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田昕: 作品数：26 被引量：186H指数：8; 供职机构：中国医科大学附属第一医院更多>>; 发文基金：辽宁省自然科学基金辽宁省教育厅高等学校科学研究项目国家自然科学基金更多>>; 相关领域：医药卫生生物学更多>>

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基质金属蛋白酶-9及血管内皮生长因子在卵巢癌组织中的表达及临床意义被引量：5: 2017年; 目的:观察卵巢癌患者基质金属蛋白酶-9(matrix metalloproteinase-9,MMP-9)和血管内皮生长因子(vascular endothelial cell growth factor,VEGF)的表达水平,分析卵巢癌MMP-9和VEGF表达的临床意义。方法:将60份卵巢癌组织作为恶性组,60例卵巢良性肿瘤组织作为良性组,将获取的60份健康卵巢组织作为健康组,应用免疫组化法检测各组卵巢组织中MMP-9、VEGF阳性表达情况,应用RT-PCR检测不同卵巢组织中MMP-9 mRNA、VEGF mRNA相对表达量,应用Western blot法检测MMP-9和VEGF的蛋白水平,同时对比不同临床病理特征的卵巢癌组织中MMP-9、VEGF表达水平。结果:恶性组MMP-9阳性率(53.33%)、强阳性率(25.00%)和VEGF阳性率(55.00%)、强阳性率(26.67%)显著高于其他组(P<0.05),良性组MMP-9阳性率(23.33%)、VEGF阳性率(26.67%)显著高于健康组(P<0.05);恶性组MMP-9 mRNA、MMP-9蛋白、VEGF mRNA、VEGF蛋白显著高于其他组,其次为良性组,三组间MMP-9和VEGF表达水平差异显著(P<0.05);卵巢癌组织不同临床分期、不同淋巴结转移者的MMP-9、VEGF表达水平具有显著差异(P<0.05),且MMP-9表达和VEGF表达具有显著正相关性(P<0.05)。结论:MMP-9、VEGF在卵巢癌中均为高表达,且二者表达强度与卵巢癌临床分期、淋巴结转移情况密切相关。; 付立业田昕李妍孟凡东蒋涛姜又红; 关键词：基质金属蛋白酶-9 血管内皮生长因子卵巢癌

自体抗原负载DC联合CIK对肾癌免疫治疗的实验研究被引量：3: 2017年; 目的:评价自体抗原负载DC联合CIK体外治疗肾癌的杀瘤活性差异,为临床上肿瘤抗原不明确的肾癌免疫治疗提供一种新的研究思路。方法:收集2010年8月至2013年1月在中国医科大学附属第一医院泌尿外科接受手术治疗的20例肾癌患者肾癌组织及其外周血,10例健康成人志愿者外周静脉血。分为无抗原DC组、自体肿瘤全细胞抗原递呈DC组、异体肿瘤细胞裂解物抗原递呈DC组,与CIK混合培养后检测杀瘤率,并用流式细胞仪分别检测DC的CIK细胞表面成熟标志,统计两者的相关性。结果:加入肿瘤裂解物抗原及诱导成熟因子后,DC表面成熟标志CD83、CD80、CD86、HLA-DR的表达明显增加。与DC共培养的CIK表面抗原CD3^+CD4^+、CD3^+CD56^+、CD3^+CD8^+均高于单独培养CIK;自体全抗原递呈的CIK-DC-自体A组与异体全抗原递呈的CIK-DC-异体A组杀瘤活性最大,两者之间无差异;未经抗原刺激的CIK-DC组次之,单纯CIK组杀瘤活性最低;四组效应细胞组间杀伤率相关性分析显示,除CIK-DC-自体A组与CIK-DC-异体A组之间差异无统计学意义外,各组间差异均显著,各组之间杀伤率比较具有正相关关系;肾癌患者外周血杀瘤活性比健康供者杀瘤活性低,有统计学意义;肾癌细胞患者自体效应细胞与异体健康效应细胞差别无统计学意义;此外,各实验组间两两比较,差异显著,有统计学意义(P<0.05)。结论:自体/异体全抗原负载可促进DC成熟,提高CIK细胞免疫表型及增殖能力,增强其对肾癌细胞的杀伤活性。; 吴迪付立业李妍张玲田昕姜又红; 关键词：肾癌树突状细胞肿瘤抗原

