王爽 作品数:15 被引量:53 H指数:4 供职机构: 重庆医科大学 更多>> 发文基金: 重庆市卫生局科研项目 重庆市自然科学基金 国家自然科学基金 更多>> 相关领域: 医药卫生 生物学 更多>>
大七气汤单用及联合顺铂对SKOV-3细胞移植瘤Survivin与Caspase-3表达的影响 2016年 目的探讨大七气汤加减方(姜黄、三棱、莪术、半枝莲等)单用及联合顺铂对SKOV-3细胞移植瘤Survivin与Caspase-3表达的影响。方法将SKOV-3细胞移植瘤造模成功的40只荷瘤鼠随机分为模型对照组、大七气汤低、高剂量组、顺铂组、顺铂联合大七气汤组,每组8只,给药21 d后处死所有荷瘤鼠,称瘤重,测瘤体积,以逆转录-聚合酶链反应法和蛋白质印迹法检测瘤组织Survivin、Caspase-3 m RNA及蛋白的表达。结果各用药组瘤重和瘤体积均小于模型对照组(P<0.01);逆转录-聚合酶链反应和蛋白质印迹法检测结果显示中药组Survivin m RNA及蛋白表达明显低于模型对照组(P<0.01),且大七气汤低剂量组与DDP顺铂组比较差异有统计学意义(P<0.05),且DDP联合大七气汤组表达最低;用药组Caspase-3 m RNA和蛋白表达明显高于模型对照组(P<0.01),且大七气汤低剂量组与顺铂组比较差异有统计学意义(P<0.05),且顺铂联合大七气汤组表达最高。结论大七气汤加减方能够下调Survivin和上调Caspase-3的表达来达到抑制肿瘤细胞生长和促进肿瘤细胞凋亡,且大七气汤联合顺铂对SKOV-3细胞移植瘤治疗具有增效作用。 杨洋博君 李舒 王爽 陈蓉关键词:顺铂 SURVIVIN 复方大七气汤联合顺铂对裸鼠卵巢癌皮下移植瘤Bcl-2/Bax表达的影响 被引量:14 2015年 目的:探讨复方大七气汤(compound Daqiqi decoction,CDQD)联合顺铂对裸鼠卵巢癌皮下移植瘤细胞凋亡相关因子Bcl-2/Bax的影响,为临床治疗提供理论依据。方法:将成功建立裸鼠卵巢癌皮下移植瘤模型的40只荷瘤鼠随机分为5组(n=8):模型对照组、CDQD低、高剂量组、顺铂组、顺铂联合中药组,给药3周后处死所有荷瘤鼠剥离瘤体,测瘤体积、瘤重并绘制肿瘤生长曲线、计算抑瘤率,以RT-PCR法和Western blot法检测Bcl-2(B细胞白血病/淋巴瘤-2基因)、Bax(与Bcl-2相关的x蛋白)mRNA及蛋白量的表达。结果:①瘤重显示CDQD各剂量组瘤重均有一定程度减轻,与DDP组相比无统计学意义,顺铂联合中药组低于其余各组(P<0.01);肿瘤生长曲线显示与模型组比较,各用药组瘤体积均有不同程度缩小(P<0.01)。②RT-PCR结果显示促凋亡基因Bax mRNA的表达:与模型组比较,各用药组表达增高(P<0.01),其中顺铂联合中药组表达最高,与其余治疗组相比较差异有统计学意义(P<0.01);抑凋亡基因Bcl-2 mRNA在顺铂联合中药组表达最低(P<0.01),CDQD高剂量组与顺铂组比较差异无统计学意义。③Western blot法显示与模型组比较,各用药组表达增高(P<0.01),顺铂联合中药组中Bax蛋白的表达最高(P<0.01),CDQD高剂量组与顺铂组比较差异无统计学意义;Bcl-2蛋白在顺铂联合中药组表达最低(P<0.01);CDQD高剂量组与顺铂组比较差异无统计学意义。结论:CDQD对卵巢癌皮下移植瘤具有促凋亡作用,其机制可能与下调Bcl-2表达,上调Bax表达,促进肿瘤细胞凋亡有关;并且与顺铂联合用药具有增效作用。 杨洋博君 王爽 李舒 陈蓉关键词:卵巢癌 顺铂 BCL-2基因 BAX基因 多囊卵巢综合征中医研究进展 被引量:7 2016年 多囊卵巢综合征已经成为当前困扰女性、威胁女性健康的重要疾病,然而其症状多样、发生机制尚不清楚,治疗该疾病及控制预后已经成为当前需要解决的重要问题。中医药在治疗多囊卵巢综合征中有重要作用。 王爽 陈蓉关键词:多囊卵巢综合征 辨证治疗 复方麦芽丸对来曲唑诱导的多囊卵巢综合征大鼠模型卵巢ERα和ERβ表达的影响 被引量:8 2016年 目的:观察复方麦芽丸对来曲唑诱导的多囊卵巢综合征(polycystic ovarian syndrome,PCOS)大鼠模型雌激素受体α亚型(estrogen receptorα,ERα)和雌激素受体β亚型(estrogen receptorβ,ERβ)的影响,探讨其对PCOS的作用机制。