苏鑫铭
- 作品数：4 被引量：1H指数：1
- 供职机构：江苏省人民医院更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金中国博士后科学基金江苏省“科教兴卫工程”医学重点人才基金更多>>
- 相关领域：医药卫生更多>>
- 修饰的单链DNA寡核苷酸靶向修复低密度脂蛋白受体基因点突变
- 2007年
- 徐亚林苏鑫铭张芳林朱含章许伟伟范乐明
- 关键词：病理学与病理生理学低密度脂蛋白受体基因点突变
- CD2相关蛋白启动子调节区域的功能特征
- 目的CD2相关蛋白(CD2AP)在肾小球硬化、肾病综合症的发病中起重要作用,在几种肾小球疾病中其RNA表达有改变,在基因转录调控方面启动子对表达量起十分关键的调节作用,启动子有组织特异性,目前尚未见该分子的启动子在HEK...
- 周国平苏鑫铭任伟陆超陈吉庆吴升华陈荣华
- 文献传递
- RTP801缺氧反应性核心序列调控下血管生长因子165和成纤维细胞生长因子2的高效共表达
- 2007年
- 目的获取人血管内皮生长因子165基因和人成纤维细胞生长因子2基因,克隆基因损伤诱导转录物4基因启动子中的缺氧反应性核心序列,以含有内核糖体进入位点的单启动子双表达载体为骨架构建真核表达载体,转染人胚肾293细胞,观察在正常和缺氧下人血管内皮生长因子165和人成纤维细胞生长因子2的表达。方法利用聚合酶链反应法从小鼠基因组中获取基因损伤诱导转录物4基因启动子的缺氧反应性核心序列337bp^511bp,替换含有内核糖体进入位点的单启动子双表达载体上的巨细胞病毒增强子(150bp^390bp)。通过聚合酶链反应法获取含有人血管内皮生长因子165基因和人成纤维细胞生长因子2基因的片段,插入含有内核糖体进入位点的单启动子双表达载体中的多克隆位点中,构建重组质粒。利用生物性可降解的聚乙烯亚胺多分支树状聚合物将重组质粒体外转染人胚肾293细胞,在正常和缺氧条件下分别培养36h,Western印迹法检测细胞内血管内皮生长因子165基因和人成纤维细胞生长因子2基因的表达,酶联免疫吸附法检测细胞培养基中分泌性蛋白血管内皮生长因子165和人成纤维细胞生长因子2的表达。结果真核表达载体经聚合酶链反应和酶切分析及测序证实构建成功,Western印迹法和酶联免疫吸附法检测证实重组质粒中血管内皮生长因子165基因和人成纤维细胞生长因子2基因在基因损伤诱导转录物4基因缺氧反应性核心序列介导下在缺氧人胚肾293细胞有高效共表达。结论获取的基因损伤诱导转录物4基因的缺氧反应性核心序列在缺氧状态下有增强下游基因表达的功能,含有该增强子的真核质粒在缺氧下高效表达血管内皮生长因子165和人成纤维细胞生长因子2。
- 朱含章王志广蒋玲琳苏鑫铭张芳林徐亚林徐州陈琪范乐明
- 关键词：病理学与病理生理学成纤维细胞生长因子2
- CD2相关蛋白启动子区域保守序列的功能分析被引量：1
- 2008年
- 目的在不同物种间通过保守序列分析和荧光素酶功能测定的方法寻找发现CD2相关蛋白（CD2AP）基因启动子重要的调节成分。方法用BLAST分析软件进行序列比较和同源分析不同种系CD2AP启动子序列，构建人CD2AP启动子不同的缺失变异载体，转染来自不同种类的细胞，测定荧光素酶活性，并用全反式维甲酸处理，观测其对CD2AP启动子活性的影响。结果在人、牛、猪的CD2AP推断的启动子区域进行同源比较发现推断的Sp1（specific protein1）和下游启动子成分高度进化保守，进行性缺失荧光素酶分析表明在人胚肾细胞株HEK-293、非洲绿猴肾细胞株Vero、仓鼠肾细胞株BHK-21中人CD2AP启动子活性有相似的形式，ATG上游500bp有基本的启动子活性，再向上100bp启动子活性增加10倍，两个推断的Sp1位点位于该100bp区域内，全反式维甲酸可下调CD2AP启动子的活性。结论我们初步发现推断的Sp1位点和下游启动子成分在CD2AP启动子调控中起重要作用。
- 苏鑫铭周国平任伟陆超陈吉庆吴升华吴元俊
- 关键词：CD2相关蛋白启动子肾病综合征肾小球硬化
