刘志洋
- 作品数：5 被引量：11H指数：2
- 供职机构：青岛市市立医院更多>>
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- miR-203靶定CAMTA1基因调控神经母细胞瘤细胞的迁移能力被引量：1
- 2014年
- 目的本研究旨在探讨miR-203在神经母细胞瘤组织中的表达水平及其在神经母细胞瘤细胞迁移过程中的作用机制。方法在神经母细胞瘤细胞中转染miR-203抑制剂，通过Transwell迁移实验研究其对迁移的影响。利用生物信息学技术预测miR-203的靶基因，并应用荧光报告基因检测、实时荧光定量PCR及WesternBlot对靶基因进行验证。采用siRNA干扰技术抑制靶基因CAMTA1的表达，共转染miR-203抑制剂及CAMTA1 siRNA，验证miR-203是否是通过靶基因影响细胞迁移。最后应用荧光定量PCR方法检测原发性和转移性神经母细胞瘤样本中miR-203的表达。结果神经母细胞瘤细胞系SH-SY-5Y和SK-N-SH中抑制miR-203表达后，与转染miR抑制剂对照相比，细胞迁移数目分别降低了41．34％和37．86％（P〈0．05）。miR-203能够直接靶向结合CAMTA1mRNA的野生型圳TR，转染miR-203抑制剂后，SH-SY-5Y和SK-N-SH细胞中内源性CAMTA1蛋白表达分别是转染miR阴性对照的2．13和1．78倍。（P〈0．05）。转染过表达CAMTA1质粒，SH-SY-5Y和SK-N-SH细胞迁移数目分别下降了25．27％和19．48％（P〈0．05）。在SH-SY5Y细胞中，同时共转miR-203抑制剂和CAMTA1 siRNA，与单纯转染miR-203抑制剂相比，细胞迁移能力增高了19．37％和（P〈0．05），与单纯转染抑制剂对照组相比，无统计学差异（P〈0．05）。与原发性神经母细胞瘤相比，在转移性神经母细胞瘤中，miR-203表达水平更高（P〈0．05）。结论miR-203与神经母细胞瘤样转移性相关，并且能够通过靶定CAMTAl基因影响神经母细胞瘤细胞的迁移能力。
- 刘志洋刘伟伟孙梅陈鑫韩芦芦董蒨
- 关键词：神经母细胞瘤RNA小分子干扰
- 健身车
- 本实用新型公开了一种健身车，包括：车架，所述车架上设置有插销；座椅，所述座椅安装在所述车架上；转动架，所述转动架的一端部设置有可转动的动力轮，所述转动架的另一端部设置有可转动的飞轮，所述动力轮与所述飞轮传动连接，所述动力...
- 刘志洋
- 文献传递
- miR-7-5p靶向调控POLE4对神经母细胞瘤细胞SH-SY5Y体外增殖和侵袭的影响研究被引量：6
- 2019年
- 目的探讨微小RNA-7-5p(microRNA-7-5p,miR-7-5p)对POLE4蛋白[Polymerase (DNA-directed), epsilon 4,POLE4]的调控作用及其对神经母细胞瘤(neuroblastoma,NB)细胞SH-SY5Y体外增殖、侵袭的影响。方法利用生物信息学软件预测miR-7-5p的靶基因为POLE4;运用荧光素酶实验验证miR-7-5P对POLE4的直接靶向作用。将SH-SY5Y细胞分为miR-7-5p过表达实验组(miR-7-5p组)、阴性对照组和空白对照组并进行细胞转染,运用RT-PCR、Western Blot实验检测转染后的SH-SY5Y细胞中POLE4 mRNA和蛋白的表达量,然后通过克隆形成实验和Transwell小室法检测转染后的SH-SY5Y细胞的体外增殖活力和侵袭能力的变化。结果运用TargetScan、PicTar和miRanda软件预测miR-7-5p的靶基因为PLOE4。RT-PCR和Western Blot实验显示,miR-7-5p组中POLE4 mRNA和POLE4蛋白的相对表达量分别为0.53±0.04和0.26±0.02,与阴性对照组和空白对照组相比,表达水平均下调明显,且差异有统计学意义(P均<0.05)。说明miR-7-5p能够显著抑制POLE4 mRNA和POLE4蛋白的表达。过表达miR-7-5p后,miR-7-5p组集落形成数为(87±3)个,较阴性对照组(138±3)个和空白对照组(156±4)个明显减少,且差异有统计学意义(P<0.05)。说明miR-7-5p可以下调神经母细胞瘤细胞的增殖活力。Transwell小室检测实验发现,miR-7-5p组穿透基质胶的细胞数为(82±5)个,较空白对照组(349±9)个和阴性对照组(232±5)个明显减少,且差异有统计学意义(P<0.05)。说明miR-7-5p对SH-SY5Y细胞的侵袭能力有明显抑制作用。结论miR-7-5p通过靶向抑制POLE4的表达进一步抑制NB细胞的增殖和侵袭能力,可能作为抑制NB细胞增殖和转移的潜在靶点。
- 刘志洋董蒨韩芦芦郝希伟李富江陈鑫
- 关键词：神经母细胞瘤
- 颈脊椎康复仪
- 本发明公开了一种颈脊椎康复仪，包括：底座；升降组件；所述升降组件包括导向杆、滑动座和驱动机构，第一转动组件具有第一转动部件和第一转轴，第二转动组件具有第二转动部件和第二转轴，升降组件用于带动第二转动组件相对于第一转动组件...
- 刘志洋
- 文献传递
- 微小RNA-335通过靶定人类表皮生长因子3调控乳腺癌细胞的侵袭被引量：4
- 2015年
- 目的 观察微小RNA（miR）-335在乳腺癌细胞侵袭中的作用.方法 分别在Basallike类型正永用生化细胞MCF10A和Luminal A乳腺癌细胞MCF7中抑制和过表达miR-335的含量,采用Transwell侵袭实验检测细胞侵袭能力的改变;利用生物信息学网站预测miR-335靶基因,并用荧光报告基因检测实验验证;应用miR-335抑制剂及靶基因siRNA单转染和共转染,验证miR-335是否通过靶基因执行功能.最后利用实时荧光定量聚合酶链反应检测在35例原发性乳腺癌组织中miR-335的表达水平.结果 在MCF10A内敲减miR-335,细胞发生侵袭的数目由对照组51个增加到实验组的67个,促进细胞侵袭的能力（P＜0.05）.在MCF7中过表达miR-335后,由对照组侵袭数目51个降至实验组43个,抑制细胞侵袭的能力（P＜0.05）.miR-335能够靶向结合人类表皮生长因子3（ERBB3）的mRNA的3＇-非翻译区（3＇-UTR）,抑制ERBB3 mRNA及蛋白水平表达（P＜0.05）.敲减ERBB3后能够恢复miR-335低表达造成的细胞侵袭能力的降低（P＜0.05）.miR-335在原发性乳腺癌组织中表达为正常组织的0.75,呈显著低表达（P＜0.01）.结论 在原发性乳腺癌组织样本中,miR-335低表达,并且通过靶向ERBB3影响细胞的侵袭能力.
- 刘志洋刘伟伟贾萍陈鑫董蒨
- 关键词：乳腺癌
