聂宇
- 作品数:10 被引量:10H指数:3
- 供职机构:中国医学科学院阜外心血管病医院更多>>
- 发文基金:国家自然科学基金山西省自然科学基金国家教育部博士点基金更多>>
- 相关领域:生物学医药卫生更多>>
- Rab11的结构特征、效应因子与功能被引量:3
- 2008年
- Rab11是Rab小分子GTP酶家族的成员。在细胞内膜泡再循环途径中,Rab11作为重要调节因子,介导膜泡从内体向质膜的运输。近年来随着对Rab11研究的深入,人们发现该蛋白质在多种细胞生命活动中发挥着关键作用。现对Rab11的结构、效应蛋白及功能等方面进行了综述。
- 李江姣聂宇党旭红王伟
- EoRab43为八肋游仆虫中编码非典型Rab的基因被引量:6
- 2008年
- Rab蛋白是与真核细胞内的膜泡运输密切相关的调节分子。本研究运用简并引物PCR技术从原生动物八肋游仆虫大核基因组中克隆获得了一个全新的Rab基因,EoRab43 (GenBank登陆号为EU365391) ,该基因拟编码蛋白的氨基酸序列基本包括Rab蛋白保守的GTP结合区以及RabF模序。Blast结果显示,EoRab43序列与其它生物中Rab5A、Rab6和Rab13的一致性相对较高,但也仅为36·4 %-38·5 %,无法将其归类于任何现有的Rab蛋白亚家族。序列分析显示该基因拟编码的蛋白质属于非典型Rab,这是首次在游仆虫中发现的编码非典型Rab蛋白的基因,推测其在原生动物八肋游仆虫细胞内可能执行某些特殊的生理功能。
- 聂宇李江姣梁爱华杨欣张志云王伟
- 关键词:游仆虫基因克隆
- EoRab43参与游仆虫细胞内大核周围的物质运输被引量:3
- 2009年
- Rab家族蛋白是真核细胞内膜泡运输途径中重要的调节因子。EoRab43是八肋游仆虫中一种编码非典型Rab蛋白的基因。本研究依据已获得的EoRab43基因序列设计引物,从八肋游仆虫大核DNA中扩增了EoRab43基因的3′端153bp片段,即EoRab43153bp(对应于EoRab43蛋白的C末端50个氨基酸,EoRab43C),构建重组表达质粒pGEX-EoRab43153bp转化大肠杆菌BL21(DE3)进行表达,纯化后的融合蛋白GST-EoRab43C免疫BALB/c小鼠制备多克隆抗体。经检测,制备的抗体具有较高的效价及良好的特异性。利用制备的抗体对EoRab43在游仆虫细胞内进行免疫荧光定位,结果显示该蛋白主要定位于该生物细胞内大核染色体的周围。
- 李江姣聂宇梁爱华党旭红王伟
- 关键词:八肋游仆虫大核免疫荧光定位膜泡运输
- 八肋游仆虫Rab家族基因的多样性及一种非典型Rab蛋白的功能分析
- Rab蛋白(Rab Proteins)是存在于真核细胞内的一种小分子GTP酶(GTPase),其功能是与效应子(effector)协作,参与细胞内膜泡运输的各个阶段,包括膜泡的形成(formation),运动(motil...
