吴驰
- 作品数：1 被引量：10H指数：1
- 供职机构：中南大学湘雅医学院分子生物学研究中心更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金更多>>
- 相关领域：生物学更多>>
- 东方田鼠骨髓基因池的构建及抗日本血吸虫抗性相关基因的筛选被引量：10
- 2004年
- 利用表达克隆法,从东方田鼠骨髓细胞中克隆出抗日本血吸虫抗性相关基因.首先提取高质量的mRNA,逆转录成cDNA,将cDNA与哺乳动物细胞瞬时表达载体pcDNA1.1/Amp连接,建立表达cDNA文库;将cDNA文库分成A-H8个基因池,转染HEK293细胞,48h后收集培养上清,获得条件培养基.将条件培养基与日本血吸虫童虫一起培养,观察杀虫效应,取对童虫抑制作用最强的基因池E再分成8个亚基因池E1-8,分别转染HEK293细胞,并将条件培养基与血吸虫童虫一起培养,获得具有明显抑制血吸虫童虫活性的亚基因池E77,按上述方法反复进行筛选,直到获得有抑制作用的单个克隆,该技术的建立为克隆东方田鼠抗日本血吸虫抗性相关基因以及研究其作用机制奠定基础.
- 秦志强胡维新邬国军许冰申群喜龚强吴驰
- 关键词：东方田鼠日本血吸虫抗性相关基因
