贺佳
- 作品数：10 被引量：174H指数：7
- 供职机构：南京师范大学生命科学学院更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金江苏省自然科学基金更多>>
- 相关领域：生物学医药卫生农业科学更多>>
- 喇叭唇石斛组织培养的研究被引量：14
- 2004年
- 目的 :筛选喇叭唇石斛快速繁殖体系的适宜培养基及培养条件。方法 :对基本培养基、光照条件、激素、天然提取物浓度等进行比较研究。进行叶绿素含量、可溶性蛋白含量测定。结果 :N6培养基是种胚萌发成苗适宜培养基 ,而 1/ 2MS +NAA 0 .5mg·L-1易于原球茎膨大增殖。先暗培养 2 0d再光照培养有利于胚的萌发及苗的生长。 1/ 2MS +NAA 0～ 0 .5mg·L-1有利于原球茎大量增殖 ,N6+6 BA 2 .0mg·L-1+NAA 0 .5mg·L-1+10 %马铃薯汁是原球茎分化的适宜培养基 ,添加激素和马铃薯汁促进叶绿素和可溶性蛋白含量上升。N6+NAA 0 .5mg·L-1+10 %香蕉汁生根壮苗最适宜。结论 :无机盐浓度、氮源形态、光照条件对胚萌发生长影响较大 ;氮源形态对原球茎增殖有影响 ;叶绿素含量、可溶性蛋白含量能反映组培苗的生长状态 。
- 常俊丁小余保曙琳刘冬扬贺佳唐凤丁秉中
- 关键词：培养基可溶性蛋白叶绿素
- 泽泻ISSR反应体系的建立与优化被引量：20
- 2006年
- 以四川泽泻为实验试材，采用改进的CTAB法提取了泽泻的高质量总DNA模板，克服了泽泻中所富含的酚类物质的影响．对泽泻ISSR反应体系中各个主要影响因子进行了优化和筛选，建立了标记位点清晰、稳定、重复性好、可用于泽泻ISSR-PCR分析的最适反应体系，它们是：25μLPCR反应体系中，10×Taq酶配套缓冲液，IUTaqDNA聚合酶，1．8～2．0mmol／L MgCl2，100μmol／LdNTP，0．3μmol／L引物，DNA模板约10-20ng，退火温度在52-60％；
- 贺佳丁小余褚必海刘冬扬丁鸽
- 关键词：泽泻ISSR反应体系
- 铁皮石斛野生居群遗传多样性的RAPD分析与鉴别被引量：85
- 2005年
- 目的采用RAPD分子标记技术,对铁皮石斛8个野生居群的遗传多样性、亲缘关系以及分子鉴别等进行研究.方法筛选随机引物进行RAPD分析,通过UPGMA聚类,研究铁皮石斛各居群间的遗传关系,构建居群亲缘关系的分子系统树;利用特异性条带对铁皮石斛野生居群进行指纹分析鉴别.结果共筛选出10个有效引物,在8个野生居群材料的RAPD扩增中共得到439个位点,平均每个引物扩增出43.9个位点,每个居群扩增出54.9个位点;在所获得的104条可重现谱带中,9条是单态的,95条是多态的,多态性程度达91.35%,遗传距离在0.590～0.727之间,平均为0.686.结论铁皮石斛居群间遗传差异明显,具有较丰富的遗传多样性;RAPD可以作为铁皮石斛野生居群遗传多态性、居群亲缘关系和分子鉴别研究的有效手段;引物S412可以有效鉴别铁皮石斛的8个野生居群.
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- 关键词：铁皮石斛居群RAPD
- 铁皮石斛野生居群研究(Ⅳ):RAPD反应体系的构建与优化被引量：7
- 2006年
- 为获得铁皮石斛RAPD的最佳反应体系,本文对影响RAPD反应的模板含量、Mg2+浓度、dNTP浓度、Taq酶浓度、扩增程序及退火温度等多种因子进行了构建与优化.通过各因子的组合研究,我们得到铁皮石斛RAPD反应最适扩增体系是:25μLPCR反应体积,10×Buffer 2.5μL,2.5 mmol/L MgC l2,dNTP 2.5μL(各2.5mmol/L),模板DNA为30 ng,Taq聚合酶1.5 U,随机引物12 pmol,ddH2O 14.2μL.最佳扩增程序:94℃预变性3m in,94℃变性50 s,38℃复性1 m in,72℃延伸2 m in,循环40次;最后72℃延伸5 m in.4℃保存.
