、BMSC和PC12细胞的转染效率分别为(92.1±4.5)%、(29.2±3.4)%、(21.5±2.1)%和(17.0±3.2)%。293T、Hela、BMSC和PC12细胞的荧光素酶活性分别是2.87×108、3.35×107、1.94×107和1.08×107RLU·mg protein-1。293T、Hela、BMSC和PC12细胞转染效率排序:293T>Hela>BMSC>PC12细胞。同时,MTT比色法结果表明细胞毒性排序:293T>Hela>BMSC>PC12细胞。转染效率与细胞毒性呈正相关(r=0.865,P<0.05)。结论 PEI对不同细胞株的转染效率和细胞毒性存在一定的正相关性。
- 冯培杨海杰王磊李志超马双平王勉丰慧根
- 关键词：聚乙烯亚胺基因转染细胞毒性
- 细胞周期蛋白依赖性激酶PFTK1在少突胶质前体细胞分化中的潜在作用被引量：2
- 2015年
- 背景:少突胶质细胞主要来自少突胶质前体细胞,该分化过程被多种因子严格调控。一些细胞周期蛋白依赖性激酶可以调控少突胶质前体细胞分化的早期阶段,对少突胶质细胞形成具有重要意义。目的:分析细胞周期蛋白依赖性激酶PFTK1在少突胶质前体细胞分化中的潜在作用及相应机制。方法:利用siRNA技术和Western印迹实验来检测OLN-93细胞分化的相关分子标志物及相应信号通路的活化情况。结果与结论:撤去血清后,少突胶质前体细胞系OLN-93细胞可进行自发分化。形态观察表明,用siRNA技术沉默PFTK1基因表达后,OLN-93细胞的分化得以明显加快。Western印迹实验显示PFTK1基因沉默后,OLN-93分化的相关分子标志物环核苷酸磷酸二酯酶和髓鞘少突胶质细胞糖蛋白的诱导出现显著增加。对PFTK1相关信号通路的研究则发现,PFRK1基因的沉默表达可诱发PI3K/AKT信号通路的活化。而对PI3K/AKT信号通路的特异性抑制可抵消PFTK1沉默对OLN-93细胞分化的促进效果。实验结果首次发现细胞周期蛋白依赖性激酶PFTK1可通过PI3K/AKT信号通路抑制少突胶质前体细胞的分化,为脱髓鞘引起的神经退化性疾病的治疗提供了重要的理论参考。
- 杨海杰崔阳阳王磊马双平李志超丰慧根
- 关键词：少突胶质细胞少突胶质前体细胞分化基因沉默
- IL-6通过MAPK/ERK信号通路调节BMSCs软骨定向分化被引量：7
- 2015年
- 白细胞介素-6(IL-6)是参与骨髓间充质干细胞(BMSCs)软骨定向分化的重要调节因子.MAPK/ERK信号通路可介导骨关节炎软骨损伤.然而,IL-6调节BMSCs定向分化为软骨细胞的分子机制尚不清楚.IL-6通过激活MAPK/ERK信号途径,抑制BMSCs的成软骨分化.本文发现,BMSCs在体外向软骨细胞分化时,Il-6基因表达水平显著下调,同时分泌到培养基中的IL-6蛋白水平亦明显降低.重组IL-6可抑制BMSCs向软骨细胞分化,软骨分化标志蛋白Runx2和Sox9的诱导表达亦相应下调.IL-6可诱导MAPK/ERK信号通路活化,加入ERK特异性阻断剂后,Runx2和Sox9的诱导表达恢复正常.结果提示,IL-6通过激活MAPK/ERK信号通路抑制BMSCs的软骨细胞分化.炎症因子IL-6对软骨细胞的再生具有不利的影响,该研究为软骨组织工程研究和骨关节炎等软骨疾病的治疗提供有价值的参考.
- 杨海杰李志超王勉王磊程彬峰冯培冯志伟
- 关键词：IL-6软骨细胞分化MAPK信号通路
- TGF-β1通过激活Smad信号途径抑制PI3K/AKT信号介导的BMSC成脂分化被引量：4
- 2015年
- 转化生长因子β1(TGF-β1)是参与骨髓间充质干细胞(BMSCs)脂肪定向分化的重要调节因子,其具体的调节机制尚不清楚.本研究证明,BMSCs在体外分化为脂肪细胞的过程中,TGF-β1的基因表达显著下调,重组TGF-β1能够抑制BMSCs体外脂肪细胞定向分化,其分化的标志蛋白C/EBPβ和αP2的表达水平显著降低.TGF-β1在激活Smad信号通路的同时,还抑制胰岛素(脂肪分化的主要诱导剂)对PI3K/Akt信号通路的激活.加入Smad特异性阻断剂后,C/EBP-β和α-P2的诱导表达恢复正常,同时PI3K/Akt信号通路的活化亦得以恢复.结果提示,TGF-β1可通过Smad信号通路干扰脂肪细胞分化的核心信号通路-PI3K/Akt的活化,从而实现对BMSCs脂肪分化的抑制.该研究结果为肥胖等导致的心血管疾病或Ⅱ型糖尿病等的临床治疗提供有价值的参考.
- 李志超杨海杰剧飞冯培马双平连俊江冯志伟
- 关键词：脂肪细胞分化SMAD信号通路
- IL-6和TGF-β1对小鼠骨髓间充质干细胞体处分化的影响
- 骨髓间充质干细胞(BMSCs)属于干细胞家族重要成员,来源于胎儿或成人的骨髓、脂肪以及其他组织中的一类多能干细胞,具有自我更新能力和多向分化潜能.BMSCs能在特定条件下诱导分化为多种细胞包括成骨细胞、脂肪细胞、软骨细胞...
- 李志超
- 关键词：骨髓间充质干细胞细胞分化白细胞介素-6转化生长因子-Β1
- IL-6和TGF-β1对小鼠骨髓间充质干细胞体外分化的影响
- 背景骨髓间充质干细胞(BMSCs)属于干细胞家族重要成员,来源于胎儿或成人的骨髓、脂肪以及其他组织中的一类多能干细胞,具有自我更新能力和多向分化潜能。BMSCs能在特定条件下诱导分化为多种细胞包括成骨细胞、脂肪细胞、软骨...
- 李志超
- 关键词：间充质干细胞软骨细胞分化脂肪细胞分化IL-6TGF-Β1
- 文献传递
