谭茵 作品数:44 被引量:189 H指数:9 供职机构: 广州医科大学 更多>> 发文基金: 广东省自然科学基金 国家自然科学基金 广州市医药卫生科技项目 更多>> 相关领域: 医药卫生 文化科学 农业科学 生物学 更多>>
多重等位基因特异性PCR-HLA-ⅡDNA分型 被引量:1 2000年 【目的】对人类组织相容性抗原 (HumanLeucocyteAntigenSystem)Ⅱ类进行高分辨基因分析。【方法】用多重PCR和等位基因特异性PCR技术相结合[1,2 ] ,建立多重等位基因特异性PCR方法。【结果】 2 4对引物成功地分辨 43份DNA的HLA DRB1、B3、B4、B5 5 1个等位基因和DQB1 15个等位基因的 4位数特异性 ,识别基因片段长度为 2 81bp。【结论】多重等位基因特异性PCR技术敏感、微量、节省和分辨能力高 ,是进行复杂的HLA多态性研究中有价值的佐证试验。 肖露露 陈洪涛 王长希 郑克立 谭茵关键词:聚合酶链反应 不同低温对大鼠脊髓缺血再灌注损伤后Bax及Bcl-2蛋白表达的影响 被引量:1 2014年 目的:观察不同低温对大鼠脊髓缺血再灌注损伤的保护作用及其对凋亡蛋白Bax、Bcl-2表达的影响。方法将60只SD大鼠随机分为4组,低温18℃实验组(深低温组),低温28℃实验组(中低温组),常温手术对照组(常温组),常温假手术组(假手术组)。前3组采用手术夹闭大鼠左肾动脉与左右髂总动脉分叉上端腹主动脉90 min致脊髓缺血,然后松开再灌注,深低温组、中低温组在阻断前20 min分别降至18、28℃,解除阻断后30 min内将体温升至37.0℃。常温组阻断前无需降温每只大鼠再灌注72 h、1周按照TARLOV法对下肢进行评分。每组分为24 h、72 h、1周3个不同时间点取L1-L5段脊髓,每个时间点5只大鼠,采用普通病理HE染色、Nissl染色,从形态学上观察脊髓组织,TUNEL法观察细胞凋亡情况,免疫组化染色及Western blot法观察脊髓组织Bax蛋白及Bcl-2蛋白表达情况。结果 TARLOV神经评分结果显示,深低温组、中低温组下肢恢复情况明显好于常温组(P<0.01),而中低温组评分又高于深低温组(P<0.01)。组织形态学观察假手术组未发现明显病理学改变,深低温组、中低温组、常温组3组均出现不同程度病理改变,且中低温组轻于深低温组,深低温组组轻于常温组;TUNEL结果显示,假手术组几乎未发现凋亡细胞,常温组神经元细胞凋亡情况较深低温组及中低温组明显。免疫组化及Western blot结果显示,深低温组、中低温组各时间点Bax蛋白表达量均低于常温组,但中低温组降低比深低温组明显,组间两两比较,差异有统计学意义( P<0.05)。深低温组、中低温组、假手术组各时间点Bcl-2蛋白表达量均高于常温组,且中低温组较深低温组高,组间两两比较,差异有统计学意义( P<0.05)。结论低温保护下肢神经功能及减少神经元的死亡,对大鼠脊髓缺血再灌注损伤有 李小辉 富旗 周正芳 郭惠明 黄成峰 张晓慎 陈寄梅 庄建 谭茵 朱平关键词:脊髓缺血再灌注损伤 BCL-2 新西兰兔SOD1基因的分泌型原核表达载体构建及在E.coli表达 2019年 为了研究新西兰兔SOD1蛋白分子的结构与功能,设计了一对特异性引物,通过RT-PCR方法克隆得到了该基因编码序列。将该编码序列克隆到分泌型原核表达载体PET-25b,经菌落PCR、双酶切和测序鉴定证实成功构建了重组表达载体。将重组质粒转化大肠杆菌表达菌株E.coli BL21(de3) PlysS,建立了分泌型原核表达系统。IPTG诱导培养重组菌后收集样品检测,经SDS-PAGE、Western blot鉴定,证实在培养物上清中检测到了SOD1蛋白的表达。至此,成功建立了新西兰兔SOD1基因的分泌型原核表达系统,实现了蛋白的可溶表达,为进一步研究该蛋白的结构与功能打下了基础。 