敬海明
- 作品数：21 被引量：5H指数：2
- 供职机构：第三军医大学更多>>
- 发文基金：国家科技重大专项重庆市自然科学基金国家自然科学基金更多>>
- 相关领域：医药卫生农业科学更多>>
- 一种铜绿假单胞菌重组蛋白Vac33的纯化方法
- 本发明提供了一种铜绿假单胞菌重组蛋白Vac33的纯化方法，所述方法包括：1)收集表达铜绿假单胞菌重组蛋白Vac33的菌体；2)将步骤1)收集的菌体破菌，并离心，收集上清；3)将步骤2)得到的上清通过GST亲和层析进行初纯...
- 敬海明顾江邹全明章金勇孙红武付强牟道华张玉东徐丽敏
- 文献传递
- 铜绿假单胞菌感染肺炎的动物模型的建立方法
- 本发明涉及一种铜绿假单胞菌肺炎模型的建立方法，该方法有以下步骤：1)采用异氟烷深麻小鼠；2)铜绿假单胞菌对小鼠滴鼻，建立铜绿假单胞菌感染的肺炎模型。本发明所述方法能够有效感染小鼠，成功建立铜绿假单胞菌肺炎模型。感染后的小...
- 顾江杨峰章金勇邹全明彭六生赵莉群敬海明王逸麟秦溢
- 文献传递
- 幽门螺杆菌分泌与重组表达的VacA蛋白的分离纯化及其致细胞空泡效应与凋亡的对比研究被引量：2
- 2014年
- 目的分离纯化幽门螺杆菌分泌和重组表达的细胞空泡毒素抗原(VacA)蛋白,并评价其致细胞空泡效应及致细胞凋亡效应。方法分别从幽门螺杆菌ATCC26695菌株培养上清和重组表达VacA蛋白的pQE30-VacAE.coliM15基因工程菌中分离纯化VacA蛋白,经酸化后,以不同终浓度(5,10 ng/ml)分别与人胃腺癌AGS细胞共孵24 h,观察致空泡效应,并通过流式细胞术检测细胞凋亡。结果成功分离纯化出幽门螺杆菌分泌和重组表达的VacA蛋白;幽门螺杆菌分泌的VacA蛋白能显著引起AGS细胞的空泡样改变及凋亡(P<0.01),而重组表达的VacA蛋白致细胞空泡样改变及凋亡不显著(P>0.05)。结论幽门螺杆菌分泌的VacA蛋白有良好的空泡毒性及致凋亡效应,而重组表达的VacA蛋白无致空泡及凋亡效应,幽门螺杆菌分泌的VacA蛋白可用于VacA作用机制的研究。
- 常辉左钱飞敬海明邹全明兰春慧陈东风
- 关键词：细胞空泡毒素蛋白纯化胃肿瘤
- 一种重组蛋白Vo及其制备方法和应用
- 本发明提供了一种重组蛋白Vo，所述重组蛋白Vo由脑膜炎大肠杆菌K1的外膜蛋白A(OmpA)的膜外片段通过连接肽融合而成；所述重组蛋白Vo具有以下通式：loop1‑(linker a)<Sub>n1</Sub>‑loop2...
- 顾江魏超顾浩赵莉群杨峰高晨敬海明邹全明
- 文献传递
- 鲍曼不动杆菌1A1S_1969重组蛋白及其制备方法和应用
- 本发明涉及一种1A1S_1969的重组蛋白及其制备方法和应用，该重组蛋白包含A1S_1969的第46‑414位氨基酸序列，该重组蛋白的氨基酸序列如SEQ ID NO.5所示。该重组蛋白表达量高，便于分离纯化，高效安全，可...
