高军
- 作品数：211 被引量：397H指数：9
- 供职机构：第二军医大学附属长海医院更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金国家科技支撑计划上海市重大科技攻关项目更多>>
- 相关领域：医药卫生生物学自动化与计算机技术电子电信更多>>
- 人白细胞介素12的cDNA克隆及双顺反子腺病毒载体的构建被引量：4
- 2001年
- 目的 :克隆中国人IL 12的 p40和p35亚基cDNA ,构建含hIL 12双顺反子的腺病毒载体。 方法 :采用RT PCR从上海地区人骨髓有核细胞中克隆IL 12的双亚基cDNA ,并插入质粒 pCI中进行全基因序列分析。利用质粒 p△ElsplA和IRES序列构建同时表达p35和 p40亚基的腺病毒载体。酶切鉴定构建物中基因插入的正确性。结果 :上海地区人骨髓有核细胞中IL 12的 p40和p35cDNA基因同已报道的北京地区人DC细胞中IL 12的 p40和国外报道的NKSF ,CLMF的 p40和p35序列各有异同 ,构建的IL 12双亚基同时表达的腺病毒载体酶切鉴定正确。 结论 :人IL 12的 p40和 p35基因可能存在多态性 ,同时表达IL 12双亚基的腺病毒载体构建成功 ,对开展人IL 12基因治疗肿瘤具有重要意义。
- 高军龙建秋谷爱梅李茂崔龙朱伟曹广文戚中田
- 关键词：DNA测序腺病毒载体
- PTCH1基因在人胃癌组织中的表达及临床意义
- 2010年
- 目的探讨PTCH1基因在人胃癌组织中的表达及其与胃癌发生的关系。方法应用半定量RT-PCR以及实时荧光定量PCR两种方法检测PTCH1 mRNA在25例人胃癌组织、癌旁正常组织的表达情况以及分布规律,并分析PTCH1mRNA的表达与胃癌的临床生物学特征的关系。结果在胃癌组织、癌旁正常组织中均可见PTCH1 mRNA的表达,PTCH1mRNA在胃癌组织中的相对表达量为1.26±0.896,低于其在癌旁正常胃组织的2.75±1.667,差异有统计学意义(P<0.05)。PTCH1 mRNA表达与胃癌肿瘤大小和转移无关,与肿瘤分化程度有关,高中分化胃癌组织中的PTCH1 mRNA相对表达量为1.5815±0.019 68,低分化胃癌组织中为1.2345±0.012 66,差异有统计学意义(P<0.01)。结论 PTCH1基因在胃癌组织中低表达与胃癌的发生、发展密切相关,提示PTCH1基因检测有可能成为临床新的胃癌早期诊断标志物。
- 左云宋宇陈亚楠高军
- 关键词：胃癌
- ^(60)Co-γ射线全身低剂量率辐照对小鼠血浆中IL-12和IL-10的影响被引量：1
- 2006年
- 目的研究低剂量电离辐射对小鼠免疫系统影响的剂量率效应。方法以^(60)Co-γ射线为辐照源,低、中和高3个辐射剂量(0．075、0．5、2．0Gy),恒定剂量率(0．5 mGy/min)全身一次性照射小鼠,ELISA检测照射4h后血浆IL-12和IL-10的含量。结果低、中剂量照射后,血浆中IL-12、IL-10和IL-12/IL-10出现程度几乎相同地下降；但高剂量照射后,IL-12进一步显著下降,而IL-10上升至对照组水平,IL-12/IL-10比值进一步下降。结论恒定0．5mGy/min剂量率的^(60)Co-γ射线照射可损伤机体免疫功能,在0．075～0．5Gy剂量范围内损伤轻微,在2．0Gy时损伤明显,表明低剂量率电离辐射对免疫系统具有损伤作用。
- 高军竺青章建程吴晓兰龙建秋王海军李茂
- 关键词：低剂量率低剂量
- 粪便microRNAs检测用于胰腺癌筛查诊断的价值评价被引量：3
- 2011年
- 目的 检测胰腺癌患者粪便microRNAs,评价其诊断价值.方法 收集29例胰腺癌患者、22例慢性胰腺炎（CP）患者以及13例健康志愿者的粪便标本,抽提粪便总RNA,应用实时定量PCR法检测各组样本miR-21、miR-155、miR-181a、miR-181b、miR-196a、miR-210的表达量,以miR-16作为内参基因.应用接受者操作特征（ROC）曲线（AUC）评估microRNAs对胰腺癌的诊断价值.结果 粪便总RNA抽提及microRNAs检测方法具有稳定及可重复性.胰腺癌组miR-181b、miR-196a、miR-210的表达量分别为2.22±0.64、2.78±0.14、5.55±0.38;CP组为1.42±0.39、3.88±0.85、5.39±0.69;对照组为0.32±0.40、1.14±0.98、4.23±0.99.胰腺癌组和CP组均较对照组显著增加（P值均＜0.05）;而胰腺癌组与CP组间无显著差异.胰腺癌组对对照组的miR-181b AUC为0.745（95%CI 0.597～0.894）,诊断胰腺癌的敏感性和特异性分别为84.6%和51.7%;miR-210的AUC为0.772（95%CI 0.629～0.914）,对胰腺癌的诊断敏感性和特异性分别为84.6%和65.5%.两组比较差异均有统计学意义（P值均＜0.05）.miR-196a对胰腺癌无诊断意义,但胰腺癌患者粪便miR-196a的表达与肿瘤直径相关（r=0.516,P=0.041）.结论 粪便RNA的抽提和microRNAs检测为无创性,且具有可重复性.miR-181b和miR-210在胰腺癌患者粪便中的表达增高,有可能是胰腺癌潜在的分子标志物.
