王瑞宁 作品数:30 被引量:21 H指数:2 供职机构: 河南农业大学 更多>> 发文基金: 河南省科技攻关计划 国家现代农业产业技术体系建设项目 国家自然科学基金 更多>> 相关领域: 农业科学 生物学 医药卫生 轻工技术与工程 更多>>
猪细小病毒纳米铝胶佐剂灭活疫苗及其制备方法 本发明公开了一种猪细小病毒纳米铝胶佐剂灭活疫苗,该疫苗由灭活的猪细小病毒病毒液与纳米铝佐剂以1:2的比例混合制成。本发明在乳鼠和猪体上对疫苗进行了安全性评价,结果发现,免疫之后无一只乳鼠死亡,无一头仔猪发生致敏反应,同样... 魏战勇 耿静微 宋美荣 胡慧 王瑞宁 王亚宾 崔保安文献传递 利用SYBR Green Ⅰ荧光定量RT-PCR检测猪传染性胃肠炎病毒S基因方法的建立 为建立猪传染性胃肠炎病毒(TGEV)S基因SYBR Green Ⅰ荧光定量RT-PCR检测方法,本研究根据Genbank收录的TGEV-Miller毒株S蛋白基因序列,设计合成一对引物,用RT-PCR方法从疫苗株中扩增T... 张云 罗线连 王瑞宁 郭东辉 胡慧关键词:猪传染性胃肠炎病毒 荧光定量RT-PCR S基因 文献传递 利用SYBR GreenⅠ荧光定量RT-PCR检测猪传染性胃肠炎病毒S基因方法的建立 为建立猪传染性胃肠炎病毒(TGEV)S基因SyBR GreenⅠ荧光定量RT-PCR检测方法,本研究根据Genbank收录的TGEV-Miller毒株S蛋白基因序列,设计合成一对引物,用RT-PCR方法从疫苗株中扩增TG... 张云 罗线连 王瑞宁 郭东辉 胡慧关键词:猪传染性胃肠炎病毒 荧光定量RT-PCR S基因 文献传递 一种猪瘟抗体阻断检测试纸 本发明公开了一种猪瘟抗体阻断检测试纸,由支撑板、抗原垫、金标垫、检测膜和吸水垫构成,抗原垫吸附猪瘟病毒检测抗原,金标垫吸附胶体金标记的抗猪瘟病毒单克隆抗体mAb1,检测膜上含有检测线T“|”和质控线C“|”印迹,检测线T... 王丽 张改平 郭军庆 杨继飞 张雨杭 周人杰 孙亚宁 王瑞宁 许倩茹 杨艳艳 李青梅 柴书军文献传递 一种抗猪δ冠状病毒的单克隆抗体及其杂交瘤细胞株、抗原表位肽和应用 本发明公开了一种抗猪δ冠状病毒的单克隆抗体及其杂交瘤细胞株、抗原表位肽和应用,属于生物检测技术领域。本发明的杂交瘤细胞株PDCoV‑S2‑2E9,保藏于中国典型培养物保藏中心,地址:中国.武汉.武汉大学,保藏日期为:20... 魏战勇 项玉强 路浩 宋润泽 胡慧 胡亚婷 郑兰兰 张红垒 郝晨琳 杨钧尧 王瑞宁水溶性酵母葡聚糖对猪细小病毒灭活疫苗免疫效果的影响 被引量:2 2016年 为研究水溶性酵母葡聚糖作为免疫佐剂对猪细小病毒(PPV)灭活疫苗免疫效果的影响,将水溶性酵母葡聚糖与PPV灭活疫苗联合免疫小鼠,采用ELISA方法检测免疫后不同时间小鼠血清中的抗体水平及IL-4、IL-6、IFN-γ的分泌水平,应用流式细胞仪检测免疫小鼠CD3^+、CD3^+CD4^+、CD3^+CD8^+T淋巴细胞百分比值的动态变化。结果显示,与疫苗单独免疫组相比,酵母葡聚糖对抗体水平无明显影响,CD3^+、CD3^+CD4^+、CD3^+CD8^+细胞数量增加,且均能不同程度诱导IL-4、IL-6、IFN-γ分泌。表明,水溶性酵母葡聚糖联合PPV灭活疫苗能够有效增强机体的免疫功能,水溶性酵母葡聚糖可以作为PPV的免疫佐剂。 