崔羽 作品数:13 被引量:14 H指数:3 供职机构: 海南大学 更多>> 发文基金: “十一五”国家科技支撑计划 海南省自然科学基金 黑龙江省科技计划项目 更多>> 相关领域: 农业科学 生物学 医药卫生 更多>>
兽医免疫学开展课程思政的实践探索 被引量:2 2022年 课程思政是当前高等教育中必不可少的组成部分,是国家高度重视的教育环节。在专业技能学习过程中引入思政教育有助于培养德才兼备的优秀大学生,完成全方位育人的教育目标。介绍了在动物医学专业基础课程兽医免疫学的教学过程中引入课程思政的实践探索过程。通过修订教学大纲、优选思政内容、完善教案等方式确立课程思政在课程讲授中的重要地位,通过建立思政教学团队、改革教学方法在授课过程中进行实践探索。分析兽医免疫学课程自身的特点,调整现有教学方法,结合当前动物疫病防治的时代背景,将典型思政案例与专业知识要点有机结合便于课程思政的有效开展,肩负起为我国社会主义现代化建设培养所需人才的重要使命。 冉旭华 崔羽 李天森 闻晓波关键词:教学模式 猪精氨酸-丝氨酸蛋白激酶1(SRPK1)克隆表达及功能初步分析 被引量:3 2010年 本研究旨在阐明猪SRPK1基因的分子特点和表达谱。以大白猪为研究对象,利用RT-PCR技术克隆SRPK1基因CDS区域,同时利用反向PCR(inverse PCR,I-PCR)技术得到猪部分SRPK1的5′UTR序列;利用生物信息学方法分析SRPK1基因核苷酸序列及编码蛋白序列的结构特点;利用荧光定量PCR(real-time PCR)检测SRPK1在1和30日龄大白猪及杜洛克的心脏、肌肉、脾脏、肝脏、肾脏、肺脏、胃、小肠、大肠、脑的表达情况;构建猪骨骼肌损伤模型,研究在骨骼肌发育过程中SRPK1基因的表达特性。结果,将克隆片段拼接得到长2499bp的大白猪SRPK1基因序列,包含了1968bp完整CDS区域,分析表明其编码含656个氨基酸的蛋白质;包括2个P_Kc结构域,猪SRPK1蛋白序列与人和黑猩猩的相似性较高。通过生物信息学方法预测所得5′UTR含有多个转录结合位点:HSF1、HSF2、Ik-1、IK-2、SRY、SP1MyoD、USF、E47、p300、CP2、RREB-1、E2F和AP-1。利用荧光定量PCR研究发现,表达结果显示猪该基因表达具有组织和种间特异性,主要都是在胃、大肠和小肠中表达。SR-PK1基因在整个损伤修复过程中的表达反复出现升高和降低。5′UTR处有多个和肌肉生长相关蛋白的转录结合位点,主要在消化系统组织表达,在骨骼肌修复中表达上调,推测其可能与骨骼肌细胞发育或其他肌肉生长相关因子的表达有关。 俄广鑫 刘娣 张冬杰 杨秀琴 崔羽 祝继原 杨少成 王嘉博 谢宇彤关键词:实时荧光定量PCR 反向PCR 生物信息学分析 人神经营养素-4基因的克隆及表达 2006年 目的通过基因工程的方法扩增人神经营养素-4(hNT-4)cDNA,在大肠杆菌中表达hNT-4,为研究hNT-4的生物学作用提供材料。方法以人胎脑RNA为模板,采用RT-PCR技术扩增hNT-4 cDNA,将其插入的质粒pGEM-T中。将经过序列分析确定的hNT-4 cDNA插入原核表达载体pGEX-6p-1中,构建重组表达载体pGEX-6p-1-NT-4,用SDS-PAGE法测定融合蛋白在大肠杆菌中的表达。