- 任艳高军王小玮刘建强顾俊骏黄浩杰金晶龚燕芳李兆申
- 关键词：胰腺肿瘤微RNAS粪便
- 胰腺细针穿刺活检组织K—ras突变检测的诊断价值被引量：3
- 2010年
- 目的 检测内镜超声引导下细针穿刺穿刺物中K—ras基因的突变，探讨其对胰腺癌早期诊断的价值。方法收集27例胰腺癌、9例其他恶性肿瘤及14例良性胰腺占位患者的细针穿刺物，应用肽核酸（PNA）钳制PCR法检测K—ras突变。结果胰腺癌患者K—ras突变阳性率为88．9％，其他恶性肿瘤为44．4％，良性胰腺占位为35．7％，胰腺癌与其他两种病变差异显著（P=0．013，P=0．001）。胰腺癌与其他恶性肿瘤比较，K—ras基因突变的敏感性、特异性、阳性预测率、阴性预测率、准确率分别为88．9％、55．6％、85．7％、62．5％、80．6％，差异显著（P=0．013）；与良性胰腺占位病变比较，分别为88．9％、64．3％、82．8％、75．0％、80．5％，差异亦显著（P=0．001）。联合穿刺物细胞学检查和K-ras基因突变检测，胰腺癌的阳性率高达96．3％。结论胰腺组织穿刺物的K—ras基因突变检测可提高胰腺癌诊断的阳性率。
- 王小玮高军任艳顾俊骏金震东杜奕奇湛先保陈洁黄浩杰李兆申
- 关键词：基因诊断
- 丙型肝炎病毒多表位抗原的基因克隆及其编码序列
- 本发明涉及生物医药工程技术领域，是丙型肝炎病毒多表位抗原的基因克隆hcvme及其编码的多表位抗原HCVME。hcvme包含了HCV基因组E2区中HVR1模拟B细胞表位基因9条和T细胞表位基因4条，其中T细胞表位基因的4条...
- 戚中田高军赵平龚育平赵兰娟潘欣
- 文献传递
- 胰腺癌细胞株中Elastase 3B基因启动子异常甲基化研究
- 2007年
- 目的探讨Elastase 3B（ELA3B）基因在胰腺癌中低表达的分子机制。方法应用RT-PCR方法检测2例正常胰腺组织和BxPC、CFPAC、PaTu8988、PANC1、SW1990 5株胰腺癌细胞株ELA3B基因表达。利用去甲基化试剂5-氮-2′-脱氧胞嘧啶（DAC）处理细胞株,再检测ELA3B基因表达,并用甲基化特异性PCR检测和测序进行验证。结果ELA3B在正常胰腺组织中表达,而在BxPC、CFPAC、PaTu8988、PANC1和SW1990 5株胰腺癌细胞株中均无表达。DAC处理后,BxPC、PaTu8988、PANC1和SW1990 4株胰腺癌细胞株表达ELA3B,而CFPAC仍不表达。正常胰腺组织和PANC1 ELA3B基因部分甲基化,而其他4株胰腺癌细胞株则高甲基化。结论ELA3B基因启动子的高甲基化是导致该基因在胰腺癌中表达下降的主要原因之一。
- 张玲李兆申高军龚燕芳曹佳薄陆敏
- 关键词：胰腺肿瘤甲基化
- 丙型肝炎病毒复合高变区1模拟表位蛋白的免疫原性分析被引量：3
- 2006年
- 将丙型肝炎病毒高变区1(HVR1)模拟表位融合基因插入原核表达载体pGEX-4T-1,在大肠杆菌BL21(DE3)中进行表达,经亲和层析和凝胶过滤层析获得HCVHVR1模拟表位融合蛋白。用Westernblot和ELISA检测融合蛋白与HCV抗体阳性血清的结合情况。皮下注射免疫BALB/c小鼠,用ELISA检测小鼠血清中的抗HCV抗体水平及其与天然HCV高变区1合成肽的交叉反应。结果表明融合蛋白能与HCV抗体阳性血清特异结合,融合蛋白与HCV抗体阳性血清的结合频率为71.6%(25/35)。融合蛋白免疫小鼠后能有效诱导免疫应答,其诱生的特异性抗体最高滴度达104(免疫后第8周),且该抗体能同2条天然HCVHVR1合成肽发生交叉反应。本研究提示,HCV复合HVR1模拟表位融合蛋白在丙型肝炎疫苗的研发中可能具有潜在应用价值。