靳晓慧 王瑞宁 徐卫松 耿静微 何潇湘 郑兰兰 张建 魏战勇关键词:猪细小病毒 灭活疫苗 体液免疫 猪伪狂犬病病毒gE蛋白的真核表达及其活性鉴定 被引量:1 2023年 为制备猪伪狂犬病病毒(PRV)gE重组蛋白并评估其抗原活性,将优化的PRV gE基因胞外区插入真核表达载体pCMV并在其C端加入Hexa-His标签,构建真核表达质粒pCMV-gE;将重组质粒转染HEK293F细胞,Dot blot鉴定转染细胞中gE重组蛋白的分泌表达;利用镍亲和层析和凝胶过滤层析从转染细胞培养上清中纯化gE表达蛋白;以SDS-PAGE和Western blot鉴定gE重组蛋白,利用PRV阳性血清以ELISA分析gE重组蛋白的抗原活性,通过去糖基化酶PNGase F鉴定其糖基化修饰及其对抗原活性的影响。Dot blot结果显示,gE重组蛋白通过自身信号肽实现在细胞培养上清的分泌表达,其表达量在转染96 h达到峰值。SDS-PAGE和Western blot结果显示,从细胞培养上清中纯化获得gE重组蛋白纯度约为90%,经去糖基化酶PNGase F处理的gE重组蛋白分子质量显著降低。间接ELISA结果显示,gE重组蛋白检测PRV阳性血清的抗体效价为1∶12800;PRV阳性血清对gE蛋白的检出限为31.25 ng/mL,其抗原活性是原核表达的4倍。对临床血清的检测结果显示,基于gE重组蛋白的ELISA与IDEXX抗体检测试剂盒的符合率为96.5%。综上,在真核细胞中分泌表达了具有高表达量、高纯度、高活性和糖基化修饰的gE重组蛋白,在PRV感染鉴别检测中具有良好的应用潜力。 王清龙 王瑞宁 王瑞宁 李青梅 李青梅 张真真 杨苏珍 杨苏珍 郭军庆关键词:猪伪狂犬病病毒 分泌表达 抗原活性 猪瘟病毒荧光定量PCR的建立及对病毒体外复制动态的研究 被引量:1 2019年 为了了解猪瘟病毒(CSFV)在PK-15细胞上的增殖规律。根据GenBank中CSFV Shimen毒株的NS5A基因保守区域序列,设计1对特异性引物,以CSFV总RNA为反转录模板,经优化反应条件,建立了基于实时荧光定量PCR技术的CSFV检测方法,并对其进行了敏感性、特异性、重复性试验,结果显示,该方法重复性好、特异性强,最低检测模板浓度为10拷贝/μL,并且CSFV的最低检测限为1 TCID_(50)/mL。利用所建立的方法研究CSFV在PK-15细胞上清中的增殖动态,并与TCID_(50)方法绘制的复制动态曲线进行比较。结果显示,两种方法测定的CSFV在PK-15细胞上的复制动态具有一定的平行关系,该方法为研究猪瘟病毒的致病机理及利用体外细胞培养毒生产疫苗提供了试验依据。 王瑞宁 王瑞宁 李存法 李存法 李青梅 张雨杭 王丽 郭军庆 郭军庆关键词:猪瘟病毒 荧光定量PCR 增殖规律 一种猪瘟病毒强毒株和弱毒株鉴别检测试纸 本发明涉及一种家畜疫病感染与免疫的鉴别检测器具,特别是涉及一种猪瘟病毒强毒和弱毒鉴别检测试纸,由支撑板,样品垫,金标垫,检测膜和吸水垫构成,检测膜上含有强毒检测线T1“│”,弱毒检测线T2“│”和质控线C“│”印迹。鉴别... 郭军庆 邢广旭 王丽 孙亚宁 杨继飞 杨艳艳 郅玉宝 柴书军 李青梅 王瑞宁 邓瑞广 张改平乙脑病毒Henan-09-03株E蛋白结构与功能生物信息学分析 被引量:2 2015年 利用生物信息学软件对Henan-09-03株乙型脑炎病毒(JEV)病毒E蛋白(囊膜蛋白)进行生物信息学分析、预测,为研究JEV的E蛋白基因工程疫苗提供依据。结果表明:E蛋白的分子质量为53 k Da,等电点是7.75,消光系数是66 515,不稳定系数为27.05,疏水平均值为-0.007,无信号肽,有2个跨膜区、27个蛋白修饰位点、5个二硫键、15个蛋白质结合位点,二级结构为α-β混合型、三级结构以同源四聚体形式存在。 张二芹 滕蔓 罗俊 王瑞宁 许倩茹 邓瑞广 张改平关键词:乙型脑炎病毒 E蛋白 生物信息学分析