孙鹏
- 作品数:21 被引量:8H指数:2
- 供职机构:军事医学科学院生物工程研究所更多>>
- 发文基金:国家自然科学基金北京市自然科学基金更多>>
- 相关领域:医药卫生生物学轻工技术与工程更多>>
- 一种O抗原糖链延长的甲型副伤寒沙门氏菌及其应用
- 本发明公开了一种O抗原糖链延长的甲型副伤寒沙门氏菌及其应用。该方法包括如下步骤:灭活甲型副伤寒沙门氏菌的O抗原链长控制酶基因cld,得到O‑抗原链长控制酶基因cld缺陷的甲型副伤寒沙门氏菌;使鼠伤寒沙门氏菌O抗原链长控制...
- 吴军孙鹏刘波唱韶红巩新王恒樑朱力潘超冯尔玲
- 文献传递
- 伤寒糖蛋白的生物制备方法及其应用
- 本发明公开了一种伤寒糖蛋白的生物制备方法及其应用。本发明公开一种细菌多糖修饰的蛋白的制备方法,包括将脑膜炎奈瑟球菌O‑寡糖转移酶PglL的底物蛋白与脑膜炎奈瑟球菌O‑寡糖转移酶PglL在O‑抗原连接酶基因缺陷的细菌中共表...
- 王恒樑朱力彭哲慧潘超冯尔玲刘先凯吴军孙鹏曾明王斌
- 文献传递
- 一种细菌多糖结合疫苗的载体蛋白及其应用
- 本发明公开了一种细菌多糖O糖基化修饰的重组霍乱毒素B亚单位融合蛋白及其应用。本发明提供了一种多糖和蛋白的偶联物,由细菌多糖和重组霍乱毒素B亚单位融合蛋白偶联而成;所述细菌多糖以O-糖苷键形式连接在所述重组霍乱毒素B亚单位...
- 吴军孙鹏王恒樑潘超刘波朱力唱韶红巩新曾明
- 文献传递
- 伤寒糖蛋白的生物制备方法及其应用
- 本发明公开了一种伤寒糖蛋白的生物制备方法及其应用。本发明公开一种细菌多糖修饰的蛋白的制备方法,包括将脑膜炎奈瑟球菌O-寡糖转移酶PglL的底物蛋白与脑膜炎奈瑟球菌O-寡糖转移酶PglL在O-抗原连接酶基因缺陷的细菌中共表...
- 王恒樑朱力彭哲慧潘超冯尔玲刘先凯吴军孙鹏曾明王斌
- 一种细菌多糖修饰的重组融合蛋白的制备方法及其应用
- 本发明公开了一种细菌多糖修饰的重组融合蛋白的制备方法及其应用。本发明公开一种细菌多糖修饰的重组融合蛋白的制备方法,是将重组融合蛋白和脑膜炎奈瑟球菌O‑寡糖转移酶PglL在O‑抗原连接酶基因缺陷的细菌中共表达,脑膜炎奈瑟球...
- 吴军潘超孙鹏王恒樑刘波彭哲慧朱力唱韶红巩新冯尔玲王斌曾明
- 文献传递
- 生物法合成伤寒O-糖蛋白结合疫苗及其免疫原性评估被引量:3
- 2015年
- 伤寒由伤寒沙门氏菌(Salmonella Typhi)引发,至今在发展中国家仍是备受关注的重要公共卫生问题。文章通过敲除伤寒菌脂多糖合成途径中O-抗原连接酶基因,转入含脑膜炎奈瑟球菌(Neisseria meningitidis)蛋白糖基化途径中糖基转移酶的表达载体,以及改构的重组铜绿假单胞菌(Pseudomonas Aeruginosa)外毒素A(r EPAN29)的表达载体,使细胞内能够诱导合成以伤寒O特异性多糖(O-specific polysaccharides,OPS)为目标抗原、以r EPAN29为载体蛋白的伤寒OPS-r EPAN29糖蛋白复合物,并对纯化所得复合物进行了免疫原性评价。ELISA测定血清抗体滴度表明,r EPAN29作为载体蛋白能有效增加糖链的免疫原性,糖蛋白比单独的多糖能诱导产生更好的免疫应答;3次免疫、间隔3周比间隔2周Ig G滴度稍有提高;而免疫过量的糖蛋白,抗O-多糖的血清抗体效价并无提升。文章为生物法制备多糖-蛋白结合疫苗提供了新思路,理论上也适用于其他革兰氏阴性菌的疫苗研发。
- 彭哲慧潘超孙鹏冯尔玲吴军朱力彭清忠王恒樑
- 关键词:结合疫苗伤寒沙门氏菌合成生物学
- 预防和治疗鲍曼不动杆菌所致疾病疫苗及其制备方法
- 本发明公开了预防和治疗鲍曼不动杆菌所致疾病疫苗及其制备方法。本发明公开的预防和治疗鲍曼不动杆菌所致疾病疫苗,活性成分为将SEQ ID No.1的第20‑156位或SEQ ID No.1的第1‑156位所示的蛋白质糖基化得...