- 冯强蔡昌芝邹全明曾浩石云敬海明
- 文献传递
- 铜绿假单胞菌疫苗重组蛋白Vac11的纯化方法
- 本发明公开了一种铜绿假单胞菌(PA)重组亚单位基因工程蛋白疫苗Vac11的纯化方法。该蛋白为铜绿假单胞菌抗原分子的活性功能片段重组融合，通过大肠杆菌基因工程菌表达获得。采用对基因工程菌进行高压破菌、GST亲和层析、PP酶...
- 敬海明顾江邹全明章金勇孙红武付强牟道华张玉东徐丽敏
- 文献传递
- 基于CD4+T细胞免疫的幽门螺杆菌优势抗原组合及筛选方法
- 本发明涉及一种基于CD4+T细胞免疫的幽门螺杆菌优势抗原组合及制备方法，该优势抗原组合包括以下三种及其同源蛋白：次黄嘌呤核苷酸脱氢酶、Ⅱ型柠檬酸合酶和尿素酶B亚单位；其氨基酸序列分别如SEQ ID NO.1、SEQ ID...
- 吴超邹全明孙合强袁寒梅赵卓谭燃景李滨郭刚章金勇敬海明秦溢
- 文献传递
- 铜绿假单胞菌全身感染小鼠模型的建立方法
- 本发明涉及一种铜绿假单胞菌全身感染小鼠模型的建立方法，有以下步骤：1)使用红外线灯照射小鼠3分钟，小鼠尾部两侧静脉血管明显充盈扩张；2)小鼠尾静脉注射铜绿假单胞菌。本发明所述方法能够有效感染小鼠，成功建立铜绿假单胞菌全身...
- 章金勇顾江杨峰邹全明彭六生赵莉群敬海明王逸麟秦溢
- 文献传递
- 鲍曼不动杆菌外膜蛋白A1S1969的克隆表达及免疫保护机制初步研究被引量：3
- 2016年
- 目的制备鲍曼不动杆菌(Ab)A1S_1969重组蛋白,利用小鼠全身脓毒血症感染致死模型评价A1S_1969重组蛋白的免疫保护效果,探讨可能的免疫保护机制,为筛选Ab疫苗有效的保护性抗原奠定基础。方法基于反向疫苗学技术筛选出Ab外膜蛋白A1S_1969,利用p GEX-6P-2质粒构建GST融合表达载体,重组表达的A1S_1969蛋白经亲和层析高效纯化后与铝佐剂吸附制备而成重组A1S_1969免疫原;采用Balb/c小鼠全身感染模型评价A1S_1969重组蛋白的免疫保护效果,通过ELISA检测免疫小鼠Ig G抗体滴度和Ig G抗体亚型。制备A1S_1969重组蛋白抗血清进行体外调理吞噬杀菌实验。结果成功克隆、表达并纯化A1S_1969重组蛋白,纯度>90%。动物免疫保护结果显示A1S_1969重组蛋白组小鼠存活率为55.6%,对照组小鼠存活率为20.0%(P<0.05);末次免疫7 d后小鼠体内总Ig G抗体滴度为1∶64 000,以Ig G1亚型为主;体外调理吞噬杀菌实验结果显示A1S_1969特异性血清抗体可以增强中性粒细胞对Ab的杀菌作用,实验组杀菌率可达55%,对照组无杀菌活性。结论 A1S_1969重组蛋白可显著提高全身脓毒血症感染致死模型小鼠的存活率,具有良好的免疫保护效果。
- 蔡昌芝冯强杨赟魏振波纪永军牟道华敬海明邹全明曾浩
- 关键词：鲍曼不动杆菌基因工程疫苗克隆表达免疫保护
- 一种重组蛋白Vo及其制备方法和应用
- 本发明提供了一种重组蛋白Vo，所述重组蛋白Vo由脑膜炎大肠杆菌K1的外膜蛋白A(OmpA)的膜外片段通过连接肽融合而成；所述重组蛋白Vo具有以下通式：loop1-(linker？a)<Sub>n1</Sub>-loop2...
- 顾江魏超顾浩赵莉群杨峰高晨敬海明邹全明
