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TRAP分子标记在棉花海陆渐渗杂交后代选择中的应用研究被引量：2: 2009年; 利用与棉花纤维伸长相关和纤维细胞次生壁发育相关的基因设计了9条固定引物,与42条随机引物组合形成378对引物。从中筛选出亲本间有显著差异长绒棉共显性TRAP(目标区域扩增多态性)标记12个。用这12个标记对4个海陆杂交组合、每组合40个BC1单株的后代进行了鉴定,用3个标记对另7个海陆杂交组合、每组合40个BC1单株的后代进行了鉴定,发现分离是普遍存在的,在所有检测的BC1代中,平均分离比例接近50%。显示这些长绒棉共显性的标记可以广泛的用于任意海陆杂交或渐渗杂交后代是否携带与标记相关海岛棉基因的选择,不只针对特殊的亲本和一对杂交亲本的分离群体。为实现TRAP分子标记辅助育种与棉花品质性状的遗传改良奠定了基础。; 范玲王冬梅师维军马盾王娟吕萌李建平秦超袁辉; 关键词：海岛棉分子标记

棉花纤维特异表达GhCesA4启动子的克隆及序列分析: 2009年; 以新疆陆地棉品种新陆早19的DNA为模板,克隆了棉花纤维特异启动子GhCesA4,GenBank登录号:EU183119,将启动子基因序列克隆到pMD19-T载体中,由载体通用引物M13-47、RV-M经PCR鉴定获得pMD19-T/GhCesA4重组载体。测序和序列分析表明,该启动子序列由1503 bp核苷酸组成,与GenBank中GhCesA4基因启动子序列同源性高达98%。分别用限制性内切酶ClaⅠ和BamHⅠ双酶切重组质粒pMD19-T/GhCesA4和双元植物表达载体pBI121,分别回收pMD19-T/GhCesA4重组质粒中的GhCesA4小片段和pBI121植物表达载体中缺失Ca MV35S组成型启动子的大片段,经连接、转化、酶切及测序鉴定,获得由GhCesA4驱动报告基因GUS的新型植物表达载体,命名为pBI-GhCesA4。; 袁辉罗淑萍张雨良马德英; 关键词：棉花克隆

通过功能基因相对表达量鉴别棉花纤维品质的方法: 本发明提供了1项通过功能基因相对表达量鉴别棉花纤维品质的方法，该方法基于功能基因GhCAD6与棉花纤维次生壁发育同步、并且与棉花纤维品质间负相关的理论基础，在开花后15天采集待检测育种材料发育中的纤维样品，通过RT-PC...; 范玲袁辉倪志勇王冬梅师维军胡文冉马盾吾买尔江马君周小云; 文献传递

棉花纤维发育相关功能基因相对表达量和品质关系的研究: 棉花是世界上最重要的天然纤维作物，我国是重要的产棉大国和纺织品出口国，棉花在我国国民经济中占有重要的地位。作为工业原料作物，一个优良的棉花品种，不仅要产量高，而且纤维品质要好，方能实现其最终产品价值。因此，纤维的产量和品...; 袁辉; 关键词：棉花棉纤维品质功能基因实时荧光定量RT-PCR 基因工程; 文献传递

新疆盐生植物猪毛菜逆向运输蛋白基因SaNHX1 3’-RACE的克隆及序列分析被引量：5: 2008年; 以新疆盐生植物猪毛菜(Salsola collina Pall.)为材料提取总RNA,根据NHX1家族同源序列保守区设计1对简并引物,进行RT-PCR扩增,得到猪毛菜逆向运输蛋白基因cDNA中间一段619 bp序列。再用快速扩增cDNA 3’末端(3’RACE)方法,得到约1 000 bp 3’末端序列。将两段序列进行拼接,得到猪毛菜长为1 585bp(Gen Bank登陆号为EU072932)的逆向运输蛋白基因(SaNHX1)cDNA序列,编码370个氨基酸,其编码序列、氨基酸序列与同科耐盐植物盐角草相应序列同源性为85%和87%,研究为进一步克隆猪毛菜NHX1全基因序列和研究其功能打下基础。; 张雨良罗淑萍杨峰山魏岩袁辉郭长奎; 关键词：猪毛菜克隆

不同量化RT-PCR的方法在棉花纤维GhCAD基因表达中的研究被引量：3: 2009年; 以陆地棉（Gossypium hirsutum L．）高代品系CJ01在开花后5、10、15、20、25d（DPA）共5个不同发育时期的棉花纤维为材料，分别利用常规半定量RT-PCR法、Quantum RNA^TM 18S内标相对定量法以及实时荧光定量RT-PCR法，对棉花肉桂醇脱氢酶（GhCAD）基因在棉花纤维不同发育时期中的表达进行相对定量分析，并测定了内标表达的稳定性。结果表明，3种方法获得相似的结果，GhCAD基因在5～15DPA时表达量较低，20、25DPA时表达量升高。3种方法虽各有利弊，但均为研究基因量化表达的有力工具。; 袁辉胡文冉倪志勇王冬梅范玲; 关键词：陆地棉棉纤维

一个通过相对表达量鉴别棉花纤维品质的基因及其应用: 本发明提供了1个表达量与棉花纤维次生壁发育同步、并且与棉花纤维品质密切相关的功能基因GhCAD6，并通过RT－PCR相对定量法将该基因在棉花纤维发育时期的相对表达量来鉴别陆地棉发育中的纤维品质。其特征在于在开花后的第15...; 范玲袁辉倪志勇王冬梅师维军胡文冉马盾吾买尔江马君周小云; 文献传递

新疆盐生植物车前PmNHX1基因的克隆及生物信息学分析被引量：33: 2009年; 盐分对植物的伤害主要是Na＋引起的，而Na＋／H＋逆向运输蛋白催化Na＋／H＋逆向跨膜运输，从而使质膜上Na＋运出细胞和液泡膜中的Na＋区隔化。这是植物尤其是盐生植物抵御盐胁迫的主要方式之一。根据不同植物编码液泡膜逆向运输蛋白基因的保守序列，设计简并引物，采用RT—PCR和RACE技术，首次从新疆盐生植物车前（Plantagomaritima）中克隆到Na＋／H＋逆向运输蛋白基因的cDNA全长2464bp，命名为PmNHXl（GenBank登录号：EU233808），该基因编码区长为l662bp，编码553个氨基酸，理论分子量为61．16kDa，等电点为7．22。数据分析结果显示，该蛋白质主要定位于液泡膜上，由12个序列保守的跨膜结构域组成，其中TM3跨膜结构域上存在“LFFIYLLPPI”一氨氯吡嗪咪结合域，并且该位点与Na＋有竞争作用。PmNHX1逆向运输蛋白与其他植物逆向运输蛋白的氨基酸同源性为64％～80％。通过生物信息学方法对其理化性质和功能分析进行预测，这为进一步研究转耐盐基因PmNHX1及其功能鉴定奠定了基础。; 张雨良张智俊杨峰山Mahes Khulye袁辉罗淑萍; 关键词：基因克隆生物信息学

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袁辉