朱文豪 作品数:189 被引量:442 H指数:11 供职机构: 河南省农业科学院 更多>> 发文基金: 河南省科技攻关计划 青年科技基金 国家自然科学基金 更多>> 相关领域: 农业科学 生物学 医药卫生 环境科学与工程 更多>>
一种用于抑制同时携带多种新德里金属-β-内酰胺酶的大肠杆菌抗菌化合物及其应用 本发明公开了天然植物来源的贯叶连翘抗菌提取物及其应用,可以作为同时携带新德里金属‑β‑内酰胺酶‑NDM4、NDM5和β‑内酰胺酶TEM、AmpC的大肠杆菌抗菌化合物及其应用,用于碳氢霉烯酶耐药菌感染的治疗。贯叶连翘提取物... 李海利 张青娴 游一 朱文豪 方剑玉 郎利敏 徐引弟 张立宪 王治方 焦文强 王克领一株猪丹毒丝菌及其应用 本发明公开了一株1a型猪丹毒丝菌及其应用。该猪丹毒丝菌的保藏编号为CGMCC NO:16808,记名为猪丹毒丝菌HN1573。该菌株分离自发生急性败血症死亡的育肥猪的心血,在TSA固体培养基上分离时无其它细菌生长,只有猪... 徐引弟 王治方 张青娴 朱文豪 许峰 李海利 郎利敏 焦文强 张立宪 游一 王克领文献传递 猪流行性腹泻病毒CH-HeNXX-2017株全基因组序列测定与分析 被引量:2 2019年 为了解猪流行性腹泻病毒在河南流行毒株全基因组遗传进化水平,应用RT-PCR方法从疑似猪流行性腹泻病毒感染的病料中扩增出全基因组序列,并将PCR产物纯化后连接pMD20-T载体,转化JM109感受态细胞,挑选单克隆进行测序,获得的序列经过DNA STAR中Edit Sequence软件对全基因组序列进行拼接。结果表明,猪流行性腹泻病毒CH-He NXX-2017株全长28 038 nt(除去poly A);进化树分析显示,该毒株与IA1,USA Colorado2013,MN和PC22A等毒株亲缘关系较为接近,与国内外早期分离株如CV777,LZC,DR13等毒株亲缘关系较远。揭示猪流行性腹泻病毒一直处于不断的进化中,需要一直密切监控病毒进化趋势,为临床诊断以及疫苗研发等提供理论参考。 焦文强 许峰 许峰 王治方 徐引弟 王克领 王治方 李海利 张青娴 郎利敏关键词:猪流行性腹泻病毒 全基因组序列 2型猪链球菌的毒力因子的鉴定及分布 被引量:6 2018年 为探讨河南省2型猪链球菌的毒力及分布情况,本实验设计3对引物,分别扩增溶菌酶释放蛋白(muramidase-released protein,MRP)、胞外因子(extracellular protein fateror,EPF)和溶血素(suilysin,SLY)基因,对2016年1月~2016年12月从河南省猪场采集的各种组织病料中分离鉴定出的87株2型猪链球菌进行了初步的小鼠毒力试验和mrp、epf、sly基因的扩增。结果表明,河南省流行的2型猪链球菌的菌株均对小鼠有毒力,共有8种毒力基因型,其中以毒力相对高的sly+mrp+epf+型为主,其次为sly+mrp-epf+型和sly-mrp+epf+型。 徐引弟 王治方 张青娴 朱文豪 焦文强 李海利 郎利敏 王克领关键词:2型猪链球菌 毒力 河南省猪肺炎支原体感染的流行情况调查 被引量:3 2019年 为了对河南省猪肺炎支原体的流行情况进行调查,试验从发生呼吸道疾病的肺中分离鉴定猪肺炎支原体,对疑似猪肺炎支原体的肺组织样品通过液体培养传代、固体培养基培养、吉姆萨染色镜检,PCR扩增,并进行测序比对。结果表明,2017年1—12月从河南省猪场发生呼吸困难的猪的实变的肺脏共采集148份,共分离25株猪肺炎支原体,分离率达16.89%。结果说明猪肺炎支原体在河南省发生呼吸道疾病的猪场中感染率较高。 