林仲翔
- 作品数:40 被引量:122H指数:7
- 供职机构:北京大学肿瘤医院更多>>
- 发文基金:国家自然科学基金北京市自然科学基金国家重点基础研究发展计划更多>>
- 相关领域:医药卫生生物学更多>>
- 转移相关分子链Actin-CD44-MMP-2在乳腺癌转移实验中的改变被引量:1
- 2011年
- 目的研究乳腺癌转移相关的分子机制及抑制体内外转移的作用和机制。方法选择高、低转移性乳腺癌细胞系BICR-H1和MCF-7,用明胶底物非变性电泳分析法、Western blot和免疫荧光染色等方法,观察肌动蛋白、CD44和基质金属蛋白酶2分子链(ACM)成员分子的定性与定位关系。利用荧光标记肿瘤鸡胚尿囊膜(CAM)模型,血管内注射顺铂或MMP-2 C末端PEX融合蛋白,利用荧光显微镜直接观察鸡胚肺转移抑制情况与癌细胞的ACM水平。结果高转移的BICR-H1细胞ACM分子链呈高表达,分子定位相互关联。低转移性的MCF-7细胞呈低表达或无表达。体外实验中,顺铂和PEX分别抑制了CD44和MMP-2的表达。体内实验中,5~30μg顺铂能够抑制BICR-H1和MCF-7肿瘤的体内生长,呈剂量依赖性。30μg顺铂使乳腺癌BICR-H1细胞体内转移克隆数下降到(8±6)个[对照组为(30±15)个],而同剂量PEX可以完全抑制其体内转移。结论 ACM分子链表达与乳腺癌的转移性密切相关。顺铂和PEX分别通过封闭ACM分子链的环节,使CD44或MMP-2表达抑制,从而抑制乳腺癌细胞的体内外生长和转移。
- 赵威韩海勃林仲翔张志谦
- 关键词:乳腺癌肌动蛋白CD44MMP-2
- 三磷酸腺苷对胃癌细胞Na~+-K~+-三磷酸腺苷酶活性和c-myc基因表达的影被引量:6
- 1995年
- 三磷酸腺苷对胃癌细胞Na ̄+-K ̄+-三磷酸腺苷酶活性和c-myc基因表达的影响吕桂芝,林仲翔,孟松娘,高燕,周立新,徐光炜三磷酸腺苷(ATP)对多种癌细胞的增殖均具有明显的抑制作用[1],本实验应用电镜细胞化学和免疫细胞化学方法证实了ATP抑制人胃...
- 吕桂芝林仲翔孟松娘高燕周立新徐光炜
- 关键词:三磷酸腺苷酶C-MYC基因表达
- 基质金属蛋白酶-2C端片段PEX的原核表达及其对血管发生的抑制作用被引量:12
- 2002年
- 为了克隆表达鸡的基质金属蛋白酶 2 (MMP 2 )的C端片段PEX ,并探讨其对血管发生的抑制作用 ,利用RT PCR从鸡胚成纤维细胞克隆MMP 2C端片段PEX ,构建原核表达载体pCal n PEX ;转化大肠杆菌BL2 1(DE3) pLys,异丙基β D 硫代半乳糖苷 (IPTG)诱导产生PEX融合蛋白 ,包涵体蛋白用盐酸胍法变性、复性 ;生长曲线观察PEX融合蛋白对人脐静脉血管内皮细胞增殖的影响 ;鸡胚绒毛尿囊膜血管发生实验研究其对血管发生的抑制作用 .结果表明融合蛋白CBP/PEX具有抑制人脐静脉血管内皮细胞的生长和鸡胚绒毛尿囊膜血管发生的作用 .提示PEX是有待进一步开发的潜在抑制血管发生的药物 .
