肖剑萍
- 作品数：5 被引量：3H指数：1
- 供职机构：福州大学生物科学与工程学院更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金国家科技重大专项更多>>
- 相关领域：生物学化学工程更多>>
- 暗霉素定向生物合成研究
- 妥布霉素是临床使用的重要抗生素,其产业化生产菌黑暗链霉菌Tt-49主产安普霉素、氨甲酰妥布霉素和妥布霉素等复合物。利用基因工程技术,先阻断安普霉素的生物合成,后进一步阻止氨甲酰基修饰,获得单组分妥布霉素工程菌。在此基础上...
- 肖剑萍
- 关键词：妥布霉素安普霉素黑暗链霉菌
- 文献传递
- 单组分妥布霉素工程菌的构建被引量：2
- 2014年
- 目的阻断黑暗链霉菌中安普霉素和氨甲酰妥布霉素的合成,构建主产妥布霉素工程菌。方法以安普霉素生物合成基因apr J为靶标,克隆其上下游序列作为同源交换臂,构建重组质粒p XJ401,利用接合转移技术将其导入黑暗链霉菌Tt-49,获得工程菌TX302,并在此基础上敲除氨甲酰基转移酶基因tob Z,获得工程菌TX308。采用MS法,检测工程菌次级代谢产物的变化。结果 TX302主产氨甲酰妥布霉素,未检测到安普霉素。TX308不再合成氨甲酰妥布霉素,产物只检测到妥布霉素。结论磷酸变位酶基因apr J是安普霉素生物合成的关键基因,敲除后能有效阻断安普霉素的合成,工程菌TX308大量积累妥布霉素,不再合成安普霉素和氨甲酰妥布霉素,具有重要的产业化价值。
- 肖剑萍温淑平洪文荣
- 关键词：黑暗链霉菌安普霉素妥布霉素工程菌
- 高产氨甲酰妥布霉素基因工程菌的构建
- 以安普霉素生物合成基因aprd为靶标,克隆其上下游序列作为同源交换臂,构建重组质粒pFJ401,利用接合转移技术将其导入S.tenebrarius Tt-49,获得一株工程菌TX302（Z△aprd）。代谢产物分析表明,...
- 肖剑萍温淑平洪文荣
- 关键词：黑暗链霉菌安普霉素基因工程
- 文献传递
- 庆大霉素生物合成基因研究进展
- 庆大霉素生物合成基因簇是一个独具特色,潜含开发前药或新化合物的生物合成基因宝库。采用交叉遗传学技术,研究了9个基因对庆大霉素生物合成的贡献程度,其中5个基因对庆大霉素的生物合成有重要贡献,4个基因未见贡献。5个有重要贡献...
- 洪文荣张熠张书祖阙新桥肖剑萍严凌斌
- 关键词：庆大霉素新药开发生物合成基因功能
- 文献传递
- 一株产G418单组分工程菌的构建被引量：1
- 2015年
- 【目的】定向改造庆大霉素产生菌绛红小单孢菌G1008,获得产G418单组分工程菌。【方法】以温敏型穿梭质粒p KC1139为载体,构建敲除基因genQ*重组质粒p QB303,通过接合转移,导入绛红小单孢菌G1008中,影印筛选和PCR鉴定genQ*框内缺失突变菌,利用TLC和MS分析其代谢产物组分。【结果】获得一株genQ*缺失工程菌Micromonospora purpurea GQ175,其代谢产物为G418单组分,生物效价达828 mg/L,与出发菌G1008的产抗能力相当。【结论】工程菌GQ175产G418单组分,具有很好的工业开发价值。同时,证明绛红小单孢菌G1008中,庆大霉素C-6′脱氢酶基因为genQ*,且无其他同功酶基因。
- 阙新桥林艺辉胡育龙肖剑萍洪文荣
- 关键词：G418基因敲除
