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猪囊虫TS21抗原DNA接种小鼠的免疫应答被引量：1: 2003年; 将 4 0只BALB/c小鼠随机分为 2组 ,A组以VR10 2 0免疫作为对照 ,B组以TS2 1抗原基因的真核表达型质粒VTS2 1免疫。用ELISA检测免疫小鼠IgG总量和特异性抗体水平 ,MTT比色法检测小鼠脾淋巴细胞伴刀豆蛋白A(ConA)刺激的增殖反应及IL 2的诱生活性 ,常规法检测外周血免疫细胞数量的动态变化。结果显示 ,VTS2 1免疫小鼠血清的IgG含量和特异性抗体效价显著高于对照组小鼠 ;免疫小鼠脾淋巴细胞ConA刺激增殖反应和IL 2诱生活性均比对照组小鼠显著增强 ;免疫小鼠的淋巴细胞、巨噬细胞等免疫细胞的数量也显著超过对照组。免疫小鼠的细胞和体液免疫反应显著增强 ,表明VTS2 1具有很强的免疫激活作用。; 巫雪艳高荣沈斌孟民杰沈翼李江凌武梅唐漫书郑勇刘崑魏竹波王克非刘世贵; 关键词：小鼠免疫应答 MTT比色法猪带绦虫囊虫

一株拮抗姜瘟青枯劳尔氏菌的泛菌的分离及鉴定被引量：7: 2007年; 从生姜田土中分离到一株对姜瘟青枯劳尔氏菌(Ralstonia solanacarum)有强拮抗作用的泛菌菌株Q6,对该菌株进行了形态特征、培养特征、生理生化特征的鉴定及16S rDNA序列的分析.以16S rDNA序列为基础构建了包括12株相关种属细菌在内的系统发育树,其中与11个泛菌属的菌株的16S rDNA序列的同源性为95.54%～99%.; 刘润叶杨土凤陈晓梅刘世贵刘崑龙章富

牛蛙生长激素基因cDNA克隆及在大肠杆菌中的表达被引量：1: 2007年; 以成体牛蛙脑垂体总RNA为模板进行RT-PCR,克隆到牛蛙生长激素基因(bullfroggrowth hormone,bfGH)cDNA编码序列,其长度为651 bp,编码的前体GH蛋白序列经BLAST分析,与已报道的牛蛙GH蛋白质序列AAB24792、AAB19428、CAA31038的同源性分别为98.1%、96.3%、95.3%,其在Genbank的登录号为AY251538;将bfGH亚克隆到原核表达载体pGEX1-λt构建成牛蛙GH原核表达载体VGBfGH,转化BL21(DE3)E.coli得到重组菌,0.01 mol/L的IPTG进行诱导表达,经SDS-PAGE分析,bfGH表达率达到29.3%,融合蛋白的分子量为51 kDa.回收BfGH融合蛋白注射免疫家兔获得兔抗血清,以其为一抗,经ELISA-RA检测分析表明回收的重组蛋白能与牛蛙肝膜受体蛋白结合.; 张海英喻麟刘海华刘崑刘世贵龙章富; 关键词：牛蛙生长激素克隆原核表达

几丁质酶产生菌C4发酵培养基优化及其对Bt的增效作用研究被引量：9: 2007年; 为提高几丁质酶产生菌C4的产酶效率,加强其对Bt(Bacillus thuringiensis)的增效作用,本研究通过培养基优化,筛选出了该菌发酵优化培养基,配方为:蛋白胨0.8%,酵母膏0.8%KNO30.8%,MgSO40.05%,KH2PO40.03%,pH 7.5.28℃,180 r/min,培养48 h至对数期,加入1.0%的胶体几丁质,诱导C4菌产生几丁质酶.在此条件下,C4菌产酶周期由5 d缩短为4 d;几丁质酶活力由2.68 U/mL提高到5.95 U/mL.用此发酵菌液与Bt菌液等量混合使用,Bt的杀虫效果提高了47.8%.; 丁秀琼张莉刘世贵刘崑龙章富; 关键词：几丁质酶

