李雪峰
- 作品数：16 被引量：51H指数：5
- 供职机构：中国农业科学院哈尔滨兽医研究所兽医生物技术国家重点实验室更多>>
- 发文基金：黑龙江省自然科学基金中国农业科学院哈尔滨兽医研究所所长基金国家自然科学基金更多>>
- 相关领域：农业科学环境科学与工程更多>>
- 诊断马流感病毒和鉴定其亚型的多重RT－PCR方法
- 本发明公开了一种诊断马流感病毒(EIV)和鉴定其亚型的多重RT－PCR方法，包括：以待检样品RNA为模板，以SEQ ID NO：1和SEQ ID NO：2，SEQ ID NO：3和SEQ ID NO：4两组核苷酸序列为多...
- 郭巍戴伶俐李雪峰赵利平相文华周建华
- 文献传递
- NDV或H9N2 AIV感染对坦布苏病毒继发感染宿主单核-巨噬细胞的影响
- 2022年
- 为研究新城疫病毒(NDV)或H9N2禽流感病毒(AIV)对坦布苏病毒(TMUV)继发感染宿主单核-巨噬细胞的影响及其潜在机制,试验通过实时荧光定量PCR方法检测NDV或H9N2 AIV预先感染鸭单核-巨噬细胞和HD11细胞后再感染TMUV 12,24小时时的TMUV基因组拷贝数,分析是否可用HD11细胞替代鸭单核-巨噬细胞进行后续试验;分别通过高分辨率活细胞共聚焦显微镜和ELISA检测NDV和H9N2 AIV感染12,24 h对HD11细胞中活性氧(ROS)和Ⅰ型干扰素(IFN)含量的影响;通过实时荧光定量PCR方法分别检测PMA、外源Ⅰ型IFN与细胞共孵育后,感染TMUV 12,24小时时ROS和24小时时Ⅰ型IFN对TMUV基因组在细胞中复制的影响。结果表明:感染12,24小时时,在鸭单核-巨噬细胞中,NDV混合感染组的TMUV基因组拷贝数极显著低于TMUV单独感染组(P<0.01);感染12,24小时,H9N2 AIV混合感染组的TMUV基因组拷贝数分别显著和极显著低于TMUV单独感染组(P<0.05,P<0.01)。在HD11细胞中,NDV混合感染组的TMUV基因组拷贝数分别显著和极显著低于TMUV单独感染组(P<0.05,P<0.01);H9N2 AIV混合感染组的TMUV基因组拷贝数极显著低于TMUV单独感染组(P<0.01)。感染12,24小时时,NDV和H9N2 AIV均可极显著提高HD11细胞中ROS的含量(P<0.01)。感染24小时时,NDV可显著提高IFN-α的含量(P<0.05),感染12,24小时时,NDV可极显著提高IFN-β的含量(P<0.01);H9N2 AIV可在感染12,24小时时极显著提高IFN-β的含量(P<0.01)。ROS可在感染TMUV 12,24小时时极显著抑制TMUV基因组的复制(P<0.01),Ⅰ型IFN可在感染TMUV 24小时时显著抑制TMUV基因组的复制(P<0.05)。说明可用HD11细胞替代鸭单核-巨噬细胞进行后续试验;在鸭单核-巨噬细胞中,NDV或H9N2 AIV感染均可以有效抑制TMUV基因组的复制,其作用可能是通过提高ROS和Ⅰ型IFN含量实现的。
- 张艳慧马勇梁雨萌崔露陈志杰李雪峰胥利刘柘一刘胜旺李海
- 关键词：新城疫病毒单核-巨噬细胞
- 牛支原体NM2012株致病性研究被引量：3
- 2016年
- [背景]牛支原体是牛呼吸道疾病综合征的重要病因之一,可以引起牛的多种呼吸道疾病,给养殖业带来巨大的经济损失。接种疫苗是预防牛支原体感染的最有效的手段。[目的]通过人工感染牛体试验,了解牛支原体NM2012株的致病性,为后续疫苗研究提供生产用菌种。[方法]将牛支原体NM2012株第6代、第12代、第20代菌株分别经人工气管注射感染2周龄犊牛,攻毒后连续观察27 d,记录攻毒后犊牛的临床症状,在感染后第14天,从各攻毒组分别选取3头犊牛、空白对照组选取2头犊牛进行扑杀,第27天将剩余实验犊牛处死,观察肉眼病理变化和组织学病理变化。[结果]3个代次的NM2012菌株均对犊牛具有致病性,可引起比较典型的牛支原体肺炎症状和病理变化。[结论]NM2012株6-20代仍然具有对牛的致病性,可以作为今后疫苗研究的潜在菌种。
- 高航飞李建牛同州涂明亮李雪峰纪燕赵永春申之义
- 关键词：牛支原体犊牛
- 马流感病毒多重RT-PCR检测方法的建立被引量：6
- 2008年
- 根据马流感病毒的M基因和HA基因的保守序列,设计了两对引物,MF和MR为通用引物,可以检测出H3N8和H7N7亚型EIV,目的片段227bp,HF和HR为H3N8亚型特异性引物,目的片段595bp。利用这两对引物,通过对多重RT-PCR扩增条件的优化,建立了快速检测鉴别H3N8亚型EIV的多重RT-PCR技术。特异性和敏感性试验结果表明,该技术可以用于EIV的快速诊断和亚型鉴定。
- 郭巍戴伶俐李雪峰周建华相文华沈荣显刘娣
- 关键词：马流感病毒
- H3N8亚型马流感病毒内蒙古株全基因序列分析及NS1基因的原核表达
- 马流感(Equine influenza,EI)是由马流感病毒引起的一种急性、高度接触性的马属动物呼吸道传染病。近年来,随着国际马术赛事的蓬勃兴起以及马属动物流动范围扩大等原因,致使EI在全球上频繁暴发、流行并由此对赛马...
