孙晓云 作品数:7 被引量:21 H指数:3 供职机构: 上海海洋大学水产与生命学院 更多>> 发文基金: 上海市科委重大科技攻关项目 上海市科技人才计划项目 更多>> 相关领域: 农业科学 生物学 医药卫生 更多>>
西尼罗河热诊断技术与疫苗研究进展 被引量:3 2015年 西尼罗河热(West Nile Fever,WNF)是由西尼河病毒(West Nile Virus,WNV)引起的一种人畜共患病。WNV属于黄病毒科黄病毒属,为一种单链RNA病毒,经蚊子传播,可引起人类发病,也可引起马、鸟类、猫等动物发病。1937年该病毒在西尼罗河地区的乌干达被发现,因此而得名。此病毒由最初只在非洲地区流行到后来跨越到欧洲、亚洲,直到1999年美国纽约出现人感染事件,引起了世界的广泛关注。2002年此病毒肆虐美洲,约有4000多人在44州遭受感染,284人因此而丧生。 刘成倩 李红 易建中 毛慧 王静 陈磊 孙晓云关键词:西尼罗河热 黄病毒科 疫苗 VIRUS 人畜共患病 RNA病毒 pET-32a载体介导的生长抑制素基因在大肠杆菌中表达 被引量:3 2016年 为构建pET-32a-2SS28-SS14和pET-32a-3SS28原核表达质粒并检测其在大肠杆菌中的表达,将两种形式的生长抑制素SS14和SS28基因克隆到pET-32a载体中;酶切及测序鉴定后,采用不同终浓度的IPTG在37℃条件下进行诱导表达。Western blot结果显示:两组分别诱导出分子量大小为28.4 kD和29.8 kD的目的蛋白,不同终浓度的IPTG诱导对目的蛋白的表达量没有明显影响。目的蛋白主要为可溶性蛋白,少数以包涵体形式存在。本研究为生长抑制素基因工程疫苗生产应用奠定了基础。 陈磊 刘成倩 李红 易建中 王静 孙晓云关键词:生长抑素 表达质粒 蛋白质印迹 人工合成高效启动子用于基因治疗及疫苗研制 2017年 为了制备可用于基因治疗载体构建及疫苗研制的启动子,根据高效启动子的特点,人工合成了一段特异启动子(SEP)序列,通过酶切连接将其插入到含有绿色荧光蛋白的pEGFP-C1载体内,得到一新的启动子ESP,借助转染试剂Lipofectamine^(TM)2000将其和pEGFP-C1质粒转入BHK21细胞,通过荧光显微镜观察绿色荧光蛋白表达情况。结果显示:含有启动子ESP序列的pEGFP-ESP-C1荧光蛋白表达量明显高于pEGFP-C1,而且表达稳定。结果提示启动子ESP可以用于基因治疗载体的构建,将导入的基因在细胞内的表达水平提高,为基因治疗的最后成功打下基础。 刘成倩 李红 易建中 孙晓云关键词:启动子 基因治疗 疫苗研制 鸡传染性支气管炎病毒M基因真核表达载体的构建及免疫效力研究 被引量:1 2017年 从GenBank上下载鸡传染性支气管炎病毒(IBV)H120型标准株M基因的标准序列,以此标准序列为模板设计合成一对引物。从IBV尿囊液中提取总RNA,采用PCR技术扩增出M基因,将扩增出的目的片段克隆至pMD18-T载体上获得pMD18-IBV-M质粒,通过亚克隆将目的基因连接到经过改造的pEGFP-C1-SCP-SEC载体上,成功构建真核表达质粒pC1-IBV-M。通过间接免疫荧光试验验证了构建的真核载体能在真核细胞内表达,通过动物免疫试验来检测该真核表达载体对动物的免疫保护情况。 孙晓云 刘成倩 易建中 李红关键词:鸡传染性支气管炎病毒 M基因 动物试验 猪圆环病毒2型Rep基因真核表达载体的构建和免疫原性分析 2016年 根据GenBank发表的猪圆环病毒2型(PCV2)基因序列设计并合成1对特异性引物,进行PCR扩增,从PCV2突变株中扩增出PCV2 Rep基因,对PCR扩增产物清洁后进行双酶切,连接到pEGFP-C1载体上,转化到大肠杆菌DHSα感受态细胞中,经PCR筛选和测序后鉴定出正确的重组基因,完成真核表达载体的构建。将重组质粒转染到PK15细胞中,收取病毒液抽提DNA,PCR检测到Rep基因,证明转染是成功的。进行间接免疫荧光试验,可以检测Rep基因在PK15细胞中的表达,试验结果很好的验证了Rep基因的免疫原性。这为进一步研究PCV2的生物学活性及PCV2新型疫苗奠定了坚实的基础。 王静 刘成倩 李红 易建中 于宗幸 陈磊 孙晓云关键词:猪圆环病毒2型 真核表达载体 间接免疫荧光 简述溶菌酶的研究现状 被引量:13 2016年 溶菌酶(lysozyme)又称胞壁质酶,是一种普遍存在于植物、动物和微生物中的盐基水解蛋白。溶菌酶的特征在于无毒、无害、无残留、安全性高,因此被广泛用于抗菌、抗炎、抗病毒、免疫力提升、促进有益菌增殖(双歧杆菌)等用途。本文分析和归纳了溶菌酶的研究发展、活性影响因素和分类,并总结了其在食品、医药、畜牧业和酶工程等行业的应用价值。 李红 易建中 刘成倩 孙晓云 严华祥关键词:溶菌酶 鸡传染性支气管炎病毒H120型M、N基因的免疫原性研究 鸡传染性支气管炎(Avian infectious bronchitis,IB)是由鸡传染性支气管炎病毒(Avian infectious bronchitis virus,IBV)引起的一种鸡的急性传染性疾病,通过接触... 孙晓云关键词:鸡传染性支气管炎病毒 M基因 N基因 核酸疫苗