陶永辉
- 作品数：12 被引量：24H指数：3
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- 人酸性铁蛋白H亚基固相免疫放射分析被引量：3
- 1996年
- 从人心肌组织纯化酸性铁蛋白（ＡＩＦ），免疫家兔产生的ＡＩＦ血清用ＡＩＦ偶联的亲和层析柱纯化，将抗ＡＩＦ免疫球蛋白制成固相。１２５Ⅰ－抗ＡＩＦ－Ｈ亚基单克隆抗体用氯胺－Ｔ法制备；采用顺序法建立ＡＩＦ－Ｈ亚基因相免疫放射分析，数据用自动拟合样条函数处理，批内和批间ＣＶ分别为２．４４３％和１０．１６０％，灵敏度为０．７３６μｇ／Ｌ，回收率为９２．２９３％，可测范围为１．４７２－３２０μｇ／Ｌ，ＥＤ５０为２３．０５μｇ／Ｌ。与ＡＦＰ、ＣＥＡ和乳铁蛋白（ＬＦ）无交叉反应，与铁蛋白有３．１２５％的交叉反应。健全性试验证明血清基质对本方法无干扰。４０例男女血清ＡＩＦ－Ｈ亚基含量分别为３．７５±１．８５和２．９２±０．９６μｇ／Ｌ（Ｓ±２Ｓ），１０例肝癌患者血清ＡＩＦ—Ｈ亚基含量为８．３９±３．８７μｇ／Ｌ（Ｓ±２Ｓ），显著高于正常参考值。本方法可为肿瘤，尤其是肝癌的基础和临床研究提供一种有效的手段。
- 张莲芬金坚陶永辉王博诚黄飙
- 关键词：酸性铁蛋白放射免疫分析肝癌
- 利凡诺去白蛋白人血浆再利用的实验研究Ⅱ.抗凝血酶Ⅲ和蛋白C抑制物的纯化与鉴定
- 2001年
- 目的综合再利用利凡诺去白蛋白人血浆进行抗凝血成分抗凝血酶Ⅲ (AT Ⅲ )和蛋白C抑制物 (PCI)的分离纯化。方法以钡盐吸附上清为原料 ,采用铝盐吸附、有机沉淀、离子交换层析、分子筛层析、亲和层析和制备性等电聚焦等技术从利凡诺去白蛋白人血浆中分别纯化AT Ⅲ和PCI。结果从利凡诺去白蛋白人血浆 10L中得到了AT Ⅲ 16 0mg和PCI4.2mg ,得率分别为 12 .7%和 10 .5 % ,其相对分子量分别为 (5 7± 0 .8)和 (5 6± 0 .8)kD ;等电点分别为 4.81± 0 .0 2和 8.0 1± 0 .0 2 ;分别富含Glu、Asp、Leu和Glu、Leu、Asp ;毛细管区带电泳分析高度均一 ;与文献报道基本一致。结论该纯化路线经济、简便 。
- 张荣军陶永辉金坚张莲芬张满达阮长耿
- 关键词：利凡诺白蛋白血浆纯化
- 利凡诺去白蛋白人血浆再利用的实验研究Ⅰ.蛋白C和蛋白S的纯化与鉴定被引量：2
- 2001年
- 目的综合再利用利凡诺去白蛋白人血浆进行抗凝血成分蛋白C(PC)和蛋白S(PS)的分离纯化。方法采用钡盐吸附、分段盐析、亲和层析和制备性等电聚焦等技术从利凡诺去白蛋白人血浆中分别纯化PC和PS。结果所得PC和PS的相对分子量分别为 (6 1± 0 .9)、(83± 0 .8)kD ;等电点分别为 4.70± 0 .0 3、5 .2 0± 0 .0 3;分别富含Glu、Leu、Gly和Asp、Glu、Leu ;毛细管区带电泳分析高度均一 ;与文献报道基本一致 ;得率分别为 2 8.3%和 12 .6 %。结论该纯化路线省时、经济 ,有助于利凡诺去白蛋白人血浆的综合再利用和抗凝血成分输血制剂的研制和开发。