- 聂宇
- 关键词:八肋游仆虫RAB蛋白免疫荧光定位膜泡运输
- 八肋游仆虫Rab家族基因克隆和多样性分析被引量:1
- 2010年
- Rab蛋白是在真核细胞内膜泡运输过程中起重要调节作用的一类小分子Ras-like蛋白,为Ras超家族中最大的家族。Rab家族成员在不同的生物中表现出数量的多样性和功能上的分化。为进一步了解Rab蛋白的多样性及其在真核细胞内膜泡运输网络中的功能,本研究利用游仆虫大核染色体特异的端粒结构和基因大小的染色体结构特征,通过简并引物PCR方法从八肋游仆虫(Euplotes octocarinatus)中克隆到9种新的Rab基因,分别为EoRab1A、EoRab2b、EoRab2c、EoRab2d、EoRab6、EoRab7、EoRab2-like、EoRabL2和EoRan(GenBank登陆号为HM371131~HM371139)。序列分析表明,游仆虫中Rab基因家族成员既包括具有维持细胞结构核心功能保守基因,又包括为适应环境而进化出的特殊功能的新基因。
- 李江姣聂宇许静王伟
- 关键词:八肋游仆虫RAB克隆多样性膜泡运输
- 提高干细胞移植治疗缺血性心脏病效果关键问题的应用基础研究
- 陈曦丛祥凤侯剑峰徐瑞霞陈静海朱伟铨韩变梅刘学文胡盛寿刘学彬李宗伟魏华邓琳子聂宇王芳
- 该成果属于医药卫生技术领域。围绕提高干细胞移植治疗缺血性心脏病疗效的关键问题,以改善缺血心肌微环境为研究重点,应用“预处理策略”从细胞和活体动物两个水平开展系统研究,主要技术创新点包括:1.模拟急、慢性心肌梗死微环境特点...
- 关键词:
- 关键词:干细胞移植缺血性心脏病
- 游仆虫EoRab2a蛋白的表达、纯化及定位分析
- 2011年
- Rab GTPase家族蛋白是真核细胞内膜系统转运途径中重要的调控因子,不同的Rab家族成员在细胞具有功能多样性。为了解Rab2的功能,八肋游仆虫EoRab2a基因连接入原核表达质粒pGEX-6P-1中,获得重组表达质粒pGEX-6P-1-EoRab2a。质粒pGEX-6P-1-EoRab2a转化大肠杆菌BL21(DE3),经IPTG诱导,大肠杆菌BL21(DE3)/pGEX-6P-1-EoRab2a高效表达了可溶性GST-EoRab2a蛋白。融合蛋白GST-EoRab2a经亲和层析获得电泳纯蛋白。纯化后的GST-EoRab2a免疫BALB/c小鼠制备多克隆抗体。ELISA和Western blotting检测显示制备的抗体效价1∶25600,特异性良好。免疫荧光定位表明EoRab2a在游仆虫细胞质中点状分布,推测参与内质网与高尔基体间膜泡转运。
- 许静李江姣聂宇梁爱华王伟
- 关键词:八肋游仆虫原核表达纯化免疫荧光定位
- 心外膜细胞在新生小鼠心肌再生过程中作用研究
- 目的探索新生小鼠心肌再生过程中心外膜细胞的作用。方法与结果建立了新生小鼠心尖切除再生模型,Western Blot、免疫荧光染色、流式细胞计数显示术后7-14天Wt1表达量及阳性的细胞均大幅上调术后21天则降低至基线水平...
- 刘锐聂宇郑哲胡盛寿
- 一种从血清中提取微核糖核酸的方法
- 本发明提供一种从血清中提取微核糖核酸的方法,它的的方法是取500μl血浆或血清中加入500μl TRIzol,涡旋震荡器剧烈震荡30s,室温静置5min;加100μl异丙醇,颠倒混匀,涡旋震荡器剧烈震荡30s,至液体透明...
- 聂宇陈曦丛祥凤侯剑峰张洋顾海勇
- 文献传递
- EoRab11a在游仆虫及HEK293T细胞中的定位
- 2010年
- Rab11是一种在真核生物细胞生命活动过程中发挥多种调控作用的小分子GTP酶.EoRab11a是八肋游仆虫中的Rab11蛋白同源物,为了解EoRab11a蛋白在细胞中的功能,本研究将EoRab11a基因克隆到哺乳动物表达载体pEGFP-C2中,构建重组表达质粒pEGFP-C2-EoRab11a,转染HEK293T细胞并观察其细胞定位.在间期HEK293T细胞中,EoRab11a定位于细胞核附近;在游仆虫细胞中,EoRab11a具有相似的分布模式.在HEK293T细胞的胞质分裂过程中,EoRab11a在分裂沟附近、分裂沟收缩区、以及最后形成的中间体处分布,提示EoRab11a可能参与了胞质分离过程中分裂沟及中间体处的膜泡运输事件.
- 李江姣聂宇许静梁爱华王伟
- 关键词:八肋游仆虫细胞定位胞质分裂