钱元霞 作品数:5 被引量:28 H指数:2 供职机构: 江苏大学药学院 更多>> 发文基金: 南京市医学科技发展项目 国家自然科学基金 更多>> 相关领域: 医药卫生 更多>>
人pEGFP-GEF-H1载体的构建及其表达 2014年 背景:研究表明GEF-H1能激活Rho蛋白,与肿瘤发生、发展、浸润、迁移等密切相关。目的:构建人pEGFPGEF-H1载体并稳定转染结肠癌HCT116细胞后检测GEF-H1表达。方法:在线合成引物软件设计人GEF-H1基因引物,构建重组质粒pEGFP-GEF-H1,并转染结肠癌HCT116细胞,以转染空质粒和未转染的细胞分别作为空质粒组和空白对照组。荧光显微镜下观察绿色荧光蛋白表达,RT-PCR和蛋白质印迹法分别检测GEF-H1 mRNA和蛋白表达水平。结果:成功构建了人pEGFP-GEF-H1载体,测序结果表明序列正确。转染重组质粒pEGFP-GEF-H1后,荧光显微镜下可见较强的绿色荧光,GEF-H1 mRNA和蛋白表达水平均较空质粒组和空白对照组明显上调。结论:体外成功构建了人pEGFP-GEF-H1载体,且转染结肠癌HCT116细胞后高表达GEF-H1,为进一步探讨结肠癌与GEF-H1的关系提供了必要的实验材料。 徐卫东 钱元霞 曹俊关键词:结肠肿瘤 RHO蛋白 转染 奈达铂与其他铂类制剂药物不良反应的临床比较研究 被引量:21 2012年 目的调查分析奈达铂和其它铂类制剂药物不良反应(Adverse Drug Reaction,ADR)发生情况,为临床选用铂类制剂和预防铂类制剂ADR提供参考。方法随机抽取2009年1月~2010年12月间使用铂类制剂病例共224例,其中使用奈达铂112例,其它铂类制剂(包括顺铂、卡铂、奥沙利铂,按4:2:4抽取)112例为对照组,采用回顾性分析方法进行统计。结果奈达铂和其它铂类制剂组ADR发生率分别为62.5%,66.07%,无明显统计学意义,其中骨髓抑制奈达铂发生率高于其他铂类制剂,有统计学意义(P<0.05),肝肾功能损害发生率明显低于其他铂类制剂(P<0.05)。约95%ADR能治愈;约65%ADR为严重级;ADR男女发生率分别为61.81%、38.19%,有统计学意义,ADR发生年龄主要为58~72岁患者。结论奈达铂发生骨髓抑制高于其他铂类制剂,而对肝肾功能损害比其他铂类制剂低。 房树华 钱元霞关键词:奈达铂 顺铂 卡铂 奥沙利铂 ADR 四逆散含药血清诱导大鼠肝脏干细胞分化及其调控机制 被引量:1 2014年 目的:研究四逆散含药血清对大鼠肝脏干细胞分化的影响并探讨其治疗肝病的作用机制。方法:采用HPLC-MS-MS法,梯度洗脱,测定血清中四逆散的有效成分;以四逆散含药血清处理WB-F344细胞后,采用CCK-8法观察细胞增殖情况,血糖仪检测细胞培养液葡萄糖含量,乳酸测定试剂盒检测细胞中乳酸含量,荧光素-荧光素酶法检测ATP含量,蛋白质印迹法观察表皮生长因子受体(epidermal growth factor receptor,EGFR)、纤维母细胞生长因子受体(fibroblast growth factor receptor,FGFR)、转化生长因子受体(transforming growth factor beta receptor typeⅠ,TGF-βRⅠ)、肝细胞生长因子受体(hepatocyte growth factor receptor,HGFR)蛋白表达情况。结果:在四逆散血清中,检测到以原型入血芍药苷、橙皮苷等成分,并检测到橙皮素葡萄糖醛酸等部分代谢物。各浓度含药血清作用WB-F344细胞48h后,对细胞均无毒性作用,10%含药血清显示出较好的促进细胞增殖的效果。随着药物血清作用时间的延长,WBF344细胞葡萄糖消耗量、乳酸生成量降低,ATP生成增加,EGFR、FGFR、TGF-βRⅠ、HGFR蛋白表达水平上升。结论:四逆散含药血清能够促进肝脏干细胞WB-F344的增殖并诱导其分化,分化机制可能与影响数种细胞因子受体的表达有关。 徐卫东 钱元霞 高静 赵映前关键词:四逆散 肝干细胞 分化 细胞因子受体 晚期糖基化终产物诱导人主动脉内皮细胞氧化应激损伤及线粒体功能紊乱 2014年 目的:观察晚期糖基化终产物(advanced glycation end products,AGEs)对内皮细胞氧化应激水平和线粒体功能的影响,以探讨糖尿病血管内皮细胞功能障碍可能的发生机制。方法:以不同质量浓度(50,100μg/mL)的AGE修饰的牛血清白蛋白(AGE-bovine serum albumin,AGE-BSA)作用于人主动脉内皮细胞(human aortic endothelial cells,HAECs)48 h,CCK-8法测定HAECs的增殖能力,黄嘌呤氧化酶法测定超氧化物歧化酶(superoxide dismutase,SOD)活力,应用DCFH-DA探针检测细胞内活性氧(reactive oxygen species,ROS)的水平;JC-1法检测线粒体膜电位(mitochondrial membrane potential,MMP),荧光素-荧光素酶法和Clark氧电极法测定细胞中ATP含量及细胞耗氧率。结果:AGE-BSA能显著性地抑制HAECs增殖,增加细胞内ROS水平,降低SOD活力,且高质量浓度作用更加明显。同时,AGE-BSA还能使MMP下降、ATP生成及耗氧减少。结论:AGE-BSA诱导HAECs产生氧化应激损伤,其机制与其造成线粒体功能紊乱相关。 丁银慧 孙竞 钱元霞 李芸子 高静 陈赟关键词:晚期糖基化终产物 氧化应激 线粒体 四逆散含药血清对大鼠肝干细胞WB-F344增殖分化的影响 被引量:6 2015年 目的研究四逆散(柴胡,白芍,枳实,甘草)含药血清诱导大鼠肝干细胞WB-F344分化的作用。方法 SD大鼠灌胃四逆散,取其含药血清处理WB-F344细胞,应用CCK-8方法检测细胞活性,Western blot法检测甲胎蛋白(AFP)、白蛋白(ALB)、细胞色素P450 3A(CYP 3A)蛋白表达,PCR检测AFP、ALB的mRNA水平,PAS法检测糖原合成功能,尿素氮检测试剂盒观察尿素氮合成功能,Mito Tracker Red染色法检测线粒体数目,Clark氧电极检测细胞耗氧量,荧光素酶法测定细胞内ATP水平,JC-1染色检测线粒体膜电位。结果含药血清对实验细胞无毒性作用,10%含药血清显示出较好的促进细胞增殖的效果;含药血清作用后,AFP的蛋白及基因水平有降低趋势,ALB的蛋白及基因水平有升高趋势,糖原合成功能、尿素氮合成功能提高,CYP 3A蛋白水平有一定增加。同时,线粒体数目增加,细胞呼吸功能、ATP水平、线粒体膜电位都有一定程度增加。结论四逆散含药血清可促进肝干细胞增殖、诱导其分化,可能为促进肝损伤修复的机制之一。 徐卫东 钱元霞 高静 赵映前 丁银慧 刘旭关键词:四逆散 含药血清 线粒体 分化