- 陶永辉金坚王博诚张满达阮长耿
- 关键词：蛋白C蛋白S利凡诺白蛋白血浆
- 正常和肝损害模型ASGP受体实验研究被引量：5
- 2001年
- 目的 通过对肝细胞去唾液酸糖蛋白受体 (ASGPR)功能的体内外分析来区别正常肼脏与慢性肝脏损害。方法 采用吸入CCl4 法建立慢性肝损害大鼠模型 ,用流式细胞仪 (FCM)技术异硫氰酸荧光素 新半乳糖人血清白蛋白 (FITC NGA)进行体外受体分析。SnCl2 还原法制备99Tcm NGA ,进行小鼠体内分布和正常及慢性肝损害模型大鼠ASGP受体显像研究。结果 FITC NGA结合的荧光道数值随肝损害程度的增加而降低。99Tcm NGA能迅速被肝脏摄取 ,其它脏器摄取均较低 ,肠道放射性随时间增加而增加。99Tcm NGA受体动态显像结果表明正常大鼠血本底清除快 ,注射 5min后肝脏显影清晰 ,而肝损害模型大鼠血本底清除较慢 ,注射 5min后 ,心、肺影仍存在 ,肝脏轮廓不清晰。简单动态分析显示 ,正常及肝损害模型大鼠心脏及肝脏的时间 放射性曲线差别较明显。“清除指数”HH15分别为 0 6 75± 0 10 6和 0 6 96± 0 10 3:“受体指数”LHL15分别为 0 980± 0 0 10和 0 949±0 0 2 5。结论 体外FCM分析可从细胞水平反映正常及损伤肝细胞ASGPR数量的变化。99Tcm NGA肝受体动态显像可反映肝细胞受体功能 ,而LHL15可较好反映肝细胞受体数量。
- 张荣军万卫星陶永辉王铁生肖志坚蔡刚明张莲芬金坚王博诚
- 关键词：肝损害
- 应用^(99m)Tc-NGA进行肝ASGP受体显像的实验研究被引量：5
- 1999年
- 新半乳糖人血清白蛋白（ＮＧＡ）是肝细胞表面去唾液酸糖蛋白受体（ＡＳＧＰＲ）的特异性配基。根据受体与配基结合的原理，报道了以９９ｍＴｃ标记的ＮＧＡ与人血清白蛋白（ＨＳＡ）在正常兔中显像行为的对比。结果表明９９ｍＴｃ－ＨＳＡ呈现血池显像剂的行为，而９９ｍＴｃ－ＮＧＡ则呈现肝脏受体显像剂的行为，并且若兔事先用１００倍量未标记的ＮＧＡ将肝脏受体饱和后，再用９９ｍＴｃ－ＮＧＡ显像则呈现与９９ｍＴｃ－ＨＳＡ相似的显像结果。以异硫氰酸荧光素标记的ＮＧＡ（ＦＩＴＣ－ＮＧＡ）进行流式细胞分析（ＦＣＭ）也表明，ＡＳＧＰＲ具有明显可饱和性。由此进一步表明９９ｍＴｃ－ＮＧＡ是ＡＳＧＰ受体显像，而非胶体显像；且具有饱和性．
- 陶永辉张荣军胡名扬万卫星谭成张莲芬蔡刚明王博诚金坚
- 关键词：显像细胞分析
- 蛋白S放射免疫分析
- 1997年
- 蛋白Ｓ放射免疫分析王博诚金坚陶永辉张荣军血浆中的蛋白Ｓ（ＰＳ）有两种形式，游离ＰＳ（ＦＰＳ）及与补体第一途径的调节蛋白Ｃ４ｂ结合蛋白（Ｃ４ｂＰ）结合的ＰＳ（ＢＰＳ）。ＦＰＳ参与抗凝〔１〕，ＢＰＳ则参与补体系统激活的调控〔２〕。ＰＳ家族性缺乏已查明为常...