血清人附睾分泌蛋白4(HE4)和CA125在卵巢癌患者围手术期的变化及临床意义被引量：6: 2017年; 目的:监测卵巢癌手术前后血清人附睾分泌蛋白4(human epididymis secretory protein 4,HE4)、CA125(即糖类抗原125)的变化,分析HE4和CA125在卵巢癌诊治中的价值。方法:选取180例卵巢癌患者,根据临床分期分为早期组90例和中晚期组90例,选取90例卵巢良性疾病者作为良性组、90例健康成年女性作为对照组,在手术前后分别监测各组血清HE4和CA125表达水平,统计分析不同检测方法的诊断价值,同时随访卵巢癌患者12个月,对卵巢癌复发患者与未复发患者在手术前后的血清HE4和CA125进行统计分析。结果:血清HE4联合CA125特异度(98.89%)、阳性预测价值(99.27%)显著高于HE4单独检测及CA125单独检测,P<0.05,组间有统计差异;手术后,卵巢癌患者血清HE4、CA125显著下降(P<0.05),但是,在相同监测点,卵巢癌者血清HE4和CA125显著高于对照组和良性组(P<0.05),且中晚期组血清HE4显著高于早期组(P<0.05),良性组血清HE4、CA125略高于对照组,组间无显著差异(P>0.05);卵巢癌复发者血清HE4、CA125显著高于未复发组者,P<0.05,有统计学差异。结论:卵巢癌患者血清CA125和HE4显著异常升高,联合检测血清HE4和CA125不仅对于提高卵巢癌诊断特异性、阳性准确率具有重要价值,而且能够为预后评估提供可靠信息。; 付立业田昕李妍孟凡东蒋涛姜又红; 关键词：CA125 卵巢癌

蟾蜍灵对人食管鳞癌EC9706细胞增殖及凋亡的影响被引量：16: 2012年; 目的观察蟾蜍灵对人食管鳞癌EC9706细胞增殖及凋亡的影响,探讨其对人端粒酶逆转录酶(hTERT)核-线粒体定位的影响。方法采用不同浓度蟾蜍灵作用EC9706细胞,CCK-8法测定细胞增殖抑制并计算半数抑制浓度(IC50),PI染色流式细胞仪分析细胞周期,Hoechst 33342染色荧光显微镜观察凋亡核形态改变,Annexin V-FITC/PI双染流式细胞仪检测细胞凋亡率,Western blot法及多重免疫荧光标记激光共聚焦显微镜检测hTERT亚细胞定位及蛋白表达。结果随作用时间及浓度的增加,蟾蜍灵可显著抑制人食管鳞癌EC9706细胞的增殖(P均<0.01)。100 nmol/L蟾蜍灵作用EC9706细胞时,随着作用时间的延长,G1期细胞逐渐减少,S及G2/M期细胞显著增加(P均<0.05);细胞核发生典型的凋亡形态学改变,凋亡率逐渐增加(P<0.01)。hTERT可表达于EC9706细胞线粒体中,在蟾蜍灵诱导的凋亡过程中,细胞核hTERT的表达减少,而线粒体hTERT的表达则有所增加(P<0.05)。结论蟾蜍灵可抑制EC9706细胞增殖,诱导其凋亡,细胞周期阻滞于S及G2/M期。hTERT除细胞核外还定位于线粒体中,并在蟾蜍灵诱导的凋亡过程中由细胞核向线粒体转位。; 田昕罗颖闫永波隋承光孟凡东刘云鹏; 关键词：蟾蜍灵人端粒酶逆转录酶细胞核线粒体转位

