李诗林
- 作品数：4 被引量：6H指数：2
- 供职机构：石河子大学农学院更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金国际科技合作与交流专项项目更多>>
- 相关领域：农业科学更多>>
- 库尔勒香梨苹果褪绿叶斑病毒功能基因RNAi载体构建及干扰效果评价
- 新疆库尔勒香梨收入约占农牧民人均纯收入的35％，居农民人均收入的首位，是本地区特色支柱产业。但香梨病虫害的危害严重影响了树体健康生长，导致树势衰弱，使生产成本大大增加，严重影响香梨产量、果实品质和经济效益。苹果褪绿叶斑病...
- 李诗林
- 关键词：库尔勒香梨苹果褪绿叶斑病毒RNAI载体
- 文献传递
- 双抗CMV和ToMV RNAi载体的构建及烟草遗传转化被引量：1
- 2012年
- 为了获得抗CMV和ToMV的转基因烟草,本试验采用RT-PCR的方法从新疆加工番茄CMV分离物NS0-4克隆了1a复制酶第71～360bp和第1801～2050bp序列作为干扰片段CR9和CR14,以及从ToMV分离物SCS-4克隆了130/180kDa复制酶第658～940bp和第2551～2850bp序列作为干扰片段To9和To14。通过T克隆载体将CR9和To9及CR14和To14进行拼接,分别构建成含反向重复结构拼接片段的RNAi表达载体pBi35STC9和pBi35STC14;利用农杆菌介导法分别将表达载体侵染本氏烟(Nicotiana benthamiana),再生植株经分子检测,结果显示已成功获得了转pBi35STC9烟草9个单株及转pBi35STC14烟草8个单株,为进一步的攻毒试验奠定了基础。
- 田桂英乔亚红向本春郑银英李诗林崔百明
- 关键词：CMVTOMVRNAI载体转基因烟草
- 抗CMV和ToMV RNAi载体的构建及加工番茄遗传转化被引量：3
- 2014年
- 【目的】利用农杆菌介导法将抗CMV和ToMV的RNAi表达载体pBi35STC12转入红番3号加工番茄,获得抗CMV和ToMV的加工番茄植株,为加工番茄病毒病的防治奠定基础。【方法】采用RT-PCR扩增,选取新疆加工番茄CMV分离物NS0-4 1a复制酶第1 051-1 350bp序列和ToMV分离物SCS-2 130/180ku复制酶第1 920-2 200bp序列,作为干扰片段CR12和To12。通过T克隆载体将CR12和To12连接成拼接片段TC12,构建成含反向重复结构拼接片段的RNAi表达载体pBi35STC12。通过农杆菌介导法,用其转化红番3号加工番茄,经过筛选、PCR检测得到转基因植株。【结果】成功构建了抗CMV和ToMV的RNAi表达载体pBi35STC12,并用其转化番茄植株,从转化的1 500个愈伤组织中获得33株再生植株,利用PCR对再生植株进行检测,显示从33株再生植株中获得了19株转基因植株,转化率为1.26%。【结论】构建了抗CMV和ToMV的RNAi表达载体pBi35STC12,用其转化红番3号加工番茄,获得了转基因植株。
- 乔亚红田桂英郑银英崔百明李诗林向本春
- 关键词：CMVTOMVRNAI载体加工番茄
- 库尔勒香梨苹果褪绿叶斑病毒RNAi载体构建及烟草遗传转化被引量：2
- 2012年
- 为了初步研究苹果褪绿叶斑病毒(ACLSV)中CP、MP基因的功能及致病相关性,根据Genbank中登录的ACLSV序列设计简并引物,通过RT-PCR扩增CP基因5’端序列377bp(PCR-CLA)和MP基因3’端序列354bp(PCR-CLB)作为靶标基因。以植物表达载体pBi35SG12为骨架载体,卡那霉素抗性基因为筛选基因,将靶标基因的正向序列和反向重复序列分别插入到内含子(intron)的两侧,构建RNAi载体pBi35S_CLA和pBi35S_CLB,利用农杆菌介导的方法转化西方烟(Nicotiana occidentalis),通过对各载体的干扰效果评价来分析各基因的主要功能。通过PCR检测pBi35S_CLA和pBi35S_CLB,结果表明已分别获得27株和24株转基因植株。本研究为进一步评价各载体的干扰效果和研究ACLSV主要基因的功能奠定了基础。
- 李诗林郑银英崔百明都业娟乔亚红田桂英向本春
- 关键词：苹果褪绿叶斑病毒克隆RNAI载体