- 李雪峰
- 关键词：马流感病毒全基因原核表达
- 文献传递
- H3N8亚型马流感病毒内蒙古株NS基因的克隆及序列分析被引量：2
- 2009年
- 马流感病毒（Equine influenza virus，EIV）是马流行性感冒的病原体。马流感病毒的基因组为单股负链RNA，含有大小不同的8个独立的RNA片段，其第8片段为非结构蛋白基因，基因长890bp，编码非结构蛋白NS1和NS2。两者的相对分子质量分别为25ku和14ku。编码NS1的读码框连续，而编码NS2的mRNA需要剪切。序列分析表明，NS1和NS2有70个氨基酸重叠，并且在氨基端有9个氨基酸是相同的。在感染早期NS1被大量合成，
- 李雪峰戴伶俐郭巍相文华曹贵方苏布达
- 关键词：马流感病毒致病性大肠杆菌NS基因鸡传染性支气管炎奶牛子宫内膜炎
- 从驴体内分离一株马流感病毒及其HA基因的遗传特征分析
- 2007年,中国新疆地区暴发马流感疫情,我们从新疆乌鲁木齐自治区发病驴体内分离了一株马流感病毒,命名为A/驴/新疆/5/2007。为了分析这个新分离株的遗传特征,根据GenBank上登录的EIV序列,设计了扩增H3N8亚...
- 戚亭郭巍戴伶俐李雪峰何娜盛明巍赵立平李红梅相文华
- 关键词：马流感病毒
- 文献传递
- 应用TaqMan荧光定量PCR检测H3N8亚型马流感病毒被引量：5
- 2009年
- 为建立马流感病毒(EIV)的检测方法,本试验针对H3N8亚型EIV血凝素(HA)基因高度保守序列设计并合成了2对引物和1条TaqMan荧光探针,建立了TaqMan荧光定量PCR方法。经用TaqMan荧光定量PCR、RT-PCR和病毒分离方法分别检测新疆等省135份疑似EIV马鼻拭子样品,其结果表明:3种方法的马流感检出率分别为54.07%、37.78%、0.89%;TaqMan荧光定量PCR可检出马流感病毒基因组RNA的灵敏度可达10拷贝/反应,而且与其他马呼吸道病毒均无交叉反应,具有良好的特异性、敏感性和重复性。该方法为H3N8亚型马流感的早期诊断及分子流行病学调查等提供了一种新的快速、准确的定量检测技术。
- 戴伶俐郭巍李雪峰黄文强赵立平阿依吐拉.肉孜相文华
- 关键词：TAQMAN探针荧光定量PCRH3N8亚型马流感病毒
- 鸡腺病毒血清4型Hexon蛋白的表达及与不同血清型抗体的交叉反应性评价被引量：7
- 2020年
- 自2015年我国鸡群大面积暴发肝炎-心包积水综合征以来,我国鸡群鸡腺病毒流行呈现多血清型的复杂情况,甚至同一鸡群有多种血清型鸡腺病毒同时存在,其中鸡腺病毒血清4型(FAdV-4)对鸡的致病性最强。为了解FAdV-4衣壳蛋白Hexon蛋白与其他血清型鸡腺病毒抗体之间的交叉反应性,本研究将FAdV-4 HN/151025毒株的Hexon基因进行分段表达,表达蛋白分别位于CH1(1~370 aa)、CH2(371~671aa)和CH3(672~937 aa)片段。将FAdV-4 HN/151025毒株的Hexon基因的3段表达产物分别与FAdV-4、FAdV-1、FAdV-8a、FAdV-8b和FAdV-11型抗血清进行Western-blot反应。结果显示,FAdV-4 Hexon蛋白与不同血清型抗体之间均有交叉反应,但不同片段的交叉反应强度有所差异。FAdV-1型血清可与FAdV-4Hexon蛋白CH1和CH2片段发生反应,说明FAdV-4 Hexon蛋白的1~671 aa与FAdV-1型血清有交叉反应。FAdV-8a和FAdV-8b型血清仅与FAdV-4 Hexon蛋白CH2片段发生反应,说明FAdV-8a和FAdV-8b型血清与FAdV-4 Hexon蛋白的交叉反应区域在371~671 aa内。FAdV-11型血清可与FAdV-4 Hexon蛋白的3个片段发生反应,提示FAdV-11与FAdV-4型之间有交叉保护。血清4型FAdV的Hexon蛋白与不同血清型FAdV抗体间的交叉反应及其主要反应区域的研究,将对不同血清型FAdV疫苗的研制及不同血清型FAdV鉴别诊断提供依据。
- 宋文平李雪峰秦亚萍刘胜旺李慧昕
- 关键词：鸡腺病毒
- 马流感诊断方法研究进展与应用概况被引量：10
- 2010年
- 马流行性感冒（简称马流感），是由正粘病毒科A型流感病毒中的马流感病毒（Equine influenza virus，EIV）H7N7亚型和H3N8所引起马属动物的一种急性高度接触传染性疾病。该病的临诊特征为发烧，结膜潮红，咳嗽，流浆液性鼻液、脓性鼻漏及母马流产等。马群一旦感染EIV，极易大范围迅速传播，
- 戴伶俐李雪峰相文华
- 关键词：马流感病毒A型流感病毒流行性感冒正粘病毒科VIRUS