方法:建立PCOS大鼠模型,48只6周龄雌性SD大鼠随机均分为6组(正常组、模型对照组、阳性对照组、复方低剂量组、复方中剂量组、复方高剂量组),21 d造模成功后,灌胃治疗21 d。观察治疗后各组大鼠卵巢组织形态变化,采用免疫组织化学、Western印迹和RT-PCR检测各组大鼠卵巢组织中ERα和ERβ蛋白的表达。结果:模型对照组大鼠卵巢囊状扩张数较正常组增多,颗粒细胞减少;与模型对照组比较,治疗后各组大鼠囊状扩张的卵泡明显减少并缩小,原始卵泡、黄体、颗粒细胞增多。模型对照组ERα和ERβ的表达明显降低(P<0.01),药物干预组ERα和ERβ的表达升高(P<0.05或P<0.01)。结论:复方麦芽丸可通过调控卵巢组织ERα和ERβ蛋白的表达而在PCOS的治疗中发挥作用。 王爽 兰楠 杨洋博君 陈蓉关键词:雌激素受体Β亚型 人脂质运载蛋白2研究进展 被引量:1 2009年 人脂质运载蛋白2(lipocalin 2,Lcn2),属于Lcn家族的新成员。它存在于人体许多正常组织细胞中,可作为运铁蛋白介导转铁途径,并与免疫炎症反应、肿瘤发生发展以及肾脏疾病有关。 王瑜伟 王爽 朱道银关键词:肿瘤 肾疾病 复方麦芽丸对PCOS模型大鼠IL-6、TNF-α表达的影响 被引量:6 2016年 目的:研究复方麦芽丸(Compound Malt Pill,CMP)对多囊卵巢综合征(polycystic ovarian syndrome,PCOS)大鼠白细胞介素(IL-6)、肿瘤坏死因子(TNF-α)表达的影响,探讨复方麦芽丸治疗PCOS的作用机制。方法:运用来曲唑建立多囊卵巢综合征大鼠模型,48只6周龄雌性SD大鼠随机分为6组(n=8):正常对照组、模型对照组、达英-35 1.44g/kg组、复方麦芽丸5.76g/kg组、复方麦芽丸11.52g/kg组、复方麦芽丸23.04g/kg组。第1~21天,正常组给予1%羧甲基纤维素溶液(CMC)灌胃,其余组给予0.125mg/ml来曲唑-羧甲基纤维素溶液诱导PCOS,第22~42天,正常组和模型组给予生理盐水,其余组以相应药物灌胃,观察大鼠动情周期变化,运用免疫组化、Western blot和RT-q PCR检测各组大鼠卵巢组织中IL-6、TNF-α的表达。结果:PCOS大鼠动情周期失去规律性变化,经治疗后有所恢复;模型对照组IL-6、TNF-α的表达水平较正常组明显增高,各治疗组IL-6、TNF-α表达水平较模型组降低,尤以复方麦芽丸高剂量组(23.04g/kg)最为显著。结论:复方麦芽丸对PCOS大鼠有一定治疗作用,其机制可能是通过调节卵巢组织IL-6、TNF-α的表达水平。 兰楠 王爽 邱文平 陈蓉关键词:多囊卵巢综合症 IL-6 TNF-Α 结核分枝杆菌RpfA蛋白的原核表达、鉴定和纯化 被引量:1 2008年 目的:构建结核分枝杆菌(Mycobacterium tuberculosis,MTB)复活促进因子A(Resuscitation-promoting factor,ARpfA)的原核表达质粒,并在大肠杆菌中表达和纯化。方法:采用聚合酶链反应(PCR)方法从结核分枝杆菌H37Rv基因组DNA中扩增出RpfA基因(1 224bp),然后用双内切酶消化后,与同样酶消化的pET32aα(+)载体连接,转入大肠杆菌Top10;阳性克隆用酶切和DNA测序鉴定。测序正确后,将重组质粒转化到的大肠杆菌BL21中,经IPTG诱导,由T7启动子调控表达了RpfA蛋白;利用His-tag in-gel Stain对表达蛋白进行鉴定,最后对目的蛋白进行纯化。结果:双酶切鉴定所切下的片段大小与理论值相符,测序结果与文献报道一致。经SDS-PAGE分析和His-tag in-gel Stain鉴定均发现66ku处有特异性蛋白条带。结论:成功克隆并构建了RpfA基因的重组表达质粒pET32α(+)-RpfA,并获得了高纯度的重组蛋白,为以后的深入研究奠定了基础。 