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- 关键词：铁皮石斛
- 铁皮石斛居群差异的研究ⅡISSR指纹标记方法的建立与优化被引量：49
- 2006年
- 目的：针对铁皮石斛ISSR的反应特点，建立稳定可靠的ISSR分子指纹标记反应体系，为进一步研究铁皮石斛的居群差异奠定基础。方法：通过筛选引物并设定影响铁皮石斛ISSR反应的诸因子的不同浓度，检测ISSR不同反应体系的扩增效果；通过分析非特异性条带的产生原因并进行条件优化，建立铁皮石斛ISSR稳定可靠的反应体系。结果与结论：首次建立了可用于铁皮石斛ISSR-PCR分析的最适宜的反应体系：25μL．PCR反应体系中，10×Taq酶配套缓冲液，1．5UTaq DNA聚合酶，1．2—1．8mmol·L^-1 MgCl2，80μmol·L^-1 dNTP，0．2μmol·L^-1引物，DNA模板约20ng，退火温度52-60℃；实验表明：Taq酶质量、DNA模板品质、退火温度等对ISSR反应结果具有较大影响。所建立的铁皮石斛ISSR反应体系具有标记位点清晰、反应系统稳定、检测多态性能力较强、重复性好等特点，可以较好地应用于铁皮石斛的居群鉴别及居群分子生态的研究。
- 沈洁丁小余丁鸽刘冬扬唐凤贺佳
- 关键词：ISSR反应体系
- 铁皮石斛野生居群遗传多样性的RAPD分析与保护策略
- 目的:采用RAPD分子标记技术,对中国特有濒危植物铁皮石斛的遗传多样性进行了研究.方法:筛选随机引物进行RAPD分析,通过UPGMA聚类,研究了铁皮石斛各居群及个体间的遗传关系,构建了亲缘关系的分子系统树.结果:从350...
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- 关键词：铁皮石斛居群居群遗传结构RAPD
- 文献传递
- 泽泻rDNA ITS区序列特征及其居群鉴别研究被引量：11
- 2005年
- 运用PCR产物直接测序法对川泽泻、建泽泻和江泽泻的rDNA ITS区(包括ITS1,5.8S,ITS2)碱基序列进行了序列测定和分析.泽泻rDNA ITS区的碱基序列总长度确定为640 bp,江泽泻和建泽泻的ITS区碱基序列完全一致,川泽泻与建泽泻(江泽泻)在rDNA ITS区碱基序列有2个稳定的变异位点,分别位于ITS1和ITS2区段.我国的泽泻与意大利泽泻在5.8S保守区(第289位)有一个碱基差异.依据泽泻rDNA ITS区的序列特征可以进一步鉴别川泽泻和建泽泻,为泽泻居群的鉴别提供可靠的分子标记.
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- 关键词：泽泻居群RDNAITS区分子鉴别
- 铁皮石斛野生居群遗传多样性的RAPD分析与保护策略
- 目的采用RAPD分子标记技术,对中国特有濒危植物铁皮石斛的遗传多样性进行了研究。方法筛选随机引物进行RAPD分析,通过UPGMA聚类,研究了铁皮石斛各居群及个体间的遗传关系,构建了亲缘关系的分子系统树。结果从 350个引...
- 丁鸽丁小余沈洁唐凤刘冬扬贺佳李雪霞褚必海
- 关键词：铁皮石斛居群居群遗传结构
- 文献传递
- 保健食品建泽泻及其混淆品的PCR-RFLP分子鉴别被引量：8
- 2007年
- 目的:寻找简易可重复的分子标记方法对保健食品建泽泻及其混淆品进行鉴定。方法:对建泽泻及其混淆品的rDNA ITS区进行PCR扩增、测序,运用ClustalX、Mega3.0、DNAMAN 4.0等软件对ITS区进行序列分析和PCR限制性酶切图谱分析(PCR-RFLP)。结果:依据建泽泻及其混品完整的rDNA ITS区片段长度,将慈菇和甘薯两种混淆品首先区分开;再通过PCR-RFLP分析,可将建泽泻从川泽泻、窄叶泽泻、小泽泻和芋等混淆品中成功鉴别出来。结论:rDNA ITS片段长度不足以用于鉴别保健食品建泽泻原料的真伪;PCR-RFLP可对保健食品建泽泻及其混淆品进行简便而快捷的分子鉴别。
- 褚必海丁小余李雪霞贺佳丁鸽刘冬扬
- 关键词：保健食品混淆品PCR-RFLP分子鉴别
- 铁皮石斛野生居群的ISSR分子指纹标记
- 目的运用ISSR分子标记技术对铁皮石斛的不同居群进行DNA指纹分析,探讨可作为铁皮石斛野生居群识别卡的ISSR分子指纹标记,为铁皮石斛野生居群的准确识别提供科学依据。方法利用锚定PCR法,从76个ISSR引物中筛选出10...
- 沈洁丁小余刘冬扬丁鸽贺佳李雪霞唐凤
- 关键词：铁皮石斛居群ISSR
- 文献传递