邓小亮 马文康 付欣 洪玮 谭茵关键词:新西兰兔 SOD1 分泌型 原核表达 人生长激素释放激素受体剪接变异体1型对人肝癌细胞HepG2增殖的影响 被引量:3 2017年 目的:探讨人生长激素释放激素受体剪接变异体1型(GHRHR SV1)对肝癌细胞系HepG2增殖的影响,阐明GHRHR SV1对人肿瘤细胞的促增殖作用。方法:将GHRHR SV1真核表达载体导入HepG2细胞建立HepG2-SV1细胞系。设计对照组(野生型HepG2)、空载质粒组(HepG2-pCDNA 3.0细胞系)和干扰组(HepG2-SV1细胞系)。采用PCR和Western blotting法鉴定HepG2-SV1细胞系,CCK-8法检测各组细胞的增殖率,克隆形成实验检测各组细胞的单克隆形成率,细胞划痕实验检测细胞的迁移率。结果:PCR与Western blotting法检测,构建的HepG2-SV1细胞系能稳定表达GHRHR SV1;CCK-8法检测,干扰组HepG2-SV1细胞系的增殖率高于空载质粒组HepG2-pcDNA3.0细胞系(P<0.05);克隆形成实验,干扰组HepG2-SV1细胞系的单克隆形成率约为空载质粒组HepG2-pcDNA3.0细胞系的3.5倍(P<0.05);细胞划痕实验,所构建的干扰组HepG2-SV1细胞系的迁移率高于空载质粒组HepG2-pcDNA3.0细胞系(P<0.05)。结论:GHRHR SV1能促进HepG2细胞的增殖。 林玉茵 陈文生 郭晓兰 谭茵 贺小松 戴建威关键词:HEPG2细胞 克隆形成率 迁移率 MICA无效等位基因MICA*063N核苷酸序列全长分析 2012年 目的分析主要组织相容复合物I类相关基因A(majorhistocompatibilitycomplexclassIchain-relatedgeneA,MICA)无效等位基因MICA*063N的核苷酸序列及探讨其分子基础。方法采用直接测序法(sequence-basedtyping,SBT)对MICA*063N基因进行多态性分析并应用基因克隆测序法检测其碱基序列,应用测序软件比对MICA分型。结果直接测序法发现该基因序列与MICA*027类似,在第2外显子编码子62碱基位置184出现信号“Y”,提示该位置出现碱基突变。再以克隆测序法证明,该碱基突变为C—T,在该位置编码子由CAG→TAG,TAG编码终止密码子。由于该等位基因提前出现终止密码子,因此推测可能该基因表达为截短或无效蛋白质。结论MICA*063N基因序列已提交GenBank,已于2010年10月获世界卫牛组织HLA命名委员会正式命名(编号HWS10011131)。 黄颖烽 谭茵 杨劭宇 罗宏图 周泰成关键词:MICA基因 测序 MICA新等位基因MICA*002:04的DNA序列鉴定及分析 被引量:2 2011年 目的:直接测序法及外显子3 DNA片段克隆测序定确认MICA新的等位基因MICA*002:04。方法:用组特异性引物分别扩增MICA基因,采用Sequence Base Typing(SBT)法分型技术及PCR片段克隆测序法对MICA多态性基因的外显子2、3、4、5进行双向测序。结果:发现1个与MICA*002:01序列相近的新等位基因,在外显子3上有1个碱基位置与国际通用MICA数据库不相符。该基因与MICA*002:01相比在外显子3的碱基位置486出现突变(C→A),密码子位置20由GCC→GCA,相应编码氨基酸是同义突变。结论:DNA测序结果表明该基因序列为新的MICA等位基因,已提交GenBank,于2010年9月被世界卫生组织HLA因子命名委员会正式命名为MICA*002:04。 谭茵 黄颖烽 徐秀章 叶欣 魏亚明 古维立关键词:MICA 研究型教学模式在生物技术综合实验的探索与实践 被引量:2 2022年 生物技术综合实验是培养创新型生物卓越人才的重要课程,目前传统教学模式存在知识片面、缺乏前沿知识融合、评价单一的局限,亟需进行教学模式的改革。