丁晓霞
- 作品数：3 被引量：0H指数：0
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- 帽儿山异色瓢虫野外越冬前体内甘油·脂肪含量的变化
- 2015年
- [目的]明确野外越冬异色瓢虫[Harmonia axyridis(Pallas)]成虫体内甘油、脂肪2种物质越冬前的动态变化。[方法]利用动力学方法和重量法,分别测定了其体内甘油和脂肪含量。[结果]昼长及温、湿度共同影响异色瓢虫越冬前体内甘油和脂肪含量的变化;在异色瓢虫越冬前,虫体脂肪含量达到最低值,于部分异色瓢虫越冬期间达到最高值;而虫体甘油含量在异色瓢虫越冬前期及部分异色瓢虫越冬期间达到最高值,在几乎全部异色瓢虫越冬期间降到最低值;甘油、脂肪含量变化与昼长及温、湿度变化呈一定相关性,但不显著。[结论]异色瓢虫体内甘油与脂肪含量在越冬前呈互补变化,在部分及全部异色瓢虫越冬期间均呈现上升和下降相似变化,其相应生化指标可作为异色瓢虫越冬的指示。
- 姜礅王世新丁晓霞孟昭军
- 关键词：异色瓢虫越冬甘油
- 帽儿山异色瓢虫野外越冬前体内CAT和SOD活性的变化
- 2015年
- [目的]了解自然条件下野外越冬前期异色瓢虫[Harmonia axyridis(Pallas)]体内超氧化物歧化酶(SOD)和过氧化氢酶(CAT)活性的变化情况。[方法]定期采集野外越冬前期的异色瓢虫,并通过紫外分光光度法测定其CAT和SOD活性。[结果]CAT和SOD活性变化与温度、相对湿度和昼长变化均无显著相关性;但2种酶活在11月2日之前均呈上升趋势,而后至12月7日呈上升或下降波动;CAT活性在11月16日达到最高峰,12月7日到达低谷;而SOD活性在11月2日和12月7日达到高峰,11月16日达到低谷,两者变化呈互补性。[结论]当温度低于4.8℃、昼长短于10.10 h时,异色瓢虫开始滞育;而温度达-9.0℃、昼长短于8.70 h时,绝大多数异色瓢虫滞育越冬;在上述2个滞育点期间,异色瓢虫体内CAT和SOD活性变化明显,其活性大小可作为异色瓢虫滞育越冬的标志。
- 丁晓霞王世新姜礅刘琦玮孟昭军
- 关键词：异色瓢虫越冬自然种群CATSOD
- 粗毛纤孔菌糖苷水解酶5基因克隆及蛋白质结构分析
- 2015年
- 【目的】克隆得到粗毛纤孔菌糖苷水解酶5基因,并对该基因进行生物信息学分析、蛋白质原核表达和酶活研究,为糖苷水解酶的利用提供依据。【方法】分离纯化粗毛纤孔菌,并于PDA斜面长期保存。应用TRIzol提取粗毛纤孔菌总RNA,通过AMV反转录系统将RNA反转录成c DNA,构建c DNA文库;应用NCBI BLAST分析并检测糖苷水解酶基因家族5阳性序列,RACE法克隆基因全长命名为Ih GH5-1并提交NCBI注册;ORF-Finder分析Ih GH5-1基因开放阅读框,推导出氨基酸序列;筛选NCBI登录的糖苷水解酶家族5同源序列,Clustal W进行保守结构域区段多序列比对;应用Mega 5.05选用WAG+G模型构建最大似然树;应用PSIPRED server对Ih GH5-1进行α螺旋和β折叠的蛋白质二级结构分析,应用SWISS-MODEL对Ih GH5-1进行三维建模,应用VMD1.8.6分析Ih GH5-1三维结构;设计原核表达引物并进行PCR扩增,将扩增得到的基因片段连接至p QE-30 UA载体并转入大肠埃希菌JM109感受态细胞,诱导表达后通过SDS-PAGE电泳检测表达量;测定糖苷水解酶活性并计算酶活。【结果】TRIzol提取的粗毛纤孔菌总RNA经分光光度计检验符合标准(OD260/OD280=2.0,OD260/OD230>1.8),c DNA文库成功构建并测序;RACE法克隆得到5'序列长度为770 bp,3'序列长度为1 562 bp且含有Poly A的序列,5'和3'序列拼接得到基因全长序列长1 727 bp,NCBI注册号为KM368321;ORF分析得到Ih GH5-1氨基酸序列含有300个氨基酸,分子质量为31.226 55 k D,等电点(p I)为9.24;结构域分析表明Ih GH5-1具有保守的催化结构域;最大似然树分析表明多数子囊菌糖苷水解酶家族5聚在一起,多数担子菌糖苷水解酶家族5聚在一起,粗毛纤孔菌Ih GH5-1蛋白质与太瑞斯梭孢壳霉和球毛壳菌等子囊菌的糖苷水解酶亲缘关系更近;蛋白质三维结构分析表明粗毛纤孔菌Ih GH5-1含有7个α螺旋、4个β折叠,三维比对表明粗毛纤孔菌Ih GH5-1三维结构与其他真菌糖苷�
- 刘晓晗王峰董爱荣陈俏丽刘立宏零雅茗王博文丁晓霞王世新
- 关键词：水曲柳
