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穿心莲香叶基香叶基焦磷酸合成酶基因: 本发明属于生物技术领域，涉及穿心莲香叶基香叶基焦磷酸合成酶基因，具有SEQ？NO:1序列。本发明所提供的穿心莲香叶基香叶基焦磷酸合成酶基因可以用于在穿心莲中进行荧光定量表达、基因功能验证等研究；可以用于制备DNA探针；可...; 王晓云钟国跃陈蓉; 文献传递

穿心莲香叶基香叶基焦磷酸合成酶基因的克隆与表达: 2015年; 目的从穿心莲中克隆穿心莲内酯合成途径中的香叶基香叶基焦磷酸合成酶(geranylgeranyl diphosphate synthase,GGPS)基因,并进行组织表达等特征研究。方法采用CTAB-LiC1法从穿心莲茎和叶中提取总RNA,简并引物扩增获得保守区段,RACE法获得基因全长,ProtParam等软件分析基因特征,实时荧光PCR法检测不同发育时期穿心莲茎和叶中基因的表达。结果获得了一个长1 047 bp的GGPS基因,编码一条由348个氨基酸组成的蛋白质序列,与长春花的GGPS蛋白亲缘关系较近,N端含有一个由47个氨基酸构成的质体信号肽。在穿心莲的茎和叶中,GGPS基因在花蕾期表达量较高,初花期降低;到了花果混合期表达量升高,青果期下降。表明穿心莲花蕾期和花果混合期相关代谢成分的合成可能更活跃。结论从穿心莲中克隆了GGPS基因,为开展穿心莲内酯合成途径的调控奠定了基础。; 王晓云陈蓉张恩慧钟国跃; 关键词：穿心莲穿心莲内酯生物合成途径克隆

由粪便代谢组学研究热敏灸改善膝骨性关节炎的机制: 2024年; 目的采用粪便代谢组学技术,探讨热敏灸治疗膝骨性关节炎的潜在作用机制。方法复制膝骨性关节炎模型后,将模型组兔随机分为模型组与艾灸组,同时设空白组。分别按各被试因素进行干预14 d后,根据终温变化统计,将艾灸组兔分为热敏灸组(>1℃)和非热敏艾灸组(≤1℃)。应用HE染色观察软骨组织,ELISA检测血清炎症因子含量,LC-MS检测粪便代谢物变化,多元统计分析鉴别差异代谢物并分析代谢通路。结果经HE染色,模型组软骨组织较空白组改变发生显著病理学变化。造模后,模型组IL-1β、IL-6含量较空白组显著升高(P<0.001),IL-10下降显著(P<0.001)。治疗后,相比模型组,热敏灸组、非热敏灸组IL-1β、IL-6含量均显著下降(P<0.001),IL-10含量均上调显著(P<0.001),而热敏灸组IL-1β、IL-6下降趋势更好。经分析,确定10个生物标志物和11条代谢通路与KOA密切相关,如类固醇降解、卵巢类固醇生成、视黄醇代谢等,其中以类固醇降解最为显著。结论热敏灸改善KOA炎症反应,发挥抗KOA作用可能与调控类固醇降解、卵巢类固醇生成、视黄醇代谢等有关。; 方园章海凤李绍家陈瑾喻周艳苹喻文罗宇喆李琳慧臧振中陈蓉邱云付勇; 关键词：热敏灸膝骨性关节炎