结果经序列测定分析,克隆的hNT-4 cDNA核苷酸序列与已发表序列(GenBank,M86528)完全一致,并获得了高效表达hNT-4的重组菌株。结论体外成功扩增hNT-4 cDNA,并在原核细胞中高效表达了hNT-4。 崔羽 常洪起 路明霞 李景鹏 周文婷 阳燕 王立达关键词:基因克隆 原核表达 猪精氨酸-丝氨酸蛋白激酸3(SRPK3)基因的克隆、表达及多态性分析(英文) 被引量:1 2011年 通过对猪SRPK3基因初步的研究,为猪分子遗传育种提供基础分子生物学信息,为猪的遗传育种提供分子标记。以大白猪为实验材料,采用RT-PCR方法克隆了精氨酸-丝氨酸蛋白激酶3(serine/arginine-rich specific kinase 3,SRPK3)的全长基因CDS区;采用生物信息学方法分析了SRPK3基因核酸序列并对其所编码的的蛋白序列进行了预测与分析编码蛋白序列的结构特点;采用PCR-SSCP方法对大白猪,野猪,民猪及野家杂交猪的SRPK3基因的多态性进行了检验;采用实时荧光定量PCR(Real-time)方法检测了SRPK3在1日龄和30日龄大白猪及杜洛克的心脏、肌肉、脾脏、肝脏、肾脏、肺脏、胃、小肠、大肠、脑的表达情况;采用皮下注射的方式构建猪骨骼肌损伤模型用于研究在骨骼肌修复过程中SRPK3基因表达特性。经拼接所得到的1 708bp核苷酸片段,涵盖了SRPK3基因的全长CDS(1 701bp),该基因编码含567个氨基酸片段;蛋白存在两个S_TKc结构域,猪SRPK3蛋白序列与人和牛的相似性较高。PCR-SSCP检测发现第6外显子上A629→G629,T653→T653的突变,氨基酸变化为Pro→His,Ile→Thr;第9外显子处的G1059→A1059,氨基酸无突变。利用荧光定量PCR研究发现,表达结果显示该基因表达具有组织和种间特异性。SRPK3基因的表达在整个骨骼肌细胞损伤修复过程中逐渐升高。SRPK3基因主要在肌肉和心肌内表达,骨骼肌损伤修复过程中伴随骨骼肌细胞分化SRPK3的表达持续升高,推测其可能与骨骼肌细胞发育相关。 俄广鑫 刘娣 张冬杰 崔羽关键词:PCR-SSCP 乙醇脱氢酶Ⅰ类基因全长cDNA的克隆与表达 被引量:1 2007年 Ⅰ类乙醇脱氢酶(ADH)在乙醇的肝代谢中发挥重要作用,由ADH1,ADH2和ADH3组成。根据序列数据设计一对引物,利用RT-PCR同时克隆乙醇脱氢酶Ⅰ类基因全长cDNA。测序后的cDNA被克隆在表达载体pTYB11上并在大肠杆菌中稳定表达。纯化获得的酶通过其在340 nm处吸光值的变化进行酶活性测定。经检测重组ADH1,ADH2和ADH3的酶活力分别为2.0±0.3,0.8±0.2,1.5±0.2 U.mg-1。 周文婷 崔羽 王晓燕 张永红 李世荣 李景鹏关键词:基因克隆 原核表达 研究生现代兽医免疫学课程教学改革探索 2023年 现代兽医免疫学是兽医专业硕士的必修课之一,课程难度较大,传统讲授式教学模式不利于教学效果的提升。在此次的教学改革探索中,结合研究生课程的特点,首先优化了教学内容,在确保课程完整性的基础上,使教学内容更倾向于服务后续的专业硕士科研实验需求,有效提高了学生的学习兴趣;其次,引入了PBL教学模式和线上线下混合式教学方法,提高了学习主动性和教学互动性;对考核方式进行了改革,优化了平时成绩占比及考核项目,注重过程考核,新增课程论文查重要求,提高课程论文的水平。