猪囊尾蚴抗原基因TS11的真核表达研究被引量：2: 2003年; 将猪囊尾蚴抗原基因 TS11亚克隆至 VR10 2 0真核表达载体中 ,用菌落原位杂交法筛选重组质粒 ,将其转染 COS7细胞 ,以 Northern Blotting检测插入片段的转录 ;用 EL ISA检查其翻译表达产物。结果表明 :VTS11在真核细胞中能够转录TS11基因的 m RNA;其蛋白表达产物能为兔抗猪囊虫高免血清所识别 ,在转染真核细胞 2 4 h后 ,即可检测到正确表达的猪囊尾蚴抗原蛋白。这些为深入研制猪囊虫的 DNA疫苗奠定了可靠的基础。; 沈翼高荣沈斌武梅孟民杰唐漫书李江凌郑勇刘崑魏竹波王克非刘世贵; 关键词：猪囊尾蚴抗原基因真核表达人畜共患病

阳离子PLG纳米颗粒包裹对CpG序列免疫佐剂效应影响的研究被引量：3: 2003年; 本试验制备了聚乙交酯丙交酯(PLG)纳米颗粒,比较了阳离子PLG纳米颗粒和脂质体作为载体包裹CpG分子对小鼠体液和细胞免疫反应的影响。结果发现,阳离子PLG纳米颗粒包裹CpG能显著提高免疫小鼠总IgG,增加小鼠免疫细胞数量,增强淋巴细胞增殖活性及白细胞介素-2的诱生活性。它同阳离子脂质体作为包裹分子的效应相似或较强,能显著提高裸CpG质粒的免疫增强活性。; 吕学斌李江凌高荣武梅吴凯源王丽焕沈翼刘崑郑勇刘世贵; 关键词：聚乙交酯丙交酯体液细胞免疫反应阳离子脂质体 CPG序列传染性疾病防治

藏猪γ-干扰素基因cDNA的克隆及序列分析被引量：10: 2003年; 将藏猪外周血淋巴细胞进行体外培养 ,在ConA的刺激下培养 70h后 ,提取培养的淋巴细胞总RNA ,应用RT PCR技术扩增藏猪淋巴细胞γ 干扰素cDNA(TPγ INF) ,并克隆到 pMD T载体上 ,进行测序。结果显示 :克隆的TPγ INFcDNA全长为 5 45个碱基 ,ORF为 5 0 1个碱基 ,编码 16 6个氨基酸 ,分子量为 19.4ku ,等电点为 10 .2 9。此cDNA与牛、马的γ INF同源性分别为86 %和 81% ,与猪的γ INF同源性为 10 0 % ,证明克隆到了藏猪的γ 干扰素cDNA。; 李惠高荣武梅丁晓涛王丽焕李平李波余庆郑勇刘崑刘世贵; 关键词：藏猪 CDNA 同源性比较

CpG序列对副伤寒疫苗免疫小鼠应答反应的影响被引量：2: 2003年; 研究了CpG序列作为分子免疫增强剂 ,对常规副伤寒疫苗免疫小鼠后 ,小鼠体液和细胞免疫反应的变化情况。试验结果显示 ,CpG序列作为免疫增强剂 ,可以使免疫小鼠的总IgG含量、血清特异性抗体效价、淋巴细胞IL 2的诱生活性和脾淋巴细胞的增殖反应有明显的提高。结果表明 ,CpG序列能显著增强免疫动物对常规疫苗的免疫应答反应水平。; 吕学斌李江凌高荣武梅吴凯源王丽焕沈翼刘崑郑勇刘世贵; 关键词：CPG序列小鼠免疫应答

藏猪白细胞介素4基因cDNA的克隆及序列分析被引量：7: 2003年; 目的 :克隆藏猪白细胞介素 4基因cDNA。方法 :从体外ConA刺激 70小时的藏猪外周血淋巴细胞中提取总RNA ,应用RT PCR技术扩增 ,pMD T载体连接 ,常规转化后 ,进行酶切及序列测定进行鉴定。结果 :研究表明克隆得到的IL 4基因cDNA与成华猪的IL 4同源性达到 99% ,与长白杂交猪的同源率为 98%。结论 :从藏猪外周血淋巴细胞中成功地分离到IL 4基因。; 李惠高荣武梅王丽焕丁晓涛李平李波余庆郑勇刘崑刘世贵; 关键词：藏猪白细胞介素4 基因CDNA 克隆

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刘崑