蒋冬贵
- 作品数：7 被引量：12H指数：2
- 供职机构：中南大学更多>>
- 发文基金：国家高技术研究发展计划国家自然科学基金更多>>
- 相关领域：医药卫生更多>>
- RNA体外干扰肝癌Hep-3B细胞VEGF基因的表达被引量：2
- 2007年
- 目的:通过自主构建的RNAi载体和体外合成siRNA的方法,寻找能有效干扰VEGF基因表达的载体和siRNA片段治疗肿瘤.方法:将自主构建的pcDUVEGF-1和pcDUVEGF-2,以及体外合成的TWvegf-1和TWvegf-2 siRNA片段转染肝癌Hep-3B细胞,通过RT-PCR,Western Blot和ELISA检测转染前后VEGF的 mRNA及蛋白表达水平,以了解RNA干扰效果.结果:两种RNA干扰的方法均能抑制VEGF基因的表达且差异具有显著性( mRNA,0.28,0.47,0.76,0.58vs1.2,P<0.01;蛋白质,138,121,249,227vs389μg/L,P<0.01).结论:两个质粒及siRNA片段均能有效的抑制VEGF基因的表达.
- 蒋冬贵夏昆刘劫罗红潘乾龙志高夏家辉
- 关键词：RNAISIRNA血管内皮生长因子肝癌细胞
- EXT2基因IVS2+1G>A突变致遗传性多发性外生性骨疣被引量：6
- 2004年
- 目的 确定一个遗传性外生性骨疣家系的致病基因。方法 应用基因组扫描方法 ,利用 8、11和 19号染色体上的微卫星标记对该家系进行连锁分析 ,确定候选基因 ,然后对候选基因的编码区及外显子与内含子交界处进行测序分析寻找突变 ,并行逆转录 - PCR扩增 m RNA加以证实。结果 该家系致病基因被定位在 11号染色体的 EXT2基因区 ,在 EXT2基因中检测到 1个 IVS2 +1G>A(5 36 +1G>A)突变 ,该突变与疾病共分离。逆转录 - PCR证实 ,该突变导致编码区的第 316～ 5 36位共 2 2 1个碱基的缺失 ,使 10 6位密码子至 178位密码子及紧随的两个核苷酸的缺失 ,造成移码 ,形成 12 5个氨基酸的截短蛋白。结论 EXT2基因的 IVS2 +1G>A突变是导致这个家系发生外生性骨疣的原因。
- 胡正茂郑多潘乾杨一峰赵天力刘小平邬玲仟蒋冬贵夏昆夏家辉
- 关键词：遗传性多发性外生性骨疣致病基因
- RNAi在肝癌基因治疗的临床前研究
- 蒋冬贵
- 关键词：肝癌基因疗法
- RNA干扰质粒pcDU6的构建及其应用
- 2007年
- 目的:根据RNAi的原理自主构建一个真核表达的RNAi载体pcDU6。方法:从人的gDNA中克隆出U6promoter(-315～+1),将其与Bgl II和ApaI双酶切的pcDNA3.1(-)质粒大片段酶连,转化JM109大肠杆菌,抽取阳性质粒测序证实,与GFP转染HT1080细胞;干扰肝癌细胞的AFP基因了解干扰效果。结果:pcDU6成功构建转染带有干扰AFP基因表达的RNAi质粒使肝癌细胞的能明显抑制AFP基因的表达(P<0.01),转染质粒后Hep-3B细胞生长明显被抑制(P<0.01)。结论:pcDU6是一个有效的真核表达的RNAi干扰载体。
- 蒋冬贵夏昆邬玲仟潘乾龙志高夏家辉
- 关键词：RNA干扰AFP
- 冠心病患者血小板膜结合纤维蛋白原的定量测定及与血脂的关系
- 为了探讨冠心病患者血小板聚集性增强的机制,运用免疫荧光技术,测定了血小板膜结合纤维蛋白原(Fg)在正常人、稳定型心绞痛患者(SA)以及不稳定型心绞痛患者(UA)的动静脉血中的量,以及受检者的血脂.结果表明血小板膜结合Fg...
- 蒋冬贵
- 关键词：冠心病血小板纤维蛋白原血脂免疫荧光技术
- 人Endostatin cDNA的克隆及其在HT1080细胞中的表达被引量：3
- 2002年
- 目的 :构建能表达人Endostatin的真核表达质粒。方法 :设计引物从成人肝cDNA文库中通过PCR扩增到EndostatincDNA ,并在 5′端融合编码人胰岛素信号肽序列 ,经测序证实后连接到真核表达载体pcDNA3.1(- )中。将携带基因的真核表达载体质粒pcDNA3.1(- ) SEND转染HT10 80细胞后用G4 18筛选获得克隆 ,采用RT PCR和West ern blot检测Endostatin的表达。结果 :测序结果表明克隆的人EndostatincDNA完全正确 ,并且在其 5′端融合编码人胰岛素信号肽序列 ;RT PCR显示转染后的HT10 80细胞可以有效地转录EndostatinmRNA ;Western blot检测到转染后的HT10 80细胞上清有相应的蛋白质 ,大小为 2 0kD左右。结论 :含有人胰岛素信号肽序列的人EndostatincDNA重组质粒pcDNA3.1(- ) SEND转染HT10 80细胞后可以有效的表达目的蛋白并能分泌到细胞外 。
- 卿志荣唐爱发蒋冬贵郑多夏昆李宜雄陈主初夏家辉
- 关键词：ENDOSTATIN肿瘤
- 2型糖尿病NEUROD1基因的研究被引量：1
- 2004年
- 47例 2型糖尿病 (均 40岁以后发病 )家系先证者PCR SSCP检测出两种NEUROD1基因变异 ;Ala45Thr和Ile15 6Ile。 12 2例 40岁以后发病的 2型糖尿病患者和 13 2例正常对照Ala45Thr基因型和基因频率分布差异无显著性 ,提示NEUROD1基因Ala45Thr突变不是中国人 2型糖尿病的重要遗传因素。
- 邓昊唐炜立胡正茂刘征蒋冬贵周智广唐北沙邓汉湘夏昆
- 关键词：2型糖尿病突变