徐蕾 帖儒修 王爽 王瑜伟 李娜 何永林 蒋仁举关键词:结核分枝杆菌 克隆 纯化 结核分枝杆菌阿拉伯糖基转移酶AftA的原核表达及鉴定 被引量:2 2008年 目的构建高效表达菌株,以大量表达结核分枝杆菌AftA蛋白,为后续的抗结核药物的筛选奠定基础。方法采用PCR法从结核分枝杆菌H37Rv基因组DNA中扩增出AftA的基因片段,将其插入原核表达质粒PQE30,构建重组质粒PQE30-aftA。将PQE30-aftA转化大肠杆菌,用IPTG诱导目的基因表达。Western-blotting免疫印迹法鉴定后纯化该表达产物。结果经核苷酸序列测定和酶切鉴定结果表明,成功构建了重组质粒PQE30-aftA。在大肠杆菌M15中用IPTG诱导表达后,获得了AftA蛋白。蛋白经SDS-PAGE分析约为69.5kD。免疫印迹分析证实目的蛋白与阳性结核病患者抗血清产生特异性反应。结论成功制备出重组的AftA蛋白,为新型抗结核药物的筛选奠定了物质基础。 王爽 朱道银 帖儒修 李娜 王渝伟关键词:结核分枝杆菌 原核表达 复方麦芽丸对多囊卵巢综合征模型大鼠AR、INSR表达的影响 被引量:1 2016年 目的:建立来曲唑诱导的多囊卵巢综合征(polycystic ovarian syndrome,PCOS)大鼠模型,探讨复方麦芽丸(Compound Malt Pill)对PCOS大鼠卵巢组织形态及雄激素受体(Androgen Receptor,AR)、胰岛素受体(Insulin Receptor,INSR)表达的影响。方法:6周龄清洁级雌性SD大鼠按8ml/kg每天灌服0.125mg/ml来曲唑-羧甲基纤维素溶液,建立PCOS大鼠模型,成模大鼠随机分为5组:模型组、炔雌醇环丙孕酮1.44 g/kg组、复方麦芽丸5.76g/kg组、11.52 g/kg组、23.04 g/kg组,每组8只,分别给予相应浓度药物干预21d,另设同龄正常组大鼠8只。观察治疗后各组大鼠体重情况、卵巢形态大体变化,免疫组化、Western Blot检测AR、INSR蛋白表达水平。结果:(1)造模成功后,造模大鼠体重增加明显;药物干预治疗后,各治疗组与模型组比较体重变化不明显;(2)观察治疗后卵巢HE染色,与模型组比较卵泡囊状扩张数减少或缩小,颗粒细胞增多,原始卵泡增多,黄体增多;(3)ELISA结果:模型组睾酮(testosterone,T)、胰岛素(Insulin,INS)水平升高;复方麦芽丸各剂量组血清T、INS浓度较模型组明显降低,炔雌醇环丙孕酮1.44 g/kg组血清T值明显降低,而INS浓度较模型组差异不明显;(4)免疫组化和Western blot结果:模型组AR、INSR蛋白表达明显升高,复方麦芽丸5.76g/kg、11.52 g/kg、23.04 g/kg组均能下调AR、INSR表达。结论:复方麦芽丸可能通过调节AR、INSR水平,以改善PCOS模型大鼠异常的内分泌代谢状态、促进排卵。 王爽 兰楠 陈蓉关键词:多囊卵巢综合症 雄激素受体 胰岛素受体 复方大七气汤对裸鼠卵巢癌皮下移植瘤生长及凋亡的影响 被引量:4 2014年 目的:探讨复方大七气汤(CDQD)对裸鼠卵巢癌细胞皮下移植瘤凋亡的促进作用,为临床治疗提供理论依据。方法:建立裸鼠卵巢癌皮下移植瘤模型,将成功造模的30只荷瘤鼠分为5组(n=6),阴性对照组、复方红豆杉胶囊组、CDQD高剂量组、CDQD中剂量组、CDQD低剂量组,给药21 d后处死所有荷瘤鼠,测瘤体积、瘤质量并绘制肿瘤生长曲线、计算抑瘤率,检测血清糖类抗原CA125,以免疫组化SP法和图像分析技术检测Survivin蛋白、Caspase-3蛋白、Caspase-8蛋白的表达。结果:CDQD汤高剂量组的血清CA125、瘤质量、癌组织Survivin的表达明显低于阴性对照组(P<0.05),抑瘤率、Caspase-3、Caspase-8蛋白的表达明显高于阴性对照组(P<0.05),与复方红豆杉胶囊组比较无明显差异。结论:CDQD对卵巢癌皮下移植瘤增殖具有抑制作用,其机制可能与促进肿瘤细胞凋亡有关。 杨洋博君 陈蓉 李舒 王爽关键词:卵巢癌 SURVIVIN蛋白 CASPASE-3蛋白 CASPASE-8蛋白