蟾蜍灵诱导人宫颈癌C33A细胞自噬作用的机理研究被引量：4: 2019年; 目的:探讨蟾蜍灵诱导人宫颈癌C33A细胞自噬的作用。方法:不同浓度梯度的蟾蜍灵处理人宫颈癌C33A细胞,选用CCK-8法检测蟾蜍灵对人宫颈癌C33A细胞的杀伤作用。透射电镜观察给药后C33A细胞的自噬现象。流式细胞仪检测细胞内活性氧(ROS)水平,蛋白免疫印迹法检测自噬LC3蛋白表达及相关信号通路JNK、p-JNK蛋白表达。结果:蟾蜍灵对人宫颈癌C33A细胞的生长抑制作用呈时间-剂量依赖性。蟾蜍灵给药后可诱导C33A细胞发生自噬,蛋白印迹实验结果表明LC3蛋白表达随药物浓度升高而增加。蟾蜍灵诱导C33A细胞自噬发生与其促ROS水平升高激活了JNK信号通路有关。结论:蟾蜍灵诱导C33A细胞自噬的机制可能与通过ROS/JNK通路促进细胞自噬有关,以此发挥其抗肿瘤的作用。; 孔翠翠李艳兰宫鹏超田昕; 关键词：宫颈癌蟾蜍灵自噬活性氧 JNK

人皮肤成纤维细胞原代培养及增殖能力研究被引量：3: 2010年; 目的探索和建立永生化的人皮肤成纤维细胞,为皮肤成纤维细胞在临床医学上的应用提供可靠的科学依据。方法胰蛋白酶消化法分离培养人皮肤成纤维细胞;细胞生长曲线及MTT法测定细胞增殖能力;流式细胞仪测定成纤维细胞生长周期及细胞增殖指数。结果不同代次原代及冻存复苏后的人皮肤成纤维细胞增殖能力均很强。结论人皮肤成纤维细胞在增殖能力上完全可以作为体细胞基因治疗的靶细胞,而且是未来最有希望的永生化基因治疗细胞之一。; 王晓华姜又红马萍尹元琴隋承光孟凡东田昕李妍; 关键词：成纤维细胞细胞增殖指数永生化

shRNA干扰mTOR信号途径对口腔癌细胞的生物学影响: 2014年; 目的:探讨利用慢病毒介导shRNA干扰mT OR信号途径,对口腔腺样囊性癌细胞生物学的影响。方法:shRNA干扰mT OR、雷帕霉素处理口腔癌ACCM细胞株,CCK-8法检测各组细胞的增殖情况,流式细胞仪检测各组细胞的凋亡率,Western blot法检测mT OR和Bcl-2蛋白的表达水平,real time PCR检测mT OR mRNA和Bcl-2 mRNA的表达水平。结果:细胞增殖情况,各不同刺激因素组与单纯ACCM细胞组比较增殖率降低(P<0.05)。不同刺激因素组细胞的凋亡率与单纯ACCM细胞组相比较,细胞凋亡率增高(P<0.05)。mT OR和Bcl-2的表达水平,雷帕霉素组和shRNA干扰mT OR组均低于单纯ACCM组(P<0.05)。结论:慢病毒介导的shRNA干扰信号途径,可影响口腔癌细胞的增殖,诱导细胞的凋亡,抑制了抗凋亡基因Bcl-2的表达,为肿瘤的靶向治疗提供了理论依据。; 潘洪飞任大鹏孟凡东田昕李妍; 关键词：腺样囊性癌雷帕霉素 MTOR

人肝癌细胞中纯化的HSP70的免疫活性研究: 2011年; 目的用改良的方法提取纯化人肝癌细胞中的HSP70,通过观察其对DC瘤苗的体外活化,证实其免疫活性。方法利用两步超滤及离子交换层析提纯HSP70,体外致敏外周血单核细胞来源的DC,检测DC表面成熟标志的变化。再将此DC与T细胞共培养,用CCK-8试剂盒检测其对HSP70同源及非同源肿瘤的杀瘤活性。结果用这种改良的简便快捷的HSP70生化提纯方法可获得与其他常被采用方法相似得率的目的蛋白,用其体外致敏DC可使其高表达CD80、CD83、CD86及HLA-DR等成熟标志。用此DC与T细胞体外共培养后,具有较高的对HSP70同源肿瘤的特异性杀伤活性。结论用此改良的提纯方法,可获得具有免疫活性的HSP70,在体外具有很好的活化DC瘤苗的能力。; 孟凡东隋承光田昕李妍王晓华马萍姜又红刘云鹏; 关键词：热休克蛋白70 树突状细胞肿瘤疫苗人肝癌细胞

