平丽英
- 作品数:4 被引量:8H指数:2
- 供职机构:浙江工业大学更多>>
- 发文基金:国家重点基础研究发展计划国家高技术研究发展计划更多>>
- 相关领域:生物学更多>>
- 酶的分子定向进化及其应用被引量:4
- 2009年
- 酶的分子定向进化是20世纪90年代初兴起的一种蛋白质工程的新策略,是一种在生物体外模拟自然进化过程的、具有一定目的性的快速改造蛋白质的方法。该方法引起了生物催化技术领域的又一次革命。目前分子定向进化技术已被广泛应用于工业、农业及制药业等的相关领域。本文详细综述了酶的分子定向进化的概念、过程、基本策略及其核心技术,并着重介绍了酶的分子定向进化技术在提高酶的活力、稳定性、底物特异性和对映体选择性等几方面的应用及取得的相关成果。
- 平丽英柳志强薛亚平郑裕国
- 关键词:生物催化剂蛋白质工程
- 一种甘油脱水酶基因、载体、工程菌及其应用
- 本发明提供了及一种编码甘油脱水酶的甘油脱水酶基因、含有该基因的重组载体、该重组载体转化得到的重组基因工程菌,以及其在制备重组甘油脱水酶中的应用。该甘油脱水酶基因可与表达载体连接构建得到含该基因的胞内表达重组质粒或分泌表达...
- 郑裕国柳志强平丽英张烽薛亚平沈寅初
- 文献传递
- 罗伊乳酸杆菌甘油脱水酶基因的克隆及其在大肠杆菌中的表达被引量:4
- 2009年
- 迅速升温的生物柴油投资热导致了其副产物甘油的大量积累,这一现状使得开发和利用甘油生产各种精细化工产品备受关注。本实验通过构建基因工程菌来生物转化甘油生产3-羟基丙醛,为甘油下游产品的开发开辟了一条新途径。3-羟基丙醛是一种重要的化学中间体,同时也是一种有效的抗菌剂和生物组织的固定剂,在化学工业中具有广泛的应用前景。实验主要利用甘油脱水酶N末端序列,并根据NCBI中公布的甘油脱水酶的氨基酸序列设计了一对克隆引物,并以菌株罗伊乳酸杆菌Lactobacillus reuteri的基因组DNA为模板进行PCR扩增,获得约为1.6kb的片段,将其克隆到T载体上进行测序,对测序结果进行分析,重新设计两端含有EcoRI和HindIII酶切位点的表达引物,利用PCR扩增得到了甘油脱水酶基因,该基因片段长度为1674bp,编码558个氨基酸。将所得片段定向克隆到pET28b载体中,并转化至大肠杆菌BL21感受态细胞中。经IPTG诱导后,进行SDS-PAGE电泳,在约65kD处检测出一蛋白表达条带,另外还对该重组菌进行比活力测定,最高比活力可达1.14U/mg,比野生型菌株提高了86.88%。
- 平丽英柳志强薛亚平郑裕国
- 关键词:乳酸杆菌甘油脱水酶克隆
- 一种甘油脱水酶基因、载体、工程菌及其应用
- 本发明提供了及一种编码甘油脱水酶的甘油脱水酶基因、含有该基因的重组载体、该重组载体转化得到的重组基因工程菌,以及其在制备重组甘油脱水酶中的应用。该甘油脱水酶基因可与表达载体连接构建得到含该基因的胞内表达重组质粒或分泌表达...
- 郑裕国柳志强平丽英张烽薛亚平沈寅初
- 文献传递