刘杉杉
- 作品数：7 被引量：34H指数：4
- 供职机构：中国农业科学院哈尔滨兽医研究所兽医生物技术国家重点实验室更多>>
- 发文基金：中央级公益性科研院所基本科研业务费专项国家自然科学基金国家重点实验室开放基金更多>>
- 相关领域：农业科学更多>>
- 猪捷申病毒、猪瘟病毒和猪繁殖与呼吸综合征病毒的多重RT-PCR检测方法的建立及应用被引量：12
- 2011年
- 为建立同时检测猪捷申病毒(PTV)、猪瘟病毒(CSFV)和猪繁殖与呼吸综合征病毒(PRRSV)的多重RT-PCR(mRT-PCR)检测方法,本研究以PRRSV ORF6基因、CSFV Erns基因和PTV 5'-UTR基因为对象,建立检测3种病毒的mRT-PCR方法。特异性试验表明,该方法可以特异扩增3种病毒的基因,对大肠杆菌、猪圆环病毒Ⅱ型、猪细小病毒、猪伪狂犬病毒和猪流感病毒呈阴性反应;敏感性试验表明,PRRSV、CSFV和PTV的最低核酸检出量分别为7.11×102拷贝、7.81×103拷贝和8.43×102拷贝,略低于单一RT-PCR敏感性;应用该方法对69份送检样品进行检测,其中PRRSV、CSFV和PTV单纯感染检出率分别为28.99%、27.54%和56.52%,PRRSV和CSFV混合感染检出率为4.35%,PRRSV和PTV的混合感染检出率为11.59%,CSFV和PTV的混合感染检出率为13.04%,3种病毒的混合感染检出率为8.70%,与单一RT-PCR检测结果符合率为98.6%。本研究建立的检测方法快速简便,可以用于疾病的初步筛选,对临床早期诊断和流行病学调查具有重要意义。
- 刘杉杉赵亚荣胡峰吕超超胡泉博王贵华崔尚金
- 关键词：猪繁殖与呼吸综合征病毒猪瘟病毒猪捷申病毒
- 检测猪捷申病毒抗体的间接免疫荧光方法的建立与初步应用被引量：12
- 2011年
- 为建立检测猪捷申病毒(PTV)抗体的方法,本研究利用PTV-8 Jilin/2003株为抗原,建立了检测PTV抗体的的间接免疫荧光技术(IFA)方法。该方法工作浓度分别是:一抗最适稀释度为1∶10;FITC标记二抗最适稀释度为1∶100;二抗中伊文氏兰最适稀释度为1∶30 000。敏感性试验、特异性试验表明该抗原板可以检出包含PTV-8型和1型在内的的所有PTV阳性血清,方法敏感、特异。与SN符合率94.0%。用该方法对黑龙江、山东、天津和河南等地的1 500份临床血清样品进行检测,阳性检出率为55.8%,表明我国猪群中PTV的感染已经非常普遍。该方法做为PTV的血清学诊断新技术,为开展PTV分子流行病学调查奠定了基础。
- 刘芹防刘杉杉张超范崔尚金
- 关键词：猪捷申病毒间接免疫荧光抗体检测
- 猪伪狂犬病病毒野毒环媒恒温检测方法的建立及应用
- 环媒恒温检测方法(LAMP)是一种快速简便特异的检测方法,已广泛应用于多种细菌病和病毒病的检测。本实验成功建立了检测猪伪狂犬病病毒(PRV)野毒的LAMP检测方法。利用该方法所建立的反应体系在恒温65℃水浴锅中作用60 ...
- 张超范崔尚金刘杉杉胡泉博
- 关键词：猪伪狂犬病病毒
- 文献传递
- 猪捷申病毒检测方法的建立及应用
- 猪捷申病毒(PTV)属于小RNA病毒科捷申病毒属,目前至少有11个血清型,每个血清型引起的临床症状不尽相同。PTV感染猪后主要引起猪的非化脓性脑脊髓炎、繁殖障碍、肺炎、下痢、心包炎、心肌炎和皮肤损伤等。PTV最早暴发于欧...
- 刘杉杉
- 关键词：猪捷申病毒临床症状特异性敏感性
- 文献传递
- 检测猪捷申病毒、猪瘟病毒和猪繁殖与呼吸综合征病毒的多重RT-PCR方法的建立及应用
- 猪繁殖与呼吸综合症病毒(PRRSV)、猪瘟病毒(CSFV)和猪捷申病毒(PTV)是严重危害中国养猪业的重要病毒，经常继发或者混合感染。为了建立同时检测PTV、CSFV和PRRSV的多重RT-PCR(mRT-PCR)检测方...
- 刘杉杉赵亚荣吕超超王贵华胡峰蔺文成王晓玲崔尚金
- 关键词：猪繁殖障碍RNA病毒多重RT-PCR检测
- 文献传递
- 猪捷申病毒8型rVP1-ELISA检测方法的建立被引量：8
- 2012年
- 为建立猪捷申病毒(PTV)抗体的间接ELISA检测方法,将PTV-8VP1基因克隆至原核表达载体pET-30a中,重组质粒转化大肠杆菌Rosetta表达重组的VP1蛋白。SDS-PAGE及Western-blot分析结果表明,表达的重组蛋白分子质量约为36.2ku,且能被PTV-8阳性血清特异性识别。以纯化的重组蛋白包被ELISA反应板,建立了检测PTV抗体的间接ELISA方法。特异性试验结果表明,重组VP1蛋白与猪繁殖与呼吸综合征病毒、猪伪狂犬病病毒、猪细小病毒、猪圆环病毒2型和猪瘟病毒阳性血清不发生反应。敏感性试验结果表明血清稀释至1∶800时仍检测为阳性。该方法的批内、批间变异系数均小于10%,表明具有较好的重复性。利用建立的方法对633份临床样品进行检测,阳性率是88.10%。选取58份临床样品与间接免疫荧光方法作比对试验,两者的符合率是94.80%。
- 胡峰刘杉杉蔺文成王晓玲张超范王朝刘朝霞胡泉博崔尚金
- 关键词：猪捷申病毒原核表达间接ELISA
- 猪细小病毒抗体IPMA检测方法的建立及应用被引量：9
- 2011年
- 建立了一种检测猪细小病毒(PPV)血清抗体的免疫过氧化物酶单层细胞试验(IPMA),对该方法的反应条件、特异性、敏感性和重复性进行了系统试验,并与HI和ELISA的检测结果进行了比较。结果显示,PPV种毒按照1∶100的剂量接种后第48小时固定效果最佳,辣根过氧化物酶-葡萄球菌A蛋白标记物的最适稀释度为1∶1 000,待检血清最适稀释度为1∶100。该IPMA方法与PCV2、PRV、PRRSV和CSFV的参考血清无交叉反应;PPV阳性血清稀释至1∶1 600时仍能检出;批内和批间重复性试验表明,该方法具有良好的重复性。符合性试验结果表明,该IPMA方法与HI和ELISA的符合率分别为96.0%与98.0%。用建立的IPMA方法检测PPV灭活疫苗免疫猪,结果免疫后第2周开始阳转,5周后全部阳转。对现地送检的400份猪血清样本进行检测,结果平均检出阳性率为86.5%。该IPMA方法的建立使PPV的血清学快速检测成为可能,可以用此方法开展PPV的抗体流行病学普查。
- 刘杉杉赵亚荣张超范吕超超胡泉博崔尚金
- 关键词：猪细小病毒抗体检测
