孙萌
- 作品数：4 被引量：17H指数：3
- 供职机构：华中科技大学同济医学院更多>>
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- RNA干扰下调钙调蛋白激酶Ⅱ_δ表达对血管紧张素Ⅱ诱导心肌细胞肥大的影响被引量：2
- 2008年
- 目的:用RNA干扰技术下调乳鼠心肌细胞钙调蛋白激酶Ⅱδ(CAMKⅡδ)的表达,观察CAMKⅡδ对心肌细胞肥厚及细胞内钙浓度的影响。方法:构建针对CAMKⅡδ基因的特异性短发夹RNA(shRNA)编码序列的质粒载体pCAMKⅡδshRNA-1,pCAMKδshRNA-2,以含非特异性shRNA编码序列的质粒载体pGenesil-HK(pHK)为对照,转染原代培养的乳鼠心肌细胞,通过半定量RT-PCR和Western blot法检测CAMKⅡδ表达情况,以内参照GAPDH进行标化。用钙荧光指示剂Fura-2/AM结合图像分析各组心肌细胞内钙离子浓度,用3H-LEU掺入量来检验各组心肌细胞在血管紧张素Ⅱ(AngⅡ)刺激下促心肌细胞肥大效应的影响。结果:①pCAMKⅡδshRNA-1使CAMKⅡδ的mRNA和蛋白质表达较对照组分别降低62%和50%,pCAMKⅡδshRNA-2使之分别降低40%和35%,差异有统计学意义。pHK与空白对照组CAMKⅡδ表达差异无统计学意义。②给予AngⅡ(10-7mol/L)刺激48h后,pCAMKⅡδshRNA-1,pCAMKⅡδshRNA-2组的3H-LEU掺入量和细胞内钙浓度显著低于空白对照组和对照质粒(P<0.01)。结论:RNA干扰技术能选择性下调原代培养的乳鼠心肌细胞CAMKⅡδ的表达,并显著抑制AngⅡ的促细胞肥大和促细胞内钙超载的效应。
- 王岚吕家高张存泰孙萌刘念阮燕菲王琳
- 关键词：心肌肥厚RNA干扰质粒转染
- 急性冠状动脉综合征患者的CD4^＋CD28nullT淋巴细胞电压门控性Kv1．3钾通道数量增加被引量：8
- 2008年
- 目的运用膜片钳技术检测急性冠状动脉综合征（ACS）患者的CD4^＋CD28^nullT淋巴细胞Kv1．3钾通道的数量是否增加，探讨CD4^＋CD28^nullT淋巴细胞上Kv1．3钾通道的表达。方法选择17例ACS患者，11例年龄、性别匹配的正常体检者作为对照。运用荧光染色标记及膜片钳技术检测单个T淋巴细胞（CD4^＋CD28砌。T淋巴细胞和CD4^＋CD28^＋T淋巴细胞）上Kv1．3钾通道的数量，比较Kv1．3通道在两种细胞上的差别。结果ACS患者的CD4^＋CD28^null T淋巴细胞比例为（6．97±2．05）％，明显高于对照组的（1．38±0．84）％（P〈0．05）。ACS患者的CD4^＋CD28^null T淋巴细胞数量与hsCRP浓度呈正相关（r=0．52，P〈0．05）。ACS患者CD4^＋CD28^nullT淋巴细胞Kv1．3通道的电导、密度、数量明显高于对照组CD4^＋CD28^nullT淋巴细胞（P〈0．01）。而两组CD4^＋CD28^＋T淋巴细胞间Kv1．3通道的电导、密度、数量差异无统计学意义（P〉0．05）。结论ACS患者CD4^＋CD28^nullT淋巴细胞明显增多。ACS患者CD4^＋CD28“T淋巴细胞上Kvl．3钾通道数量比自身和对照的CD4^＋CD28^＋T淋巴细胞明显增多，CD4^＋CD28^nullT淋巴细胞的功能可能与Kv1．3钾通道增多相关。
- 黄深唐家荣张存泰孙莉萍郭丽芬孙萌
- 关键词：钾通道电压门控T淋巴细胞
- 抗心律失常肽在兔肥厚心肌心律失常中的作用被引量：4
- 2008年
- 目的:研究缝隙连接开放剂抗心律失常肽(AAP10)抗肥厚心肌室性心律失常的作用并探讨缝隙连接蛋白43(Cx43)与心律失常的关系。方法:30只日本大耳白兔随机分为假手术组(Sham组)、左室肥厚组(LVH组)、AAP10组。LVH组和AAP10组行腹主动脉缩窄术,Sham组开腹但不行腹主动脉缩窄术。术后喂养8周。制备左室楔形心肌块灌注模型。Sham组和LVH组灌注正常台式液,AAP10组灌注含100 nmol/L的AAP10台式液。利用浮置玻璃微电极法同步记录楔型心肌块跨壁心电图和内外膜心肌细胞跨膜动作电位,程序电刺激起搏,记录早期后除极及室性心律失常的发生率。采取Western blot检测3组Cx43表达;采取免疫荧光方法显示3组Cx43的分布。结果:Sham组、LVH组、AAP10组室性心律失常的发生率分别为0、40%、10%。与Sham组相比,LVH组Cx43表达下降(50.7±6.1)%(P<0.05),AAP10组与LVH组相比,Cx43表达上升(20.9±4.7)%,P<0.05。免疫荧光显示肥厚心肌Cx43分布紊乱,由正常的端端分布成为细胞表面随机分布,加入AAP10后可改善其分布。结论:肥厚心肌有较高的心律失常发生率,肥厚心肌细胞Cx43表达下降并且排列紊乱,AAP10可提高Cx43的表达及改善其分布,降低室性心律失常的发生率。
- 孙萌张存泰贺莉黄深王岚黄琼
- 关键词：心肌肥厚连接蛋白类心律失常抗心律失常肽
- 抗心律失常肽对兔长QT综合征模型室性心律失常的影响被引量：4
- 2008年
- 目的:观察缝隙连接激动剂抗心律失常肽(AAP10)对兔长QT综合征(LQTS)模型室性心律失常的影响并探讨其作用机制。方法:应用心肌细胞钠通道开放剂海葵毒素(ATX-Ⅱ,20 nmol/L)在兔左室楔型心肌块建立LQTS模型,随机分为正常组、LQTS组、AAP-100组和AAP-500组,采用浮置玻璃微电极法同步记录心内膜、心外膜心肌细胞跨膜动作电位及跨室壁心电图。通过免疫印迹法(Western blot)反映心肌细胞缝隙连接蛋白43(Cx43)去磷酸化水平的变化。结果:LQTS组QT间期和跨室壁复极离散度(TDR)与正常组相比较显著增大,早期后除极(EAD),R-on-T期前收缩和尖端扭转性室性心动过速(TdP)发生率也显著高于正常组,并伴有Cx43去磷酸化水平增高(均P<0.01)。在LQTS模拟状态下,AAP-500组QT间期和TDR显著缩短(均P<0.01),EAD、R-on-T和TdP发生率显著小于LQTS组(P<0.01、P<0.01、P<0.05),并伴随Cx43去磷酸化水平降低(P<0.01)。结论:缝隙连接激动剂AAP10能通过防止Cx43去磷酸化来减少兔LQTS模型TDR和室性心律失常发生率,说明缝隙连接可能参与了兔LQTS模型TDR的形成。
- 全小庆张存泰吕家高马金王岚李连东冯达应黄深孙萌程冕
- 关键词：心律失常长QT综合征抗心律失常肽连接蛋白类动作电位