我校生物技术综合实验课程进行了研究型教学模式的探索与实践,建立“教师引导,小组自主讨论、设计、准备、实施、分析和总结课题,思政教育融入课堂”的教学活动,形成“自主设计,虚实结合,引入前沿,多元评价,思政融合”为特色的教师制研究型教学模式,取得了良好的教学效果,可满足创新型人才培养需求,促进生物技术教学改革发展。 郭晓兰 谭茵 付欣 戴建威关键词:研究型教学模式 教学改革 菟丝子提取物清除自由基作用的研究 被引量:13 2012年 目的研究菟丝子提取物的体外抗氧化活性。方法采用热水提取、酶-Sevage法除蛋白、不同比例乙醇分级沉淀等方法获得菟丝子多糖提取物;经95%乙醇回流提取,2乙酸乙酯、正丁醇萃取,得到乙酸乙酯和正丁醇提取物。利用1,1-二苯基-2-苦苯肼自由基(DPPH.)和超氧阴离子自由基(O2-.)分别测定了各组分的抗氧化活性。结果菟丝子提取物均具有一定的抗氧化活性,且呈显著的量效关系。菟丝子乙酸乙酯、正丁醇提取物清除自由基的能力大于氧化型谷胱甘肽,小于还原型谷胱甘肽;菟丝子多糖清除自由基的能力均小于氧化型谷胱甘肽,其中90%醇沉多糖清除自由基的能力较强。结论菟丝子乙酸乙酯、正丁醇提取物以及90%醇沉多糖是天然抗氧化剂的良好来源,可以进一步分离纯化。 张培全 谭茵 张超关键词:菟丝子 抗氧化活性 自由基 超氧阴离子自由基 DPPH 阿魏酸乙酯对胃癌SGC-7901细胞增殖及凋亡的影响 被引量:5 2015年 目的探讨阿魏酸乙酯(EF)对胃癌SGC-7901细胞增殖及凋亡的影响。方法体外培养人胃癌SGC-7901细胞,采用不同浓度的EF作用SGC-7901细胞,设置5个复孔,作用24、36、48 h,MTT法检测细胞的增殖情况;用0和40μg/m L EF分别作用SGC-7901细胞24 h,DAPI染色法观察SGC-7901细胞形态学变化;另外,采用不同浓度的EF作用SGC-7901细胞24、36和48 h,Annexin V-FITC/PI法和流式细胞仪检测细胞凋亡情况。结果 40、80、120、160和200μg/m L浓度的EF分别作用SGC-7901细胞24、36及48 h,其对SGC-7901细胞的IC50分别为158.86、142.48和128.07μg/m L;40μg/m L的EF作用SGC-7901细胞12 h,经DAPI染色,SGC-7901细胞的细胞核固缩,出现凋亡小体;经Annexin V-FITC/PI法检测,EF对SGC-7901细胞的凋亡有明显的诱导作用,并且随着EF作用浓度和时间的增加,凋亡率增加。结论 EF能有效抑制SGC-7901细胞增殖,并能诱导SGC-7901细胞凋亡,两种作用均呈浓度和时间依赖性。 喻丽红 唐福才 胡娅嫚 周亮 李小辉 郭炳鹏 叶艳琼 吴文浩 谭茵关键词:胃癌SGC-7901细胞 细胞增殖 细胞凋亡 慢性肾小球肾炎与HLA免疫遗传强关联 被引量:12 1999年 目的 评估人类组织相容性抗原(HLA) 在慢性肾小球肾炎所致肾功能衰竭病人中的免疫遗传学本质。 方法 用单抗免疫磁珠HLAⅠ类分型和PCRSSPHLAⅡ类分型技术,对广东地区219 例汉族慢性肾小球肾炎病人和406 例健康人进行HLAⅠ、Ⅱ类抗原频率,基因频率,单倍型频率,风险系数等分析。 结果 疾病组HLAB13 、B35 、B55 、DR7 、DR10 、DR12 、DQ7 基因频率和AllB60 、AllDR10 、AllDR12 、AllDQ7 、A24DR14 、DR10B60 、DR10DQ7 、DR12DQ7 单倍型频率显著升高(RR> 384 ,P 均< 005) 。结论 慢性肾小球肾炎与HLA 系统免疫机制有较强关联,HLAB55 、DR10 、DQ7 可能是广东人群易感慢性肾小球肾炎的风险因子。 肖露露 于立新 陈洪涛 魏冬梅 叶欣 朱兰英 杨浣青 黄英伟 谭茵关键词:肾小球肾炎 组织相容性抗原 免疫遗传