刘和平 作品数:12 被引量:68 H指数:4 供职机构: 东南大学 更多>> 发文基金: 国家自然科学基金 国家高技术研究发展计划 国家重点基础研究发展计划 更多>> 相关领域: 医药卫生 生物学 理学 更多>>
可用于非标记检测的固相化核酸探针 本发明公开了一种可用于非标记检测的固相化核酸探针,包括固体载体,在固体载体上固定包含有荧光基团、荧光淬灭基团和特异性核酸识别序列片断的寡核苷酸探针,该探针中荧光基团和荧光淬灭基团的相对物理位置为能使荧光淬灭位置;当靶基因... 陆祖宏 刘和平 王宏文献传递 寡核苷酸阵列芯片快速鉴定大肠杆菌O_(157):H_7初步研究 被引量:3 2006年 目的设计、制作一种微型化寡核苷酸阵列芯片,评价快速鉴定肠出血性大肠杆菌O157:H7的效果。方法多重PCR扩增大肠杆菌O157:H7七个特异性基因位点(rfbEf、licH7i、ntimin、Shiga-like toxins I and II、hemolysin A和uidA),通过PCR反应掺入SpectrumOrangTM-dUTP获取荧光标记的靶序列,与制备的芯片寡核苷酸探针杂交。结果寡核苷酸阵列芯片检测结果与试验预期相符,获取的杂交图分辨效果明显优于多重PCR琼脂糖凝胶电泳。结论基于玻片的寡核苷酸阵列芯片制作简便,鉴定病原菌检测细菌毒力因子快速、灵敏、特异,有良好的应用前景。 史智扬 刘和平 汪华 郭喜玲 顾玲 曾晓燕 何农跃 陆祖宏关键词:大肠杆菌 O157 H7 毒力因子 多重PCR 高压往复泵组合阀 本发明涉及高压往复泵组合阀,改善阀板与阀杆配合的导向性能和阀组的过流性能,泵体与阀座间构成低压进液腔、工作腔和高压排液腔,阀座上有进液阀板、排液阀板,阀杆的杆端分别设置进液阀盖和排液阀盖,阀杆上设置的供进液阀板、排液阀板... 叶晓琰 许建强 刘和平 杨孙圣文献传递 一种基于寡核苷酸微阵列芯片的多重可扩增探针杂交技术 被引量:4 2004年 多重可扩增探针杂交技术 (multiplexamplifiableprobehybridization ,MAPH)是近年来发展起来的一种用于基因组中DNA拷贝数检测的新技术。并发展了一种基于寡核苷酸微阵列芯片的MAPH技术。该方法根据所检测的DNA序列 ,制备若干具有通用引物的PCR产物作为可扩增探针组 ,与固定在尼龙膜上待测的基因组DNA杂交。用磁珠回收特异性杂交的探针 ,经生物素标记的通用引物扩增后 ,与相应的寡核苷酸微阵列芯片杂交。该特异性的寡核苷酸微阵列芯片包括 10个抗肌营养不良基因的外显子探针和阴性、阳性探针。杂交清冼后 ,链霉亲和素 Cy3染色用芯片扫描仪得到杂交的荧光图像。分析荧光信号的强度差异给出特定基因片段拷贝数的变化。该方法用微阵列技术代替MAPH中的电泳检测技术 ,可大幅度增加检测的通量。选择了一个正常男性、一个正常女性和一个肌营养不良症患者的基因组DNA来进行验证。结果表明 。 刘和平 王宏 陆祖宏 刘小平 夏昆 夏家辉关键词:DMD/BMD 多重PCR 江苏省传染性非典型肺炎病原学检测研究 2006年 目的:建立传染性非典型肺炎(SARS)实验室检测方法,为SARS病例诊断和现场防治提供依据。方法:用逆转录套式PCR、实时荧光定量PCR检测SARS病毒核酸;酶联免疫法检测血清标本SARS病毒IgM抗体;部分PCR检测阳性或SARS病毒IgM抗体阳性病例的标本进行直接电镜观察;简并引物PCR检测冠状病毒属病毒核酸;鉴别诊断IFA检测血清中肺炎支原体等9种常见呼吸道感染病原IgM抗体,PCR检测军团菌以及甲、乙型流感病毒核酸。