- 王恒樑刘志成潘超朱力吴军冯尔玲刘先凯孙鹏王东澍曾明王斌井申荣
- 文献传递
- 可被O-糖基化修饰的多肽
- 本发明公开了可被O-糖基化修饰的多肽。本发明所提供的多肽为:a1)序列为W-P-Xn-S-Ym的多肽;a2)含有a1)所述序列的多肽;其中,Xn为1或2或3或4个氨基酸,Ym为1或2或3个氨基酸;所述氨基酸中的氨基酸为2...
- 王恒樑潘超朱力吴军冯尔玲刘先凯孙鹏王东澍曾明王斌
- 用大肠杆菌制备O157多糖-菌毛蛋白结合物的研究被引量:2
- 2013年
- 目的以大肠杆菌O157型多糖与菌毛蛋白PilE为模型,在大肠杆菌中重构脑膜炎奈瑟球菌的O-糖基化修饰系统,为建立一步生物交联法制备多糖-蛋白结合疫苗技术提供基础。方法用Red重组技术敲除大肠杆菌W3110的O抗原连接酶基因waaL,构建CLM24菌株。在该菌株中共表达脑膜炎奈瑟球菌菌毛蛋白基因pilE、寡糖转移酶基因pglL,构建O-糖基化修饰系统。分别转化大肠杆菌鼠李糖转移酶基因wbbL与大肠杆菌O157型多糖表达载体于构建了O-糖基化修饰系统的大肠杆菌,再利用Western印迹检测菌毛蛋白PilE的修饰情况。结果利用抗His-tag单抗进行Western印迹检测,16℃IPTG诱导条件下,转化大肠杆菌鼠李糖转移酶基因wbbL于构建了O-糖基化修饰系统的大肠杆菌,重组菌CLM24/pMMB66EH-pilE-his/pETtac28-wbbL-pglL与其他对照菌相比,不仅在相对分子质量为19×103处有特异性条带,而且在相对分子质量(40~60)×103处也出现了特异的梯状条带;转化大肠杆菌O157的O多糖基因簇克隆载体于构建了O-糖基化修饰系统的大肠杆菌,重组菌CLM24/pMMB66EHpilE-his/pETtac28-pglL/pACYC184-O157用抗O157多抗和抗His-tag单抗进行Western印迹检测,在相对分子质量(40~60)×103处均产生特异的梯状条带。结论在大肠杆菌中重建的O-糖基化修饰系统可以利用自身的O16型O多糖或异源的O157型O多糖修饰菌毛蛋白PilE,获得多糖-蛋白结合物。本研究为建立一步生物交联法制备多糖-蛋白结合疫苗提供了技术基础。
- 徐敏锐孙鹏张部昌刘波吴军
- 关键词:PILE大肠杆菌
- 一种细菌多糖结合疫苗的载体蛋白及其应用
- 本发明公开了一种细菌多糖O糖基化修饰的重组霍乱毒素B亚单位融合蛋白及其应用。本发明提供了一种多糖和蛋白的偶联物,由细菌多糖和重组霍乱毒素B亚单位融合蛋白偶联而成;所述细菌多糖以O‑糖苷键形式连接在所述重组霍乱毒素B亚单位...
- 吴军孙鹏王恒樑潘超刘波朱力唱韶红巩新曾明
- 文献传递