魏旺丽
- 作品数:7 被引量:15H指数:2
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- siRNA干扰下调DJ-1的表达对人支气管上皮细胞生物学行为的影响
- 2022年
- 目的探讨DJ-1表达下调对人支气管上皮细胞(HBE细胞)生物学行为的影响。方法构建DJ-1基因siRNA慢病毒载体,感染HBE细胞(DJ-1 siRNA组),并设置Control siRNA慢病毒载体对照(Control siRNA组)及空白对照(BC组),分别采用流式细胞术检测各周期细胞,四甲基偶氮唑盐(MTT)比色法检测细胞增殖情况,克隆形成试验检测细胞克隆情况,Transwell小室试验检测细胞迁移情况。结果DJ-1 siRNA组G_(1)期细胞比例高于BC组、Control siRNA组,S期、G_(2)期细胞比例低于BC组、Control siRNA组,差异有统计学意义(P<0.05)。与Control siRNA组和BC组比较,DJ-1 siRNA组在接种后24、48、72、96 h的吸光度值明显降低,差异有统计学意义(P<0.05);DJ-1 siRNA组在接种后48、72、96 h的增殖抑制率分别是36.9%、60.8%和37.6%。DJ-1 siRNA组的克隆数、迁移细胞数明显少于Control siRNA组与BC组,差异有统计学意义(P<0.05)。结论下调DJ-1的表达具有抑制HBE细胞分裂、增殖、迁移和侵袭的作用。
- 魏旺丽谭潭崔亚娟刘国栋
- 关键词:DJ-1人支气管上皮细胞细胞迁移
- DJ-1基因在肺癌中的作用及其相互作用蛋白质分析
- 目的:为了阐明DJ-1蛋白在肺癌中的作用及寻找其相互作用蛋白,采用RNA干扰技术下调DJ-1基因在肺鳞癌细胞SK-MES-1和HTB-182中的表达,分析DJ-1表达下调对SK-MES-1和HTB-182细胞生物学行为的...
- 魏旺丽
- 关键词:肺癌DJ-1细胞周期相互作用蛋白
- 文献传递
- 慢性咳嗽变异性哮喘患者外周血单个核细胞中STAT1,IRF1蛋白水平与临床急性发作的相关性分析被引量:6
- 2022年
- 目的 探讨慢性咳嗽变异性哮喘患者外周血单个核细胞信号转导子和转录激活子-1(signal transducer and activator of transcription-1,STAT1)和干扰素调节因子-1(interferon regulatory factor 1,IRF1)蛋白水平与临床急性发作的相关性。方法 收集2018年8月~2020年3月郴州市第一人民医院收治的52例慢性咳嗽变异性哮喘急性发作患者纳入观察组。同期慢性咳嗽变异性哮喘非急性发作患者52例纳入对照组。采用蛋白质免疫印迹(western Blot,WB)法检测STAT1和IRF1蛋白表达,分析其与慢性咳嗽变异性哮喘急性发作的关系。结果 观察组STAT1(1.28±0.37),IRF1(1.17±0.35)均高于对照组(1.05±0.27, 0.81±0.25),差异有统计学意义(t=3.321,6.036,均P <0.05);经双变量Pearson直线相关检验,慢性咳嗽变异性哮喘患者STAT1与IRF1蛋白表达呈正相关(r=0.322,P <0.001);经Logistic回归分析,STAT1和IRF1蛋白过表达可能是诱发慢性咳嗽变异性哮喘急性发作的影响因素(OR> 1,P<0.001);绘制ROC曲线发现,STAT1,IRF1蛋白表达及两指标联合评估慢性咳嗽变异性哮喘急性发作的AUC均> 0.85,具有一定预测价值,其中联合检测预测价值最高。结论 慢性咳嗽变异性哮喘急性发作患者STAT1和IRF1呈高表达,其水平越高则患者急性发作风险越高,可作为以急性发作预测的有效指标。
- 李娜黄友军李志超魏旺丽张林
- 关键词:干扰素调节因子-1
- DJ-1基因在肺癌中的作用及其相互作用蛋白分析
- 目的:为了阐明DJ-1蛋白在肺癌中的作用及寻找其相互作用蛋白,采用RNA干扰技术下调DJ-1基因在肺鳞癌细胞SK-MES-1和HTB-182中的表达,分析DJ-1表达下调对SK-MES-1和HTB-182细胞生物学行为的...