徐引弟 张青娴 张青娴 焦文强 王治方 朱文豪 焦文强关键词:猪肺炎支原体 快速直接PCR检测猪肺炎支原体方法的建立及其应用 被引量:2 2019年 为了对河南省猪场猪肺炎支原体的感染情况进行调查,试验设计1对引物,对疑似猪肺炎支原体的肺组织进行直接PCR扩增,并进行了特异性、敏感性、重复试验,建立了猪肺炎支原体的快速直接PCR方法。2017年1月至2018年12月从河南省猪场发生重症呼吸困难猪的实变肺脏共采集348份,用建立的PCR方法进行鉴定,猪肺炎支原体阳性226份,阳性率为64.94%。表明猪肺炎支原体的感染率极高,是危害猪场的较为普遍、严重的病原。 徐引弟 张青娴 张青娴 焦文强 王治方 朱文豪 焦文强关键词:猪肺炎支原体 猪瘟病毒E2基因的克隆表达 被引量:3 2009年 PCR扩增猪瘟病毒(CSFV)定点突变后的E2基因,克隆至原核表达载体质粒pET-28a中,重组质粒pET28a-E2转化BL21(DE3),IPTG诱导,高效表达了E2基因,表达量达菌体总蛋白的25.3%。免疫印迹表明,所表达的蛋白是CSFV特异性的。 朱文豪 张以芳 徐引弟 王治方 张玉杨 郭成留关键词:猪瘟病毒 E2基因 原核表达 河南省猪链球菌的分离鉴定及耐药性分析 被引量:29 2018年 为探讨河南省猪链球菌的血清型分布和耐药性情况,本试验对2016年5月~2017年5月从河南省猪场采集的各种组织病料进行猪链球菌的分离培养、生化鉴定及PCR鉴定,并进行了血清群的分群鉴定和血清型的分型鉴定,对其中的2型猪链球菌进行了药敏试验。结果显示,试验共鉴定出189株猪链球菌,流行的猪链球菌的血清群主要以D群为主,其次是G群和C群;优势的血清型是2型、7型、9型和1型。其中87株为2型猪链球菌,超过90%的2型菌株对β-内酰胺类(青霉素G、阿莫西林和头孢菌素类)、氯霉素、万古霉素、环丙沙星敏感,超过40%的2型菌株对多西环素、四环素、红霉素、复方新诺明、丁胺卡那霉素、克林霉素、链霉素、米诺环素产生耐药性。以上结果为指导猪场使用敏感药物及时控制疫情、选择血清型相符的疫苗进行预防及减少损失提供参考依据。 徐引弟 孙帅杰 王治方 张青娴 朱文豪 焦文强 李海利 郎利敏 王克领关键词:猪链球菌 血清型 血清群 耐药性 PEDV、TGEV、RV多重RT-PCR检测方法的建立与应用 被引量:4 2014年 为了快速准确诊断猪流行性腹泻病毒(PEDV)、猪传染性胃肠炎病毒(TGEV)、猪轮状病毒(RV)引起的猪腹泻病,通过设计三对引物,建立了扩增PEDV、TGEV、RV的多重RT-PCR方法,用于临床上大量腹泻病料的鉴定。该方法特异敏感,能同时检测PEDV、TGEV、RV,而对猪瘟病毒、猪繁殖与呼吸综合征病毒、猪伪狂犬病毒、猪圆环病毒2型病毒、乙型脑炎病毒、猪细小病毒等无扩增,检测的抗原稀释极限为107。用于35个猪场120份临床样品的检测,PEDV阳性率占37.5%,TGEV阳性率占0.75%,RV阳性率占1.25%。PEDV阳性病料测序结果分析表明,与近几年分离毒株亲缘关系较近,与经典毒株和疫苗株亲缘关系较远。结果表明建立的多重PCR方法特异性强、敏感度高,能用于临床诊断及流行病学调查。 徐引弟 张青娴 李建林 张彬 王克领 朱文豪关键词:猪轮状病毒 多重RT-PCR PRRSV变异株与普通株二重RT-PCR鉴别方法的建立与应用 被引量:6 2009年 参考GenBank发表的猪繁殖与呼吸综合征病毒(PRRSV)的nsp2基因序列,在nsp2大缺失区下游的保守区设计了1条下游引物,在小缺失区设计1条上游引物,用于变异株的扩增。在大缺失区内部设计1条上游引物,与变异株共用下游引物,用于普通株的扩增,建立了PRRSV变异株与普通株二重RT-PCR鉴别方法。建立的RT-PCR方法用于临床病料的检测,部分阳性结果测序,变异株序列与报道的序列同源性在97%以上。结果表明,该方法特异、快速、简便,可以用于PRRSV变异株和普通株的鉴别。 徐引弟 王治方 朱文豪 张青娴 焦海燕 郭成留关键词:猪繁殖与呼吸综合征病毒