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张绪梅: 作品数：49 被引量：220H指数：7; 供职机构：天津医科大学公共卫生学院更多>>; 发文基金：国家自然科学基金天津市科技攻关项目中国博士后科学基金更多>>; 相关领域：医药卫生生物学文化科学轻工技术与工程更多>>

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叶酸对胎鼠大脑神经干细胞增殖蛋白表达影响被引量：10: 2008年; 目的研究叶酸对胎鼠大噙神经干细胞（NSCs）增殖的影响及其作用机制。方法采用孕14～16dSD胎鼠，进行NSCs原代培养。将NSCs分为4组：对照组、叶酸缺乏组、叶酸低剂量组、叶酸高剂量组。收集培养6d的细胞，采用5-溴脱氧尿苷（BrdU）掺入法和免疫组化双标记检测NSCs的增殖情况，采用蛋白印迹法（Westernblot）检测胎鼠增殖期NSCs活化的细咆外信号调节激酶1／2（pERKl／2）的表达含量。结果叶酸低剂量组、高剂量组BrdU＋巢蛋白（Nestin）阳性细胞占总细胞（70．5±2．7），（78．8±6．9）％与对照组（64．2±8．9）％比较，差异均有统计学意义，且高剂量组明显高于低剂量组（P〈0．05）；叶酸低剂量组、高剂量组pERKl蛋白的表达（0．407±0．018），（0．443±0．019）与对照组（0．388±0．011）比较，差异均有统计学意义（P〈0．05）。叶酸低剂量组、高剂量组pERK2蛋白的表达（0．547±0．044），（0．563±0．041）与对照组（0．507±0．018）比较，差异均有统计学意义（P〈0．05）。结论叶酸能够促进胎鼠NSCs的增值。其作用机制可能是通过丝裂原活化蛋白激酶信号通路调节NsCs的增殖。; 王广雷黄国伟张绪梅丛革新姬长珍田志红; 关键词：叶酸神经干细胞增殖

SELDI蛋白芯片技术检测叶酸对胎鼠神经干细胞作用的蛋白表达谱被引量：1: 2011年; 目的探讨应用表面增强激光解离飞行时间质谱技术(surface-enhanced laser desorption/ionization time of flight mass spectrometry,SELDI-TOF-MS)测试不同剂量叶酸作用下胎鼠神经干细胞(NSCs)的蛋白质表达谱,从中筛选出差异表达蛋白。方法原代培养胎鼠神经干细胞,分为4组:对照组(叶酸浓度为4μg/ml),叶酸缺乏组(叶酸浓度为0.65μg/ml),叶酸低剂量组(叶酸浓度为8μg/ml),叶酸高剂量组(叶酸浓度为44μg/ml);细胞形态学观察;MTT法检测叶酸对细胞增殖状态的影响;采用弱阳离子交换芯片(wcx-2)蛋白芯片检测不同叶酸剂量下胎鼠NSCs蛋白表达差异;采用Biomarker Wizard软件进行分析结果,通过查询蛋白库,对特定分子质量所对应的标记蛋白进行初步确定。结果叶酸补充可促进NSCs增殖;每组芯片上均捕获到102种蛋白质点。筛选出不同叶酸剂量组(叶酸缺乏组、叶酸低剂量组、叶酸高剂量组)与对照组之间的差异蛋白共32种,其中有4个蛋白存在显著性差异(P<0.05)。初步推断这些蛋白与NSCs凋亡相关,且在不同叶酸剂量组图谱表达不同。结论叶酸可能通过改变凋亡蛋白的表达影响NSCs生长。叶酸对神经系统疾病的防治作用将进一步探索。; 张莹常红黄国伟张绪梅; 关键词：叶酸蛋白芯片胎鼠

叶酸对局灶性脑缺血大鼠血浆同型半胱氨酸的影响被引量：1: 2009年; 目的:探讨叶酸对局灶性脑缺血大鼠血浆同型半胱氨酸(homocysteine,Hcy)含量的影响,为研究维生素防治脑梗死提供理论依据。方法:SD雄性大鼠32只,随机分为4组,假手术(SO)组、缺血(IM)组、缺血+叶酸低剂量[IM+LFA,4mg/(kg·d)]组、缺血+叶酸高剂量[IM+HFA,12mg/(kg·d)]组。叶酸灌胃28d后制备大脑中动脉闭塞(MCAO)模型。分别于叶酸灌胃前后和缺血后用化学免疫发光法测定血清中叶酸含量,用高效液相色谱(HPLC)法测定大鼠血浆Hcy浓度。结果:叶酸灌胃前,各组大鼠各项指标的差异均无统计学意义(P>0.05);叶酸灌胃后及缺血后,IM+LFA组、IM+HFA组血清叶酸水平高于SO组和IM组(P<0.01);叶酸灌胃后,IM+LFA组、IM+HFA组血浆Hcy水平低于叶酸灌胃前和SO、IM组(P<0.01);造模后,IM+LFA组、IM+HFA组血浆Hcy水平低于灌胃前和SO组、IM组(P<0.01),IM+HFA组低于IM+LFA组(P<0.01)。结论:补充叶酸可以提高局灶性脑缺血大鼠体内血清叶酸含量,降低血浆同型半胱氨酸水平,从而起到保护作用。; 卢瑾黄国伟常红张绪梅刘欢; 关键词：叶酸半胱氨酸脑缺血色谱法高压液相