此次教学改革符合研究生课程的特点,取得了较好的效果,为提高现代兽医免疫学教学质量奠定了基础。 冉旭华 崔羽 李天森 闻晓波关键词:教学改革 兽医专业 猪骨形态发生蛋白-6基因多态性及其与产仔性能的关联性分析 被引量:3 2013年 试验旨在研究猪骨形态发生蛋白-6(bone morphogenetic protein 6,BMP-6)基因多态性及其与产仔性能的关联。采用PCR-SSCP技术检测了野猪、民猪、长白猪、北京黑猪、法系大白猪5个猪种268个个体BMP-6基因的多态性,并分析了BMP-6基因多态性与法系大白猪产仔性能的关联性。结果表明,猪BMP-6基因CDS区1104位存在1个G→A的同义突变,产生AA、AB、BB 3种基因型,其中在野猪和民猪中,A等位基因频率高;在长白猪、北京黑猪和法系大白猪中,B等位基因频率高。不同基因型对法系大白猪产仔数和产活仔数的影响差异显著(P<0.05),初步认为BMP-6基因多态性与产仔性能显著关联。 崔羽 杨少成 刘娣 华育平关键词:多态性 产仔数 人Neurturin基因的克隆及序列分析 2008年 文章以人胎脑cDNA为模板,采用巢式PCR方法扩增人Neurturin成熟蛋白基因,并将其插入到质粒pGEM-T,构建克隆载体pGEM-T-hNTN。对阳性重组子进行鉴定和序列测定,并与已克隆的人Artemin成熟蛋白基因进行同源性分析。结果表明,所克隆DNA片断与文献发表序列(GenBank NM004558)完全一致,人Neurturin成熟蛋白基因与Artemin同源性为58.5%。 崔羽 李璐 李景鹏关键词:NEURTURIN 基因克隆 人Artemin cDNA扩增及表达 2008年 以人胎脑RNA为模板,采用RT-PCR技术扩增人Artemin cDNA。序列分析表明,扩增的人Artemin cDNA核苷酸序列与已发表序列(GenBank登录号:AF115765)同源性为99.7%,氨基酸序列同源性为100%。将经过序列分析确定的Artemin cDNA插入原核表达载体pGEX-6p-1中,构建重组表达载体pGEX-6p-1-hART。通过SDS-PAGE分析重组人Artemin融合蛋白在大肠杆菌中的表达情况。结果表明,重组人Artemin融合蛋白表达量约占宿主菌总蛋白的18.32%,主要以包涵体形式存在。对表达的重组人Artemin融合蛋白包涵体进行溶解和复性,并进行Western blotting分析。说明体外成功扩增人Artemin cDNA,并在原核表达系统中高效表达了重组人Artemin融合蛋白。 崔羽 李景鹏关键词:ARTEMIN RT-PCR 原核表达 乙醇脱氢酶Ⅰ类基因全长cDNA的克隆与表达(英文) 2007年 目的:克隆编码人Ⅰ类乙醇脱氢酶基因,并探讨Ⅰ类乙醇脱氢酶(ADH)在乙醇的肝代谢中的作用。方法:从胎儿肝,肾提取的总RNA;经RT-PCR扩增得到cDNA并克隆至pGEM-T载体。cDNA序列用Kpn I和Pst I酶切鉴定,并检测其在大肠杆菌中表达活性。通过吸光法检测酶的活性。结果:成功克隆了人Ⅰ类乙醇脱氢酶并在大肠杆菌中获得稳定表达。经检测其酶活性分别为0.81~1.31U/mg、0.09~0.15U/mg和0.76~1.11U/mg。结论:cDNA克隆成功,并发现其与肝脏中分离的酶具有相似的活性。 周文婷 李景鹏 崔羽 张永红 李世荣关键词:CDNA克隆 酶活性检测