王准
- 作品数：4 被引量：2H指数：1
- 供职机构：长春理工大学生命科学技术学院更多>>
- 发文基金：吉林省科技发展计划基金国家自然科学基金更多>>
- 相关领域：医药卫生生物学更多>>
- 胞内分枝杆菌HSP 70基因的克隆、分析及原核表达被引量：1
- 2014年
- 胞内分枝杆菌为致病性非结核分枝杆菌(NTM)之一,分布广泛,人畜均可感染,对人畜健康造成极大威胁。应用巢式PCR克隆胞内分枝杆菌HSP 70基因,利用在线分析软件对其进行生物信息学分析。构建原核表达载体p ET15b-HSP 70,同时进行诱导表达。结果显示,胞内分枝杆菌HSP 70基因完整,ORF基因全长1860bp,共编码619个氨基酸,HSP 70为酸性、亲水性蛋白质,不存在明显跨膜结构,含14个潜在磷酸化位点,亚细胞定位主要存在于细胞质中,无信号肽结构。二级结构预测,蛋白空间结构以α-螺旋和无规则卷曲为主。同时,以同源建模法预测了HSP 70基因编码蛋白的三维立体结构。成功构建p ET 15b-HSP 70原核表达载体,在原核表达系统中该载体可诱导表达70ku的HSP70重组蛋白。
- 葛淑敏王准王诚任梅钱爱东
- 关键词：HSP克隆原核表达
- 一种检测胞内分枝杆菌的ELISA检测方法
- 一种检测胞内分枝杆菌的ELISA检测方法，涉及分子生物学、细胞生物学与微生物学领域，其方法是：（1）抗体包被，（2）封闭，（3）加待检样品，（4）加酶标抗体，（5）加显色液，（6）终止反应，（7）判定结果。有益效果是：本...
- 葛淑敏张淑华陈玉娟王准
- 文献传递
- 抗CEACAM5纳米抗体在大肠杆菌中的高效周质表达
- 2019年
- 纳米抗体具有相对分子质量小、稳定性高、特异性强以及能够穿过血脑屏障等众多优势,而且其能够通过大肠杆菌、酵母等简单微生物大量表达。大肠杆菌周质表达纳米抗体是目前纳米抗体制备主要的方法之一,但是纳米抗体的表达水平还相对较低。以pET22b和pMES4为载体构建了两种重组表达质粒,并且比较了他们在不同宿主菌中表达纳米抗体的情况。结果表明,以pMES4为载体的大肠杆菌能够在周质中可溶性表达纳米抗体,而以pET22b为载体的大肠杆菌表达的纳米抗体无法分泌到周质空间中。随后,通过IPTG浓度优化及5 L发酵罐过程,控制实现了纳米抗体在大肠杆菌周质中的表达量达到308. 32 mg/L。研究提供了一种高效表达纳米抗体的方法,为纳米抗体的规模化制备奠定了技术基础。
- 王准陈玉娟谢英林陈泉宋水燕朱晓宇敬媛媛周宇杭李飞咸漠冯东晓年锐宋海鹏
- 关键词：癌胚抗原大肠杆菌