CUL4A促进人胃癌细胞增殖、侵袭和转移的机制被引量：1: 2018年; 目的:探讨CUL4A基因在胃癌增殖、侵袭和转移中的机制。方法:siRNA干扰胃癌SCG-7901细胞中CUL4A基因的表达;CCK-8法检测各组细胞的增殖情况;Transwell小室观察各组细胞的侵袭能力;Annexin-V-FITC/PI法检测各组细胞的凋亡情况,分析CUL4A对细胞凋亡的影响;Real time-PCR分析上皮间质转化(EMT)相关基因的表达情况。结果:siRNA有效干扰了胃癌SCG-7901细胞中CUL4A基因的表达(P<0.05);干扰CUL4A基因有效抑制了胃癌细胞的增殖(P<0.05);Transwell小室结果显示,干扰CUL4A基因阻碍了SCG-7901细胞的侵袭能力(P<0.05);细胞凋亡结果显示,干扰CUL4A基因促进了细胞的凋亡(P<0.05);Real time-PCR结果显示,干扰CUL4A基因后Snail mRNA和ZEB1 mRNA的表达降低(P<0.05),E-cadherin mRNA的表达升高(P<0.05)。结论 :CUL4 A基因促进胃癌细胞的增殖,抑制凋亡和侵袭,且影响了EMT相关基因的表达。; 李妍田昕孟凡东隋承光吴迪付立业姜又红; 关键词：胃癌 SNAIL E-CADHERIN

蟾蜍灵诱导HL-60细胞凋亡过程中对Bcl-2、Survivin、Smac/DIABLO表达的影响被引量：35: 2006年; 目的研究蟾蜍灵在诱导HL-60细胞凋亡过程中,对线粒体凋亡途径相关基因Bcl-2、 Bax、Survivin及Smac/DIABLO表达的影响。方法采用锥虫蓝拒染法检测细胞存活情况,细胞形态学观察及流式细胞术检测细胞凋亡,Western blot分析Bcl-2、Bax、Smac/DIABLO、Survivin及caspase-3蛋白表达,RT-PCR检测Survivin mRNA表达。结果蟾蜍灵抑制HL-60细胞增殖,24,48及72 h的IC50 值分别为25．8,8．0及2．1 nmoL/L。蟾蜍灵大于50．0 nmol/L时可明显诱导HL-60细胞凋亡。50．0 nmol/L蟾蜍灵作用6,12,24及48 h,Bcl-2蛋白表达分别下调至作用前的88．6％,53．3％,19．2％及 9．5％,而Bax蛋白表达无明显变化,Bcl-2/Bax比值由2．0分别降至1．7,1．1,0．4及0．2。Survivin蛋白表达分别下调至作用前的75．2％,54．8％,37．5％及20．3％;Survivin mRNA表达在作用6,12和24 h 后分别下调至作用前的85．7％,39．4％和12．5％,在作用48 h后几乎检测不到。50．0 nmol/L蟾蜍灵作用12,24及48 h,线粒体部分的Smac/DIABLO蛋白表达分别下调至作用前的77．5％,21．2％及 15．3％,而胞浆部分的Smac/DIABLO蛋白表达分别上调至作用前的1．4,2．0．及3．5倍。蟾蜍灵作用 8-48 h可检测到caspase-3的活化亚基。结论蟾蜍灵诱导的HL-60细胞凋亡与Bcl-2及Survivin表达下调、线粒体释放Smac/DIABLO及caspase-3活化有关。; 田昕罗颖刘云鹏侯科佐金波张敬东王甦; 关键词：蟾蜍灵基因,BCL-2 细胞凋亡

田昕

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