【目的】揭示小鼠卵泡膜细胞成熟过程中DNA甲基转移酶(Dnmts)表达的变化,并初步探讨其可能的机制。【方法】对新生昆明白小鼠第3、5及8天(days post parturition,dpp3、dpp5和dpp8)的卵巢进行切片,经H.E染色,分别观察原始、初级、次级卵泡膜细胞的形成情况,统计各级卵泡的比例并对卵泡外缘的膜细胞进行计数;半定量PCR检测成熟膜细胞特异性表达基因CYP17A1及Dnmts转录水平在dpp3、dpp5、dpp8卵巢中的变化;免疫组化观察Dnmt1蛋白在dpp3、dpp5、dpp8小鼠卵巢中的分布情况。【结果】小鼠dpp3卵巢中的初级卵泡外缘存在"梭形细胞";随出生后时间的推移,原始卵泡比例持续下降(P<0.01),次级卵泡比例持续升高(P<0.01),dpp3、dpp5初级卵泡比例无显著差异(P>0.05),而dpp8下降(P<0.05);初级卵泡周围"梭形细胞"数量的平均水平在dpp3和dpp5无显著差异(P>0.05),在dpp8上升(P<0.05);次级卵泡周围"梭形细胞"数量的平均水平在dpp3和dpp5无显著差异(P>0.05),在dpp8上升(P<0.01)。CYP17A1转录水平在dpp3、dpp5极低且无显著差异(P>0.05),在dpp8升高(P<0.01);Dnmt1s转录水平在dpp3、dpp5、dpp8持续升高(P<0.01);Dnmt1o转录水平在dpp5升高(P<0.05),在dpp8下降(P<0.01);Dnmt3a转录水平在dpp5升高(P<0.01),dpp3和dpp8转录水平无显著差异(P>0.05)。Dnmt1免疫组化显示,卵泡颗粒细胞在dpp5、dpp8卵巢中着色呈阳性,dpp3则呈阴性;同时,"梭形细胞"在dpp3、dpp5卵巢中着色呈阴性,dpp8则呈阳性。【结论】膜细胞成熟可能导致Dnmt3a转录水平下降。Dnmt1s转录及表达水平在膜细胞成熟前较低,分化成熟后上调从而在膜细胞增殖过程中维持新建立的甲基化模式。