栀子类胡萝卜素剪切双加氧酶基因GjCCD4的克隆与原核表达被引量：5: 2016年; [目的]类胡萝卜素剪切双加氧酶(Carotenoid cleavage oxygenase,CCD)是西红花总苷生物合成途径的关键酶,本研究拟从栀子果实中克隆CCD基因。[方法]在NCBI数据库中搜索CCD蛋白,获得种子序列后,构建系统进化树,按照亲缘关系分组。再利用CODEHOP法,针对每个组设计简并引物,在栀子果皮和果肉c DNA中扩增,获得保守区段。然后通过RACE获得基因全长。构建pet28a原核表达载体,转化BL21(DE3)菌株后在30℃培养4 h,转化菌株Aritic Expression(DE3)后在15℃培养过夜,诱导蛋白表达。[结果]克隆了一个GjCCD4基因,长1 863 bp,编码的蛋白质N端序列变动较大,C端保守性强,N-末端含有一个叶绿体定位的信号肽。系统发育分析表明,GjCCD4蛋白与拟南芥和西红花的同源蛋白聚在同一个簇。在BL21(DE3)和AE(DE3)菌株的沉淀中表达出大量包涵体形式的融合蛋白,在BL21(DE3)菌株的上清中表达出少量可溶蛋白。[结论]获得了一个类胡萝卜素剪切双加氧酶基因GjCCD4,通过原核表达获得了少量可溶蛋白。; 王晓云陈蓉张恩慧; 关键词：栀子克隆

基于遗传与环境的穿心莲品质研究: 穿心莲为常用中药,来源于爵床科植物穿心莲Andrographis paniculata (Burm. f.) Nees,以地上部分入药,功能清热解毒,凉血,消肿,临床主要用于感冒发热,咽喉肿痛,口舌生疮,顿咳劳嗽,泄泻痢...; 陈蓉; 关键词：穿心莲分子标记土壤因子; 文献传递

穿心莲甲羟戊酸5-焦磷酸脱羧酶基因的克隆与表达被引量：4: 2016年; 穿心莲内酯是穿心莲的主要药效成分,广泛用于抗炎。为了对它的生物合成进行遗传调控,提高内酯类成分的合成量,作者在转录组数据分析的基础上,获得了穿心莲内酯生物合成途径中甲羟戊酸5-焦磷酸脱羧酶基因的3个克隆,包含的ORF均长1 260 bp,分别在4个位点具有单碱基的差异。它们编码由419个残基组成的氨基酸序列;保守结构域中均具有11个高度保守的氨基酸,分别决定催化反应的特异性和活性;N端不含有质体定位的信号肽;与丹参的MVD蛋白(Gen Bank号AEZ55675.1)一致性较高。在穿心莲茎和叶片中,MVD基因的表达量分别在花蕾期和初花期最高,但各时期表达量的倍数差异不大。该研究获得的MVD基因,为后续进行详细的功能解析,并进一步应用于穿心莲内酯的遗传调控,奠定了基础。; 王晓云陈蓉张恩慧钟国跃; 关键词：穿心莲穿心莲内酯生物合成途径克隆

穿心莲甲羟戊酸 5-焦磷酸脱羧酶基因: 本发明属于生物技术领域，涉及穿心莲甲羟戊酸5-焦磷酸脱羧酶基因，具有SEQ？ID？NO:1序列。本发明所提供的MVD基因可以用于制备相应的DNA探针；可以用于穿心莲内酯合成途径的改造，提高活性成分合成量；可以转入生物反应...; 王晓云钟国跃陈蓉; 文献传递

基于SRAP和SNP分子标记的国内穿心莲遗传多样性分析被引量：12: 2014年; 为了阐明国产穿心莲的遗传多样性以及探讨遗传背景对穿心莲药材质量的影响,利用110对SRAP引物和1对SNP特异性引物,对我国7个省份13个样地的103份穿心莲样品进行遗传多样性分析。采用Powermarker V3.25和Mega6.0软件分析群体的遗传结构,Codon Code Aligner软件分析功能基因单核苷酸多态性变异。聚类分析结果表明各穿心莲样品的遗传距离范围为0.01~0.09,CPS基因片段中未检测到SNP位点,国产各地穿心莲种质间遗传多样性较贫乏,这与穿心莲严格的自花授粉繁殖特性、我国各地引种穿心莲种源来源单一密切相关。遗传背景并非影响各地穿心莲质量差异的主要原因,穿心莲的良种选育以采用突变育种、多倍体育种和分子育种等方法为宜。; 陈蓉王晓云宋毓宁朱云峰王鹏良李敏钟国跃; 关键词：穿心莲 SRAP分子标记

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陈蓉