汪冰
- 作品数：2 被引量：3H指数：1
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- 部分培养纯化因素对大肠杆菌表达的重组人GM-CSF产率的影响
- 粒细胞-巨噬细胞集落刺激因子(生白能)临床具有广泛的使用前景.为了提高其产率,我们对工程菌的生长、培养表达及产物分离提纯各步骤进行了优化试验,取得了初步结果.
- 曹宜生王锡锋宾漫容汪冰
- 关键词：生白能菌体生长
- 文献传递
- 培养基pH值与提纯方法对大肠杆菌表达rhGM-CSF产率的影响被引量：3
- 2001年
- 目的为了提高大肠杆菌表达的重组人粒细胞 巨噬细胞集落刺激因子 (rhGM CSF)的产率 ,对影响工程菌生长、产物表达和产物提纯等因素进行探索。方法设计 3种pH值培养基 ,以菌得率、表达率为指标 ,观察 pH对工程菌生长和表达的影响。以包涵体得率、纯度和产品得率、纯度、活性为指标 ,观察表达产物提纯各步对产率的影响。用SDS PAGE薄层扫描法测定包涵体和产品纯度。用TF1细胞MTT法测定产品rhGM CSF活性。结果 pH7.0培养基最好 ,菌得率 2 .2 2g/L ,表达率为 2 3 % ,比其它pH值培养基约高 1倍。菌体不经冻存处理即进行破菌制备包涵体 ,得率可提高 2 .5倍。在rhGM CSF复性步中 ,复性液中加入少量PEG 40 0 0 ,可提高复性率 0 .8倍。采用优化条件制备大肠杆菌rhGM CSF ,可提高产率约 8倍。结论影响大肠杆菌表达rhGM CSF产率的因素较多 ,优化培养、表达、纯化各步的条件 ,均可大幅度提高产率。
- 曹宜生王锡锋宾漫容汪冰
- 关键词：重组人粒-巨噬细胞集落刺激因子PH复性