叶酸对胎鼠神经干细胞体外增殖的影响被引量：6: 2008年; 目的探讨叶酸对体外培养的胚胎大鼠神经干细胞(neural stem cells,NSCs)增殖的影响。方法本研究采用显微解剖、机械吹打、无血清悬浮培养方法分离培养鼠胚大脑NSCs,用巢蛋白(nestin)免疫荧光染色对其进行鉴定,5'-溴脱氧尿嘧啶(BrdU)掺入法检测细胞增殖状态;设立正常对照组,叶酸低、高剂量(培养液中添加叶酸4.0 40 mg/L)和叶酸缺乏组(培养液中添加叶酸拮抗剂甲氨蝶呤0.4mg/L);通过nestin+BrdU免疫荧光双标记和绘制细胞生长曲线(MTT法)检测叶酸对细胞增殖状态的影响。结果无血清培养液中可形成大量呈nestin抗原阳性细胞组成的神经球,BrdU免疫标记证实培养的NSCs具有增殖能力。免疫荧光双标记和MTT结果显示,两个叶酸干预组NSCs增殖能力较对照组显著增强。结论体外培养的胚胎大鼠NSCs具有增殖和自我更新的能力;叶酸可以在一定程度上增强NSCs的增殖能力,促进神经干细胞的生长。; 张绪梅黄国伟姬长珍张文治苏心; 关键词：叶酸神经干细胞 NESTIN BRDU 免疫荧光双标记

胚胎大鼠神经干细胞体外分化的激光共聚焦显微镜观察被引量：2: 2008年; 目的:采用激光扫描共聚焦显微镜观察体外培养胎鼠大脑皮质神经干细胞(neural stem cells,NSCs)分化情况。方法:利用无血清培养方法,分离培养胚胎大鼠大脑NSCs,进行体外扩增培养、传代;采用溴脱氧尿嘧啶核苷(bromodeoxyuridine,BrdU)掺入、双重免疫荧光细胞化学标记方法和激光扫描共聚焦显微镜,用神经细胞的特异性抗体(神经元β-微管蛋白、胶质纤维酸性蛋白),鉴定NSCs向神经元与星形胶质细胞分化的情况。结果:从胎鼠大脑皮质及皮质下分离的组织,经原代和传代培养均可形成细胞克隆,并表达神经上皮干细胞蛋白(Nestin)抗原。在血清诱导下,分化后的细胞表达神经元、星形胶质细胞2种神经细胞的特异性抗原,NSCs分化为星形胶质细胞神经元的比例分别为(43.70±8.55)%和(23.00±3.69)%。结论:从胎鼠大脑皮质分离出的细胞可获得呈集落样生长的神经干细胞团,并能表达NSCs的特异性抗原;激光扫描共聚焦显微镜可清晰地观察到培养细胞具有分化为神经元和星形胶质细胞的潜能。; 任大林黄国伟张绪梅刘欢; 关键词：大脑皮质胚胎激光显微镜检查溴脱氧尿苷

叶酸对肌萎缩性侧索硬化症线虫TAR DNA结合蛋白43(TDP-43)毒性的改善作用: 2020年; 为探讨叶酸添加对TAR DNA结合蛋白43(TDP-43)毒性导致的肌萎缩性侧索硬化症(amyotrophic lateral sclerosis,ALS)治疗方面产生的作用,本文选用转入人TDP-43的转基因秀丽隐杆线虫作为受试生物,探究不同浓度叶酸(0.01 mmol/L、0.025 mmol/L、0.05 mmol/L)干预对线虫的寿命、生殖能力、瘫痪率、头部摆动频率、捕食能力与学习记忆能力的影响。结果显示,与对照组相比,0.025mmol/L组和0.05mmol/L组线虫寿命分别提高了22.48%和11.92%;0.025 mmol/L组线虫的生殖能力增加了25.26%;0.01mmol/L组和0.025 mmol/L组线虫的瘫痪率分别降低了20.19%与37.62%;0.025 mmol/L组线虫头部摆动频率在叶酸干预后的第2、4、6 d分别提高了17.14%、32.88%和39.18%;三个干预组线虫的捕食能力分别提高了24.58%、60.30%和15.85%,学习记忆能力也分别提高了36.84%、57.89%和31.58%,上述结果均具有统计学差异(p<0.05)。而且,与0.01 mmol/L组和0.05 mmol/L组比较,0.025 mmol/L组线虫的瘫痪率显著下降,其他指标均显著增加,差异有统计学意义(p<0.05)。以上结果表明,叶酸添加改善了ALS线虫中h TDP-43蛋白引起的毒性效应,并且0.025 mmol/L浓度的叶酸可能是ALS线虫最佳的干预剂量。; 杨柳程曼王梦影梁晓珊张绪梅; 关键词：叶酸肌萎缩性侧索硬化症秀丽隐杆线虫 TAR