- 王博诚金坚陶永辉张荣军
- 关键词：蛋白S放射免疫
- 人尿红细胞生成素和血栓调节素的纯化研究被引量：1
- 2001年
- 目的从人尿中分离纯化红细胞生成素 (EPO)和血栓调节素 (TM )。方法用超滤浓缩、离子交换层析及亲和层析等方法从新鲜人尿中分别纯化EPO和TM。结果从 2 0 0 0kg新鲜人尿中分别纯化得到了 4.47mgEPO和 9.92mgTM ,得率分别为 31.9%和 2 5 .0 % ,分子量分别为 (38.6± 1.0 )kD和 (6 0± 1.4)kD ;等电点分别为3.6 0± 0 .0 2和 3 .70± 0 .0 2 ;TM富含Glu、Ala和Gly ,毛细管区带电泳分析高度均一 ,有关生化参数与文献报道基本一致。结论该工艺可获得纯度较高的EPO和TM。
- 陶永辉金坚张荣军何扬张满达阮长耿
- 关键词：红细胞生成素血栓调节素
- 酸性铁蛋白放免分析中抗体纯化的可行性被引量：1
- 1996年
- 用改进的工艺自人心肌组织中提取的高纯度酸性铁蛋白（ＡＩＦ），与经溴化氰（ＢｒＣＮ）活化的ＳｅｐｈａｒｏｓｅＣＬ－６Ｂ偶联，制得ＡＩＦ－ＳｅｐｈａｒｏｓｅＣＬ－６Ｂ亲和层析柱。用经该柱纯化的兔抗ＡＩＦ抗血清来组建酸性铁蛋白放免分析法（ＡＩＦＲＩＡ）用四参数Ｌｏｇｉｓｔｉｃ数据处理程序处理数据。批内、批间ＣＶ分别为１．６５％和９．７１％，灵敏度为１．８９μｇ／ｌ，回收率为１０２％，可测范围为７．０—３６９．６μｇ／ｌ，ＥＤ５０为２７．５０μｇ／ｌ，与ＡＦＰ、ＣＥＡ、ＬＦ无交叉反应，同常规铁蛋白的交叉反应率为１．７４％。对照组男、女性各３０例，血清ＡＩＦ含量（ｘ±２ｓ）分别为１６．７６±６．９８μｇ／ｌ和１３．３２±６．２５μｇ／１，差异不显著（Ｐ＜０．０５）。１０例肝癌患者血清ＡＩＦ含量为３６．０９±１５．８４μｇ／ｌ，较对照组有非常显著的增高（Ｐ＜０．００１）。上述结果提示，用亲和层析技术纯化ＡＩＦ抗血清是可行的，有利于提高ＲＩＡ的灵敏度、特异性、准确性及临床有效性。
- 李文新王桂莲黄飙张蓬芬陶永辉金坚
- 关键词：酸性铁蛋白放射免疫分析肝癌
- 人胶质纤维酸性蛋白和神经微丝各别纯化
- 1995年
- 细胞骨架的共同基本模型是以种属和组织的特异形式表达的。其核心结构蛋白中间丝是高度保守的，胶质纤维酸性蛋白和神经微丝是神经系统中的中间丝成份，它们在肿瘤组织来源的鉴别中有特殊价值。本文报道了从尸检人脑中各别纯化胶质纤维酸性蛋白和神经微丝的工艺流程，经匀浆、抽提人脑组织后，用ＤＥ５２层析、羟基磷灰石层析，收集经电泳证实的洗脱部分，以分子量、等电点等生化指标鉴定为胶质纤维酸性蛋白和神经微丝。该工艺得率较高。一次可得两个产品，纯度符合免疫组化抗原的要求，并可对分离工艺中降解产物进行纯化。
- 孙钧铭金坚陶永辉管玲
- 关键词：酸性蛋白神经微丝纯化
- CA_(125)时间分辨荧光免疫分析被引量：3
- 2001年
- 以CA12 5单克隆抗体固相包被 ,用平衡饱和法与CA12 5、Eu3+标异硫氰酸苄基二乙烯三胺四乙酸 -CA12 5单抗形成三层夹心 ,以 β -二酮体为增强液 ,建立CA12 5的时间分辨荧光免疫分析法。数据采用Logit-Log函数和四参数Logistic函数数据处理程序处理。方法的批内和批间CV分别为 4 .5%和 4 .0 % ,平均回收率 96.7% ,灵敏度 3.3μg L ,可测范围为 16— 2 0 62 μg L。本法与CEA无交叉 ,与AFP有 4 .6%交叉 ,与 β -HCG有 12 .4 %交叉。测定结果与进口IRMA试剂盒相比较 ,相关系数为 0 .999,结果呈高度相关。
- 蔡刚明黄飚朱利国肖华龙谭成陶永辉金坚
- 关键词：CA125时间分辨荧光免疫分析糖类抗原卵巢上皮癌IRMA