- 龚育平高军赵平秦照玲杨苗戚中田
- 关键词：丙型肝炎病毒高变区1模拟表位免疫原性
- 胰腺癌TAK1、p-TAK1的表达及肿瘤相关巨噬细胞的浸润密度被引量：3
- 2015年
- 目的 检测胰腺导管腺癌及相应癌旁胰腺组织TGF-β激活激酶1（TAK1）、磷酸化TAK1（p-TAK1）的表达及肿瘤相关巨噬细胞（TAM）的浸润密度,分析二条途径之间的相关性及其与肿瘤临床病理特征的相关性.方法 应用免疫组化法检测57例胰腺癌及35例相应癌旁正常胰腺组织TAK1、p-TAK1及TAM标志物CD68蛋白的表达,计算TAM浸润密度,采用SPSS18.0软件分析它们之间及其与临床病理特征间的关系,采用多因素Logistic回归分析胰腺癌TNM分期的独立危险因素.结果 胰腺癌组织TAK1、p-TAK1蛋白的阳性表达率分别为42.1％（24/57）和40.4％ （23/57）,显著高于癌旁组织的14.3％（5/35）和11.4％（4/35）;胰腺癌组织CD68阳性的TAM高密度浸润者占38.6％（22/57）,显著高于癌旁组织的8.6％（3/35）,差异均有统计学意义（P值均＜0.05）.TAK1蛋白表达与胰腺肿瘤的最长径、分化程度、淋巴结转移、远处转移、临床分期显著相关;p-TAK1蛋白表达与肿瘤的分化程度、淋巴结转移、远处转移、临床分期显著相关;TAM浸润密度与肿瘤的分化程度、淋巴结转移、远处转移、临床分期显著相关（P值均＜0.05）.胰腺癌组织TAK1、p-TAK1表达水平均与TAM的浸润密度呈正相关（P值均＜0.01）.多因素Logistic回归分析显示胰腺癌组织TAM高密度浸润是高等级TNM分期的独立危险因素（P =0.002,OR=129.5,95％ CI 6.2 -2718.6）.结论 TAK1途径及TAM在胰腺癌的发生和发展过程中具有重要作用,并且两种机制可能存在一定的协同作用。
- 马丹程芳芳杨帆满晓华高军张永镇李兆申
- 关键词：胰腺肿瘤肿瘤相关巨噬细胞
- 人canstatin基因原核载体构建及其重组蛋白的表达纯化被引量：4
- 2005年
- 目的:构建人血管能抑素canstatin基因原核表达载体,表达并纯化出其重组蛋白。方法:从人胎盘组织中提取总RNA,经逆转录-聚合酶链式反应(RT-PCR)扩增canstatin cDNA,克隆进质粒pUCm-T,转化E.coliDH5α,测序正确后,酶切目的基因片段,插入质粒pET-22b(+),转化E.coliBL21,IPTG诱导蛋白表达,N i-NTA柱亲和层析纯化重组蛋白。结果:电泳证实RT-PCR扩增产物与预期目的基因canstatin长度一致。RT-PCR纯化产物与载体pUCm-T连接后,经蓝白斑筛选,挑出6个白色菌落做酶切鉴定。其中一个菌落被证实为阳性克隆,测定其基因序列,结果显示与Genbank公布的canstatin基因序列完全一致。将canstatin cDNA,插入质粒pET-22b(+),转化E.coliBL21,培养过夜后,挑选7个白色菌落做酶切鉴定,证实均为阳性克隆。IPTG诱导其中一个克隆表达蛋白,SDS-PAGE电泳分析表明,在相对分子质量24 000左右出现新的蛋白表达条带,诱导1、2、3、4 h后,表达蛋白分别占菌体总蛋白的18.2%、18.8%、23.0%和23.4%。将诱导3 h的菌体超声破碎后,N i柱亲和层析,125和250 mmol/L咪唑洗脱液SDS-PAGE电泳显示出清晰的单一条带。结论:成功构建人canstatin基因原核表达载体,表达并纯化出canstatin重组蛋白,为深入研究其临床应用打下基础。
- 何小平李兆申屠振兴高军潘雪龚燕芳金晶
- 关键词：CANSTATIN血管生成基因克隆
