陈毓川
- 作品数:8 被引量:35H指数:2
- 供职机构:华中农业大学更多>>
- 发文基金:国家自然科学基金更多>>
- 相关领域:农业科学更多>>
- 单克隆抗体ELISA检测犊牛粪便中冠状病毒抗原被引量:1
- 1995年
- 用两株单克隆抗体混合后包破EIISA微孔板,加中过状病毒抗原,加经白陶土处理过的兔抗牛冠状病毒高免血清,再加上辣根过氧化物酶际记的羊抗兔IgG抗体,加底物显色间接EltISA检测牛冠状病毒抗原获得成功。用此方法检测细胞培养的牛冠状病毒上清液,其敏感度高出血凝试验(HA)8倍。从武汉市附近3个奶牛场采集犊牛腹泻粪便105份,用单抗ElISA检测牛冠状病毒抗原,共检出阳性36份。并与血凝及血凝抑制试验;电镜等方法比较,证明其简便;快速;敏感度高;特异性强。克服了单独使用多价抗体出现非特异性反应和单独使用单克隆抗体OD值太低的困难.
- 陈焕春金梅林何国庆苏雄陈毓川
- 关键词:单克隆抗体酶联免疫吸附牛病
- 间接血凝试验检测抗传染性牛鼻气管炎病毒的单克隆抗体
- 1996年
- 运用间接血凝试验对4株杂交瘤细胞株所分泌抗传染性牛鼻气管炎病毒单克隆抗体进行测定的结果表明,此方法可用于该抗体的某些特性鉴定和筛选。
- 程国富陈毓川苏雄徐珊
- 关键词:单克隆抗体间接血凝试验牛病
- 用单克隆抗体PAP桥联酶标技术检测猪粪中的猪痢疾密螺旋体被引量:3
- 1993年
- 用单克隆抗体(McAb)过氧化物酶—抗过氧化物酶(PAP)桥联酶标方法,在实验室检测8株猪痢疾密螺旋体(T.h)纯培养物,全部“+”,检测无害密螺旋体(T.i)及禽弧菌(AV)各1株全为“-”。用该法检测来自猪痢疾(SD)猪20头份全为“+”,健康猪39头份全为“-”和可疑猪场的猪粪201头份,其中38头份“+”,163头份“-”共260头份,其结果与McAb间接荧光抗体(IFA)试验一致。捎除了用多克隆抗血清(PcAS)IFA和结晶紫染色法对T.i及在健康猪群中所出现的假阳性。PAP法具有高度敏感性和特异性,且染色标本能长期保存。初步结果表明该法可以成为诊断工作和免疫学研究的有用工具。
- 苏雄陈毓川程国富徐珊金梅林罗满林
- 关键词:单克隆抗体痢疾猪病
- 牛冠状病毒单克隆抗体研究 Ⅰ.杂交瘤细胞株的建立被引量:1
- 1993年
- 用小鼠骨髓瘤细胞(SP 2/0)与经牛冠状病毒免疫的BALB/C小鼠脾细胞进行融合,融合成功率为70%。用酶联免疫吸附试验(ELISA)筛选杂交瘤细胞阳性率为17%左右。对其中4株强阳性的杂交瘤细胞进行了再克隆,获得6株高产亚克隆杂交瘤细胞。用BALB/C小鼠生产了腹水和液氮保存了大量杂交瘤细胞。经长期体外培养和反复冻存仍能稳定地分泌抗体。通过ELISA阻断试验证明了其分泌抗体的高度特异性。抗体的分子类型经过氧化物酶标记的羊抗鼠IgG抗抗体间接ELISA鉴定为IgG。
- 陈焕春金梅林吴美洲陈毓川叶长发
- 关键词:冠状病毒杂交瘤
- 传染性牛鼻气管炎亚单位疫苗免疫原性的研究
- 2001年
- 用犊牛睾丸细胞培养传染性牛鼻气管炎病毒 (IBRV) ,反复冻融 ,差速离心提取病毒 ,用TritonX_10 0溶解 ,超声波处理 ,制成IBRVTritonX_10 0亚单位抗原 ,经SDS_PAGE电泳 ,其分子量在 176kD~ 5 3kD之间 ,其中有 6条清晰的蛋白带。该抗原与一定比例的白油_司盘佐剂乳化 ,接种育成牛 ,经间接ELISA检测 ,可使接种的育成牛产生高效价的血清抗体 (OD4 92nm =1.5 7)。2种不同剂量 (80mg/头 ,40mg/头 )的IBRV亚单位疫苗接种育成牛 ,体内抗体效价相差不显著 ,抗体可在体内持续 12周 ,用IBRVTritonX_10 0亚单位疫苗 2次接种育成牛 ,其体内抗体效价显著高于用灭活疫苗 2次接种育成牛体内的效价。试验结果表明 :提取的IBRV多肽制作的亚单位疫苗具有良好的免疫原性 ,且抗体持续时间较长。
- 刘发志陈毓川赵青松刘方玉
- 关键词:传染性牛鼻气管炎病毒亚单位疫苗间接ELISA免疫原性
- 斑点免疫金渗滤法检测鸭肝炎病毒的研究被引量:29
- 1997年
- 用胶体金标记提纯后的兔抗鸭肝炎病毒(DHV)IgG,建立了一种以微孔滤膜为固相载体,以红色胶体金为标记物的检测DHV的斑点免疫金渗滤法(DIGFA),并确定了最佳试验条件。该法既可定性,亦可定量,对纯化DHV的最小检测量为4.12ng/点,其敏感性为抗原斑点试验(AST)的2倍。特异性阻断试验和交叉反应试验证明DIGFA检测DHV具有较高的特异性。对DHV鸡胚尿囊液DIGFA法检出率为100%。DIGFA和AST法对36份临床样本检测阳性率分别为83.3%和75%,其阳性符合率为86.7%。随机抽样的6份DIGFA阳性肝脏样本经人工发病试验后电镜检查,均发现大量直径30~40nm的病毒粒子。实验结果表明,DIGFA法是一种微量、敏感、特异、快速、简便的检测DHV方法。
- 张小飞陈毓川刘庆年姚淮平解启发胡晓苗
- 关键词:鸭病肝炎病毒
- 用单克隆抗体荧光标记技术检测猪粪中的猪痢疾密螺旋体被引量:1
- 1995年
- 用单克隆抗体荧光标记技术检测猪粪中的猪痢疾密螺旋体程国富,陈毓川,苏雄,徐珊(华中农业大学牧医系武汉430070)猪痢疾(SD)是生长育肥猪的一种严重的粘膜出血性腹泻病,其病原为猪痢疾密螺旋体(T·h)。对该病的诊断常依据可疑猪的病史,临床症状和病理...
- 程国富陈毓川苏雄徐珊
- 关键词:单克隆抗体猪痢疾密螺旋体结晶紫杂交瘤
- 分泌抗传染性牛鼻气管炎病毒单克隆抗体杂交瘤细胞株的建立被引量:1
- 1990年
- 用经纯化的传染性牛鼻气管炎病毒(IBRV)免疫的BALB/C 小鼠与骨髓症细胞SP2/O 融合,获得了四株抗IBRV 的单克隆抗体杂交瘤。实验证明,这些杂交瘤细胞株是抗体分泌性能稳定、抗体滴度较高、特异性强的IgG。微量中和实验证明,其中一株(4F)具有一定的中和病毒的能力。
- 徐珊陈毓川秦礼让
- 关键词:单克隆抗体杂交瘤