- 李金萍张光谋柯杨林本耀赵威胡颖宁涛林仲翔张志谦
- 关键词:MMP-2血管发生基质金属蛋白酶-2原核表达
- 雌激素对高胆固醇血症兔动脉粥样硬化形成的影响研究被引量:1
- 1998年
- 3组纯种新西兰雌兔,A组为去卵巢未补充雌激素,B组去卵巢补充雌激素,C组未切除卵巢,均给1%胆固醇饮食。8周后取主动脉行内膜扫描电镜及光镜观察。A组主动脉内膜明显增厚、横断面内膜面积明显增高(P<0.01)、泡沫细胞相对较多(与B、C组比较),A组低密度脂蛋白胆固醇明显高于B组(P<005),余血脂水平3组间无统计学差异。结果提示雌激素可抑制高胆固醇血症兔动脉粥样硬化的形成。
- 李帮清徐成斌张文军林仲翔吕桂芝贾爱华
- 关键词:雌激素动脉粥样硬化高胆固醇血症
- 大鼠血管球囊成形术后血管局部纤连蛋白的改变被引量:1
- 1998年
- 目的探讨细胞外基质在血管成形术后再狭窄中的作用。方法在大鼠胸主动脉球囊损伤模型上,应用免疫组化和原位杂交的方法,观察纤连蛋白(Fn)在损伤后不同时间点和位置的蛋白和mRNA的表达。结果Fn在球囊损伤后第3天开始表达,第7天进一步增加,14天达高峰,30天仍持续高表达,在新生内膜及近内膜的中层最为明显。结论Fn在球囊损伤后异常增加,为新生内膜形成的重要原因。
- 吴永全汪丽蕙胡大一张晓菲张文军林仲翔
- 关键词:细胞外基质纤连蛋白类血管成形术
- 环腺苷酸和整合素在三磷酸腺苷作用下对人胃癌细胞系去恶化的调控作用被引量:2
- 2000年
- 目的:研究环腺苷酸 (cyclic adenosine monophosphate, cAMP)、整合素( integrinα 3)在三磷酸腺苷 (adenosin triphosphate, ATP)作用下对人胃癌细胞系( MGC- 803)恶性表型的去恶化作用。方法:应用 ATP作用于人胃癌细胞,①每日计数细胞计算抑制率和绘制生长曲线; ②软琼脂集落形成法检查集落形成能力; ③放免测定法和电镜细胞化学方法检查 cAMP-磷酸二酯酶( cAMP- phosphodiesterase, cAMP- PDEase)活性的改变; ④放免测定法和免疫细胞化学方法检测 cAMP水平的变化;⑤免疫细胞化学方法检测整合素和纽蛋白的表达。结果:① ATP抑制 MGC- 803细胞的增殖和在软琼脂内形成集落的能力,以及 cAMP- PDEase活性; ② ATP提高 MGC- 803细胞内 cAMP水平和增强细胞的整合素和粘着斑-纽蛋白的表达。结论: ATP抑制 MGC- 803细胞增殖并诱导分化; cAMP、整合素和纽蛋白在 ATP对 MGC- 803细胞的恶性表型去恶化过程中起重要的信号调节作用。
- 周立新吕桂芝孟松娘林仲翔李吉友
- 关键词:胃癌MGC-803环腺苷酸三磷酸腺苷整合素
- ATP抑制人胃腺癌(MGC-803)细胞增殖的机理研究(简报)被引量:6
- 1994年
- ATP已是临床治疗心血管疾病的常用药,目前国内外对ATP的抗癌作用也十分重视。我们曾报道过ATP对人胃癌细胞(SGC-7901、MGC-803)增殖的抑制效应,Rapaport和Fang等也相继报道ATP对小鼠结肠移植癌及人前列腺癌的增殖有抑制作用,但对ATP抗癌作用的机理除了报道膜上嘌呤受体的改变和cAMP第二信使调节作用外,其他方面未见报道。本实验研究了ATP抑制MGC-803细胞增殖与细胞周期时相分布、间隙连接通讯功能、c-Ha-ras基因表达之间的关系,为临床应用ATP治疗癌症提供了实验依据。
- 吕桂芝林仲翔张志谦周立新徐光炜
- 关键词:腺苷三磷酸胃肿瘤抗癌药药理
- 整合素在ATP对巨噬细胞活化过程中信号调节作用的研究
- 活化的巨噬细胞在机体免疫体系中发挥重要作用,研究巨噬细胞的活化对了解巨噬细胞生理功能和提高机体的免疫水平有重要理论意义和应用价值。我们曾证实过ATP对小鼠腹腔巨噬细胞有明显的促吞噬功能的作用。吞噬功能依赖于巨噬细胞的活化...
- 吕桂芝林仲翔
- 文献传递
- MMP_2和MMP_9在损伤血管中的原位表达被引量:4
- 1998年
- 目的探讨基质金属蛋白酶在血管损伤后的改变及可能作用。方法在大鼠胸主动脉球囊损伤的模型上,应用原位杂交的方法,观察了MMP2、MMP9在血管损伤后不同时间的表达情况。结果MMP2在球囊损伤后第三天开始表达,第7天达高峰,第14天未见表达,MMP9从第3天开始表达,并一直持续到14天,但第14天只有新生内膜部位有少量表达。结论MMP2、MMP9在血管损伤后,异常表达,可能与平滑肌细胞迁移、新生内膜形成及血管重塑有关。
- 吴永全汪丽蕙胡大一张晓菲张文军林仲翔
- 关键词:细胞外基质再狭窄血管成形术
- α-catenin/GST融合蛋白的原核表达及其多克隆抗体制备被引量:2
- 2001年
- 目的 制备α catenin多克隆抗体 ,为深入研究其功能和探讨其与肿瘤等疾病的相关性提供工具。方法 PCR扩增编码人α cateninC 端 45 5个氨基酸的DNA片段 ,DNA重组入原核表达质粒pGEX 4T 3,转化大肠杆菌JM10 9菌株 ,异丙基 β D硫代半乳糖苷 (IPTG)诱导产生GST α catenin融合蛋白。GST Sepharose亲和层析纯化可溶性融合蛋白 ,免疫新西兰白兔 ,制备抗血清。通过ELISA、免疫荧光细胞化学和SP免疫组织化学法鉴定血清特异性和效价。 结果 成功地构建了pGEX 4T 3 α Cat表达载体 ,转化JM10 9后可高效表达融合蛋白GST α catenin(α Cat)。免疫兔产生的α Cat多抗可特异检测人体组织和细胞中α Cat表达及定位情况。 结论 α catenin抗体效价高 ,特异性强 ,适合免疫组织化学。
- 马忠良王冰晶林仲翔林本耀张志谦
- 关键词:Α-CATENIN融合蛋白多克隆抗体GST