- 魏旺丽
- 关键词:肺腺肿瘤细胞增殖蛋白表达病理细胞学
- 文献传递
- 采用串联亲和纯化质谱分析DJ-1的相互作用蛋白
- 2021年
- 目的采用RNA干扰技术下调DJ-1基因在肺鳞癌细胞HTB-182中的表达,采用串联亲和纯化质谱(TAP-MS)技术寻找DJ-1在HTB-182细胞系中的相互作用蛋白。方法构建靶向DJ-1基因siRNA慢病毒载体,感染HTB-182细胞(DJ-1 siRNA组),并设立慢病毒载体对照组(Control siRNA组)及空白对照组,采用Western blot法检测DJ-1蛋白表达水平,建立内源性的DJ-1蛋白表达沉默的si-DJ-1-HTB-182细胞。设计DJ-1的特异性引物,构建带有链霉素结合肽标签(SBP)、钙调蛋白结合肽标签(CBP)的DJ-1表达质粒pNTAP-DJ-1,用脂质体稳定转染细胞系DJ-1 siRNA HTB-182,G418筛选阳性克隆,Western blot进行验证,TAP-MS技术寻找DJ-1的相互作用蛋白。结果DJ-1 siRNA干扰组中DJ-1的蛋白质表达明显低于空质粒(NC)组和空白对照(BC)组(P<0.05);成功构建了稳定表达pNTAP-DJ-1质粒的HTB-182细胞系;TAP-MS筛选到DJ-1相互作用的三个蛋白质:细胞角蛋白1(Keratin 1)、细胞角蛋白10(Keratin 10)和NADPH氧化酶活化蛋白P47(P47 Px)。结论Keratin 1、Keratin 10和P47 Px可能是DJ-1蛋白的相互作用蛋白。
- 魏旺丽谭潭崔亚娟汤参娥
- 关键词:相互作用蛋白
- DJ-1基因的研究进展被引量:2
- 2013年
- 广泛存在于真核及原核生物的DJ-1基因,或称Park7基因,最常见于常染色体隐性遗传性帕金森病(PD),其致病机制还不完全清楚。研究发现DJ-1在很多癌组织细胞中表达上调,是一个癌基因。DJ-1基因中的半胱氨酸残基106参与DJ-1很多重要功能的调节,例如氧化应激修饰。本文从OJ-1的组织分布、结构生物学、功能与机制、与肿瘤的关系等几个方面进行了阐述。
- 魏旺丽李萃詹显全
- 关键词:基因遗传学
- siRNA抑制DJ-1基因表达对肺鳞癌SK-MES-1细胞生物学行为的影响被引量:7
- 2013年
- 目的:采用RNA干扰技术下调DJ-1基因在肺鳞癌细胞SK-MES-1中的表达,探讨DJ-1表达下调对SK-MES-1细胞生物学行为的影响,以期探讨DJ-1基因的功能。方法:构建靶向DJ-1基因siRNA慢病毒载体(重组慢病毒中有绿色荧光蛋白真核表达框),感染SK-MES-1细胞(DJ-1siRNA组),并设立慢病毒载体对照组(Control-siRNA组)及空白对照组。荧光显微镜下观察并计算感染效率,Western印迹检测各组细胞中DJ-1蛋白表达水平,M法检测细胞增殖能力,流式细胞术测定细胞周期,Transwell小室实验检测细胞体外迁移侵袭能力。结果:与Control-siRNA组及空白对照组比较,DJ-1 siRNA组的DJ-1蛋白表达受到抑制、细胞增殖能力明显减弱(P<0.01)、G1/G2期细胞数增多和S期细胞数减少表明细胞周期受阻、细胞体外迁移和侵袭能力显著减弱(P<0.01)。结论:DJ-1基因具有促进肺鳞癌细胞SK-MES-1细胞的增殖和体外迁移侵袭的作用。
- 魏旺丽汤参娥詹显全易红李萃
- 关键词:DJ-1SIRNA细胞迁移