研究性学习法在预防医学实验教学中的应用被引量：3: 2014年; 主要阐述将研究性学习法运用于预防医学实验教学的具体过程及教学效果。学生通过提出课题→文献查阅与设计实验→点评设计→实施实验→实验总结→结果评价等环节参与课题研究,自行归纳总结,变被动学习为主动学习,实验操作能力、观察能力、逻辑思维能力、实际解决问题能力以及综合分析能力得到提高,可为创新型人才的培养提供参考。; 赛娜张绪梅吴蕴棠黄国伟; 关键词：研究性学习法实验教学

大鼠脑缺血再灌注后大脑海马区自噬的研究被引量：5: 2016年; 目的检测大鼠脑缺血再灌注后海马神经细胞损伤及自噬变化,并比较海马CA_1及CA_3区的自噬情况。方法用线栓法制作大鼠脑局部缺血再灌注模型,实验动物随机分为:对照组(Control组)、假手术组(Sham组)和大脑中动脉栓塞再灌注组(MCAO组)。HE染色检测大鼠海马神经细胞损伤。透射电镜下观察海马神经元内自噬小体。免疫荧光法检测自噬相关蛋白LC3、Beclin-1的表达水平。结果与Control组及Sham组比较,大鼠脑缺血再灌注后,海马神经细胞损伤严重;海马神经元内有自噬体形成;自噬标记物LC3、Beclin-1蛋白表达水平显著增加,且CA_1区的表达量明显高于CA_3区(差异均具有统计学意义P<0.05)。结论脑缺血再灌注可激活海马神经细胞内的自噬,并进一步引起细胞损伤;模型动物海马CA_1区的自噬水平显著高于CA_3区,暗示CA_1区对脑缺血损伤具有较高的敏感度。; 赵亚倩黄国伟陈爽苟芸张绪梅; 关键词：缺血再灌注自噬海马 LC3 BECLIN-1

胎鼠神经干细胞分离培养和鉴定被引量：5: 2007年; 目的:建立胎鼠神经干细胞体外培养方法,观察神经干细胞生长特点。方法:采用含碱性成纤维细胞生长因子(bFGF)和表皮生长因子(EGF)的无血清培养基对大鼠胚胎大脑组织细胞悬液进行培养,细胞免疫荧光方法对神经干细胞鉴定,MTT法测定不同细胞密度的OD值,绘制生长曲线。结果:从胎鼠脑组织分离培养的细胞巢蛋白阳性。MTT结果显示细胞接种密度以2(×104～105)/ml生长良好(r=0.95,P<0.05)。结论:无血清培养基分离培养的胎鼠脑组织神经干细胞具有自我更新和增殖能力,巢蛋白细胞免疫鉴定为神经干细胞。; 田志红黄国伟姬长珍张绪梅王广雷张文治苏心; 关键词：神经干细胞细胞培养免疫荧光胎鼠

大鼠脑缺血再灌注后线粒体损伤及p-STAT3表达被引量：3: 2016年; 目的:研究大鼠脑缺血再灌注后脑组织线粒体中信号转导和激活子3(STAT3)的表达情况,探讨线粒体中磷酸化STAT3(p-STAT3)与脑缺血后线粒体损伤的关系。方法:线栓法制作大鼠脑局部缺血再灌注模型,大鼠随机分为假手术(SHAM)组和大脑中动脉栓塞再灌注(I/R)组。透射电镜观察皮质区神经元内的线粒体损伤情况。Western blotting及免疫荧光双标法检测线粒体中STAT3及p-STAT3表达。结果:与SHAM组比较,大鼠脑缺血再灌注后,皮质区神经元内的线粒体损伤严重;线粒体中存在STAT3表达,且在脑缺血再灌注后表达量无变化,差异没有统计学意义(P>0.05),而p-STAT3表达显著增加,差异具有统计学意义(P<0.05)。结论:STAT3在大鼠脑组织线粒体中表达,脑缺血再灌注后被显著激活,推测脑缺血再灌损伤后,线粒体中STAT3的激活可能参与了脑缺血再灌注病理生理过程中线粒体的损伤和修复。; 陈爽赵亚倩苟芸黄国伟张绪梅; 关键词：缺血再灌注脑组织线粒体

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