结果:检测各类临床标本506份。2003年全省报告临床诊断病例7例,5例检测结果阳性;逆转录套式PCR检测各类标本132份,阳性8份;对其中4份PCR扩增产物(108bp)进行了序列分析,与SARS病毒序列100%同源;实时荧光定量PCR检测各类标本30份,阳性3份;酶联免疫法检测血清标本101份,SARS病毒IgM抗体阳性4份;3个诊断病例的各类标本电镜检查发现冠状病毒样颗粒;IFA检测血清标本75份,嗜肺军团菌IgM抗体阳性9份,乙型流感IgM抗体阳性11份,两者同时阳性3份,其他病原体IgM抗体均为阴性。不明发热病例的标本21份简并引物PCR检测冠状病毒,2份咽拭子标本阳性;漱口液、尿液标本各15份PCR检测军团菌、漱口液25份PCR检测甲、乙型流感病毒结果均为阴性。结论:本研究建立的检测方法与临床诊断有比较好的符合性,对于临床诊断和防治工作具有重要的参考价值。PCR检测SARS-CoV特异性较好,而敏感性有待提高。 史智扬 潘浩 郭喜玲 顾玲 李显 庄菱 曾晓燕 吴扬生 徐晓琴 刘社兰 刘和平 汪华关键词:传染性非典型肺炎 SARS病毒 病原体 诊断型DNA芯片的新技术 DNA芯片是近年来生命科学和医学研究领域出现的新技术.诊断型DNA芯片能同时对多种疾病进行高通量检测、待测样品用量小、自动化程度高等独特的技术优势,是DNA芯片技术中重要的应用方向之一.尽管诊断型DNA芯片已有诸多的报道... 刘和平关键词:DNA芯片 遗传性疾病 生物芯片 文献传递 用于细胞或微生物检测的微阵列芯片及其制备方法 用于细胞或微生物检测的微阵列芯片及其制备方法是一种可同时检测多种细胞、细胞碎片或微生物的微阵列芯片及其检测方法,该芯片以基底材料1作为载体,在基底材料的不同区域上设有根据多种不同的被测细胞所确定的、对被测细胞有特异性结合... 张春秀 刘和平 唐祖明 何农跃 陆祖宏文献传递 高压往复泵组合阀 本发明涉及高压往复泵组合阀,改善阀板与阀杆配合的导向性能和阀组的过流性能,泵体与阀座间构成低压进液腔、工作腔和高压排液腔,阀座上有进液阀板、排液阀板,阀杆的杆端分别设置进液阀盖和排液阀盖,阀杆上设置的供进液阀板、排液阀板... 叶晓琰 许建强 刘和平 杨孙圣文献传递 化学发光磁酶免疫法检测O157∶H7大肠埃希菌 被引量:12 2006年 目的:建立灵敏稳定检测O157:H7大肠埃希菌的化学发光磁酶免疫法.方法:利用AMPPD-ALP化学发光体系,通过磁珠酶联免疫法对O157:H7大肠埃希菌进行检测.结果:其检测灵敏度达到850个,线性范围为1 000~50 000个,批间变异小于15%,批内变异小于20%,与人工计数培养检测相比相关系数达0.9807.结论:化学发光磁酶免疫分析法操作简便,检测精密度和灵敏度高,是一种很有发展前景的可靠方法. 郭小英 王永宁 顾林岗 刘和平 贺艳峰 陆祖宏关键词:化学发光 大肠埃希菌 可用于非标记检测的固相化核酸探针 本发明公开了一种可用于非标记检测的固相化核酸探针,包括固体载体,在固体载体上固定包含有荧光基团、荧光淬灭基团和特异性核酸识别序列片段的寡核苷酸探针,该探针中荧光基团和荧光淬灭基团的相对物理位置为能使荧光淬灭位置;当靶基因... 陆祖宏 刘和平 王宏文献传递